2例B（A）表型无偿献血者的家系调查

闫晓鹏 韩惠云 李雪英

河南省焦作市中心血站，河南焦作 454000

2例B（A）表型无偿献血者的家系调查

闫晓鹏 韩惠云 李雪英

河南省焦作市中心血站，河南焦作 454000

目的 对2例B（A）表型无偿献血者的家系进行调查，了解该血型在家系中的传递情况。 方法 （1）用2个生产厂家的单克隆抗血清和自配的ABO细胞，对献血者1家系19人、献血者2家系12人进行ABO正反定型。凡正定型凝集强度＜4+，反定型凝集强度＜2+，或正反定型结果不符的标本，分别与人源抗-A、抗-B，抗-H，抗-A1，A2及A2B细胞进一步反应进行亚型鉴定。（2）凡血清学确定为亚型或疑为亚型的标本，均由上海市血液中心血型参比实验室进行基因检测。 结果 在献血者1家系19人中共发现亚型8人，其中，5人表现为B（A）表型血清学特点，3人表现为 ABX亚型血清学特点，经基因检测均为B（A）02基因携带者；献血者2家系12人中共发现亚型5人，均表现为B（A）表型血清学特点，经基因检测均为B（A）04基因携带者。 结论 B（A）基因在两个家系中呈稳定的显性遗传趋势，ABO基因定型方法是正确判定血型不可缺少的辅助手段。但在分子生物学还不能普及的基层血站及医院，采用家系调查的方法，观察弱抗原在家系中的传递情况，有时可推测弱抗原的性质，对血清学诊断不明确的亚型标本的鉴定具有一定帮助。

B（A）表型；家系调查；基因；血清学

ABO亚型是指在常见的人类A、B、O、AB 4种血型之下进一步细分的 ABO 血型[1]。比如 A 血型的 A2、Aint、A3、AX、Aend、Am、Ay、Ael等 ，B 血 型 的 B3、BX、Bend、Bm、Bel等 ，AB 型 的 A2B、A3B、AB3、AXB、ABX、cisAB、B（A）等。所有 ABO 亚型均具有遗传基础，并可通过家系调查或分子生物学方法进行确认[2]。本站近日对无偿献血者中发现的2例B（A）表型进行家系调查，报道如下：

1 材料与方法

1.1 材料

1.1.1 试剂 单克隆抗-A、抗-B（分别由上海血液生物医药有限责任公司和北京金豪生物技术有限责任公司提供）；人源抗-A、人源抗-B、抗-A1、抗-H、A2细胞、A2B 细胞（均由上海血液生物医药有限责任公司提供）；所有试剂均在有效期内使用。ABO细胞（由本室使用当天自配）。

1.1.2 仪器设备 KA-2200血球洗涤离心机（日本KUBOTA公司）；SBHW2-1型电热恒温水浴箱（北京医疗设备厂有限责任公司）。

1.2 方法

1.2.1 血型血清学试验 （1）ABO正反定型：分别用2个生产厂家的单克隆抗血清和自配的ABO细胞，对献血者1家系19人、献血者2家系12人进行ABO血型鉴定。凡正定型凝集强度＜4+，反定型凝集强度＜2+，或正反定型结果不符，均视为ABO血型异常，需进一步增加相关试验进行亚型鉴定。（2）亚型检测：对ABO血型鉴定异常的标本，增加以下试验并按文献[3]进行亚型检测及结果判定，①和多克隆人源抗-A、抗-B反应；②和抗-H反应并观察其反应强度；③和抗-A1反应；④和A2细胞、A2B细胞反应；⑤吸收放散试验。

1.2.2 分子生物学确认试验 将血清学检测为亚型的标本快递至上海市血液中心，由血型参比实验室协助进行ABO基因检测。

2 结果

通过血型血清学试验，在献血者1家系19人中共发现亚型8人，其中，5人表现为B（A）表型血清学特点，3人表现为ABX亚型血清学特点；献血者2家系12人中共发现亚型5人，均表现为B（A）表型血清学特点。所有血清学确认为亚型或疑为亚型的标本，由上海市血液中心血型参比实验室进行基因检测。结果见表1。

表1 2名献血者家系异常血型检测结果

3 讨论

由表1可见，本次2个家系的基因测定结果均为国内已报道的 B（A）*02 和 B（A）*04 等位基因[4]，并在家系中呈稳定的显性遗传趋势。B（A）*02的B基因是在nt700处发生了单碱基突变C＞G，B（A）*04的B基因则是在nt640处发生了单碱基突变A＞G，从而导致变异的B基因具有了编码双功能活性酶的能力。因此，B（A）表型的血清学除了表现基本正常的B抗原特异性外，还表现少量A抗原特异性，极易被误定为B型而输注给B型患者，给安全输血带来一定隐患。采供血机构应选择高质量的抗血清进行血型鉴定，以避免B（A）表型的漏检[5-8]。

