甘 梦,吴 鹏,王 娅,2,张 乐,左之才,2
(1.四川农业大学动物医学院,四川 雅安 625014;2.动物疫病与人类健康、环境公害与动物疾病四川省重点实验室,四川 雅安 625014)
羊传染性胸膜肺炎又称羊支原体性肺炎,是由多种支原体所引起,以高热、咳嗽、胸膜浆液性和纤维素性炎症为临床特征的高度接触性传染病,俗称“烂肺病”。常年均可发生,但多以冬春季节为主,常呈地方性暴发流行,且流行时间较长,死亡率高。羊肠毒血症是由D型产气荚膜梭菌引起的一种急性毒血性疾病,因该病死亡的羊肾组织易于软化,又称“软肾病”。该病呈散发性流行,发病率低,死亡率高。2011年3月,四川某羊场发生以体温升高,大叶性肺炎,真胃、小肠严重出血和急性死亡为主症的疾病;经尸体剖检、病原的分离鉴定及治疗确诊为支原体和D型产气荚膜梭菌混合感染引起的羊传染性胸膜肺炎和羊肠毒血症并发病。报告如下。
四川某羊场进口的肉绒兼用新品种羊,6日上午突然发病,病羊表现为精神高度沉郁,卧地,食欲废绝,体温升高达41℃,呼吸急促,咳嗽,胸部触诊压痛,心跳频率达120次/min,可视黏膜潮红,次日上午,发病羊死亡。病死羊腹部高度臌胀,头颈伸直,口鼻中流出红色泡沫样鼻液。次日下午又死亡1只,病情呈蔓延趋势,1~1.5周岁羊病情严重,体温升至39.5℃~40℃,个别羊达到40.6℃。羊场立即对健康羊紧急接种三防四联苗;并将病死羊送往我实验室进行剖检。
病死羊头颈后仰,口鼻流红色细小泡沫;皮下出血。腹部臌胀,打开腹腔,有腐败臭味,腹腔有积液;肝、脾出血肿大,肝脏质脆,表面有蚕豆大小浅黄色坏死灶;胆囊充盈,胆汁浓稠有黑色颗粒状物;真胃及小肠出血严重,整个空肠、回肠出血,小肠淋巴结出血、呈大理石样;肾脏质地变软,似脑髓状。胸腔积液;肺脏出血严重、实变,切面呈大理石样,质地坚硬,缺乏弹性;心包有纤维性渗出液,心脏体积增大,血液凝固不良;气管内有大量红色细小泡沫样液;下颌淋巴结出血、肿胀,沿气管周围颈肌出血严重。
3.1 涂片镜检 采取肺、肝、肾等病变组织触片、染色镜检见革兰阳性、两端钝圆的粗大杆菌,排列整齐,呈单个散在或双链排列,菌体中央有大而卵圆的芽孢,记录为细菌A;呈球状、杆状的多型性、瑞氏染色呈淡紫色的微小细菌,记录为细菌B。
3.2 分离培养 病料接种于绵羊血琼脂和加10%血清的BHI琼脂,37℃厌氧培养24h后,血平板上长出直径3mm左右、半透明、表面光滑、隆起、呈β溶血的菌落;BHI琼脂上长出灰白色、半透明、圆形、光滑隆起的菌落。染色镜检,可见细菌形态大小同细菌A基本一致。72h后,在BHI琼脂上长出湿润、透明,中心深入培养基中的微小菌落,用接种环不易刮下。染色镜检,可见细菌形态大小同细菌B基本一致。
3.3 生化试验 细菌A能使牛乳培养试管发酵,产酸产气;发酵葡萄糖、麦芽糖、乳糖、蔗糖,消化酪蛋白,水解明胶,而酯酶、卵磷脂酶、吲哚试验为阴性。细菌B能分解葡萄糖和甘露醇,能液化明胶和消化酪蛋白,而水解精氨酸、分解尿素,磷酸酯酶试验为阴性。根据细菌形态、培养特性及生化特性,鉴定A菌为产气荚膜梭菌,B菌为支原体。
3.4 药物敏感试验 选用10种常用抗生素纸片进行药物敏感试验,结果判定参考美国临床实验室标准化委员会(NCCLS)推荐纸片扩散标准。结果表明,两种病原菌的药物敏感程度相近,都对四环素、环丙沙星、氧氟沙星、阿米卡星、卡那霉素、氟苯尼考和强力霉素敏感;对红霉素、先锋V比较敏感;对苯唑青霉素耐药。
3.5 动物试验 取12只小鼠,分为4组,每组3只。取病死羊回肠内容物,经离心沉淀后取上清液分成两份,一份不加热处理,一份60℃30min处理,分别腹腔注射第1、2两组小鼠(0.3mL/只);再用支原体增菌肉汤注射第3组小鼠(0.3mL/只);对照组注射同等剂量的生理盐水。结果显示,加热处理组和对照组小鼠未见异常,第1组和第3组小鼠均在24h内死亡。将死亡小白鼠肝脏组织进行细菌分离培养,触片镜检,分别检测到产气荚膜梭菌和支原体。
根据病畜临床症状、病理剖检特点、病原菌的分离与鉴定,诊断该病为产气荚膜梭菌和支原体混合感染所致,为羊传染性胸膜肺炎和羊肠毒血症并发病。
选用敏感药物阿米卡星、环丙沙星治疗。病情轻,有一定精神、食欲,体温低于39.5℃的病羊,采用阿米卡星(6mg/kg体重),酚磺乙胺注射液(2 mL/头),肌肉注射,1日2次,3日1疗程。病情较重,精神、食欲较差,体温高于39.5℃的病羊,除采取上述药物治疗外,另采用补液疗法(按40kg体重羊计算):5%葡萄糖生理盐水200~300mL、维生素C 1.5~2g、维生素B61.5~2g、肌苷1.5~2g、10%葡萄糖酸钙20mL;0.5%盐酸环丙沙星注射液100mL;分别静脉滴注,每日1次,连用3日为1疗程。治疗1疗程后,病情轻者痊愈;病情重者明显好转,精神、食欲基本恢复正常,继续采用阿米卡星和酚磺乙胺治疗1疗程痊愈。
6.1 羊传染性胸膜肺炎和羊肠毒血症并发病在临床上以急性死亡为特征,较难及时确诊 因其早期临床表现以呼吸系统症状为主,除食欲外无明显消化道症状,动物死亡后剖检方可发现真胃、小肠严重出血,因此,临床诊断时易被漏肠毒血症。支原体和D型产气荚膜梭菌引起的疾病都能造成羊急性死亡,混合感染导致死亡则更快,所以临床症状表现不充分。支原体引起的羊传染性胸膜肺炎病理剖解特征为胸腔积液、肺部实变、气管出血、管腔多量细小泡沫样液;产气荚膜梭菌引起的羊肠毒血症剖检以真胃、小肠严重出血、肾脏软化等为特征。
6.2 初春为羊传染性胸膜肺炎和羊肠毒血症的高发季节 羊传染性胸膜肺炎的病原主要通过空气、泡沫经呼吸道传染,多发于初春和冬季[1]。阴雨连绵,冷热交替,羊群密集、拥挤等因素,能使羊只抵抗力降低,较易发病。羊肠毒血症的病原菌产气荚膜梭菌为条件致病菌,在自然界分布广泛,土壤、污水、粪便以及人畜的胃肠道内等都有分布,主要通过消化道传染,发于初春、秋末[2]。该羊场发病时期正值初春,为两种疾病的高发季节,骤变的天气使动物机体抵抗力降低,病原更易乘虚而入,引发本病。
6.3 羊传染性胸膜肺炎和肠毒血症早期,及时使用敏感抗生素治疗,疗效确实 本病例中,及时使用敏感药物(阿米卡星、环丙沙星等)进行治疗,及时控制了病情,避免因用药不当而延误治疗时机。病重者结合输液疗法,用葡萄糖、维生素、肌苷补充营养,钙制剂制止肺炎渗出有效缓解呼吸困难,取得了良好疗效。
6.4 定期接种疫苗、加强饲养管理及环境消毒是预防该病发生的重要手段 传染性胸膜肺炎可注射山羊传染性胸膜肺炎氢氧化铝菌苗,肠毒血症可注射三联四防苗(防羊快疫、猝狙、肠毒血症和羔羊痢疾)预防。平时应对周围环境加强消毒,可用5% 克辽林、10% 漂白粉或1%~2%火碱;注意圈舍保温、通风、干燥;隔离病羊,对病死羊只深埋或焚烧处理,防止病原扩散;加强羊只运动,增强机体抵抗力等。
[1]武庭斌,马建荣,乔红梅.羊传染性胸膜肺炎的流行及防治[J].畜牧兽医科技信息,2008(7):29.
[2]陆承平.兽医微生物学[M].北京:中国农业大学出版社,2001:318-321.