表1还显示，在血清学检测时，献血者1家系中有3人表现为ABX亚型特点，如果不是在B（A）表型家系调查中发现，作为日常工作中遇到的标本，不进行基因检测，很难证实其弱的B抗原是由于B（A）基因所致。因为基因研究显示，ABX和B（A）具有完全不同的分子生物学基础。B（A）表型是由于B基因发生了单碱基突变而具有了编码双功能活性酶的能力，目前国际上报道了 6种 B（A）等位基因，即 B（A）*01～06[4]。而ABX或BX亚型则是由于B基因发生了单碱基突变而使B转移酶活性降低，导致B抗原弱表达，如Bw03基因即为B基因在nt721处发生单碱基突变C＞T所致。目前发现7种新的B等位基因与B的弱表达有关，即 Bw02～08[9]。可见，ABO基因定型方法由于能克服血型血清学方法的限制，是正确判定血型不可缺少的辅助手段。但由于分子生物学技术目前还难以在基层血站或基层医院普及，所以ABO亚型的检测仍以血型血清学为主。如果遇到血清学诊断不明确的标本，可采用家系调查的方法，观察弱抗原在家系中的传递情况，有时便可推测弱抗原的性质，对鉴定亚型有一定帮助。比如本文中献血者1首先作为先证者被确认为B（A）表型，在对其家系进行调查时发现，先证者父亲的血型为ABX，母亲为A，大哥为B（A），二哥和大姐均为ABX，并且B（A）血型在第三代中仍有传递，由此推测，献血者1父亲的基因型应该为A/B（A），母亲的基因型应该为A/O，献血者1和其大哥因遗传了父亲的B（A）基因和母亲的O基因，所以血型表现为B（A）；而其二哥和大姐因遗传了父亲的B（A）基因和母亲的A基因，所以血型表现为ABX；如果是血型表现为ABX的献血者1的二哥或大姐作为先证者，通过家系调查可得出同样的推论。另外，家系调查对确定患者的血型也非常有用。比如某患者的血型表现为Am，就需要判断患者的血型是真正的亚型还是由于疾病导致的抗原减弱，如果是亚型，在家系调查中应该有相同的血型传递，否则，很有可能是疾病导致的抗原减弱，应密切观察血型在病程中的变化情况，必要时进行分子生物学鉴定。

[1] 向东.ABO 亚型的检测[J].中国输血杂志，2010，23（8）：577-580.

[2]吴远军，吴勇，陈宝婵，等.Am亚型患者1例的血型血清学及输血[J].第四军医大学学报，2007，27（9）：863-864.

[3]肖星甫.输血技术手册[M].成都：四川科学技术出版社，1992：68-70.

[4]范亚欣，孟庆丽，潘凌子，等.1例罕见的B（A）亚型患者的血型鉴定和配血[J].中国输血杂志，2011，24（10）：892-893.

[5]方建华，刘玉振，温涛.国产单克隆抗体试剂漏检AX1例[J].中国输血杂志，2004，17（2）：119.

[6]徐洪卫.街头无偿献血漏检AXB亚型1例[J].临床输血与检验，2006，8（1）：57.

[7]王宏法，刘玉振.国产血型定型试剂导致BX亚型漏检1例原因分析[J].中国误诊学杂志，2008，8（25）：6152-6153.

[8]宿兰，杨世英，廉维，等.罕见的B（A）表型血清学及基因检测[J].中国输血杂志，2010，23（3）：200-202.

[9]李蓓，李继明，郭忠慧，等.1例BX亚型的分子生物学研究[J].中国输血杂志，2006，19（1）：33-34.

Family Investigation of 2 cases of B(A)phenotype gratis blood donors

YAN Xiaopeng HAN Huiyun LI Xueying
The Central Blood Station of Jiaozuo City in Henan Province,Jiaozuo 454000,China

ObjectiveTo investigate the genealogy of 2 cases of B(A)phenotype gratis blood donors,in order to understand the transmission of the blood type in genealogy.MethodsMonoclonal antiserum produced by two manufacture factories and self-make ABO cells were used to proceed ABO positive and negative stereotypes among 19 people of blood donor 1 genealogy and 12 people of blood donor 2 genealogy.Specimen with positive stereotypes aggregation intensity＜4+,negative stereotypes aggregation intensity＜2+,or non-inconformity of positive and negative stereotypes results were given subtypes appraisal by further reaction with human anti-A,anti-B,anti-H,anti-A1,A2 and A2B cell.Subtype or subtype suspected specimen which were confirmed by serology were given genetic testing by blood type CST laboratory of Shaihai city blood center.ResultsAmong 19 people in blood donor 1 genealogy found subtype in 8 people,of whom 5 people expressed serological characteristics of B(A)phenotype,3 people expressed serological characteristics of ABX phenotype.Genetic testing showed that they were all B(A)02 genecarriers.Among 12 people in blood donor 2 genealogy found subtype in 5 people,who all expressed serological characteristics of B(A)phenotype.Genetic testing showed that they were all B(A)02 genecarriers.ConclusionB(A)gene shows a stable dominance heredity trend in two families.ABO gene stereotypes method is the necessary auxiliary means to correctly determine the blood type.Basic level blood stations and hospitals which can not popularize molecular biology,family study method is adopt to observe the weak antigen transmission in genealogy,and sometimes can speculate the character of weak antigen.It has helped to identify subtypes specimens which can not be diagnosed by serology.

B(A)phenotype;Family investigation;Gene;Serology

R457.1+1

A

1674-4721（2012）06（b）-0072-02

2012-05-08 本文编辑：魏玉坡）