畜牧兽医科技文摘

畜牧兽医科技文摘

中药四黄提取物对AA肉仔鸡法氏囊组织结构的影响/金光明(安徽科技学院动物科学学院，安徽凤阳233100 ) ，韩玉娟， 丁常宏//安徽科学学院学报.-2012，(1).-5～8

试验研究了四黄提取物对AA肉鸡法氏囊组织结构的影响。选用1日龄健康的AA肉仔鸡200只，随机分为实验组和对照组，每组100只，分四个重复组。四黄提取物按200 mg/kg添加基础日粮中。试验期为42天。在42日龄时，从每个重复组中随机抽取10只鸡，颈静脉放血处死，采集各组鸡法氏囊的组织样本，置于Bouin固定液中，应用石蜡组织切片技术制作组织切片，OlympusCH-30显微摄影系统观察拍照。试验结果表明添加四黄提取物的试验组鸡的法氏囊较对照组鸡退化延缓，其中试验组鸡的法氏囊较对照组皱襞发达，法氏囊淋巴小结排列紧密。结果表明，四黄提取物可以延缓AA肉仔鸡法氏囊的退化。

猪繁殖与呼吸障碍综合征疫苗的应用现状及研究进展/王小三(河南科技大学动物科技学院，河南洛阳471003)，张春杰，赵星灿//河南农业科学.-2012(3).-12～15

简要介绍了猪繁殖与呼吸障碍综合征（PRRS）的病原特点，综述了PRRS常规疫苗的特性与应用现状、新型疫苗及其研究进展，并对其发展前景作了展望。

猪细小病毒HNZM01株NS1基因的克隆及序列分析/郭东辉，(河南农业大学牧医工程学院，河南郑州450002)王超群，王建辉…//河南农业科学.-2012，(3).-137～141

为加强猪细小病毒病的监控，对分离的猪细小病毒（PPV）HNZM-01株NS1基因的序列进行了分析。设计一对特异性引物，以抽提的PPV HNZM-01株的DNA为模板，通过PCR反应扩增出大小约2.27kb的目的片段，并将其插入克隆载体pGEM-T Easy上，构建了重组质粒并测序。结果表明，NS1基因全长1 989bp，与预期目的片段大小一致。序列分析结果表明，PPV HNZM-01株的NS1基因与其他PPV毒株同源性在98.2%～99.8%，说明NS1基因具有高度保守性。同时应用ANTHEPROT软件分析了HNZM-01株NS1基因编码蛋白质的氨基酸组成和二级结构的含量、分布。结果表明，由于HNZM-01株中碱基的突变，造成其氨基酸序列与NADL-2株有所不同，形成的二级结构略有差异，但二级结构元件分布大致与NADL-2株相同。

霍乱弧菌中弧菌素合成酶VibF的A结构域基因的克隆、表达与纯化研究/刘秀华（河北大学生命科学学院，河北保定071002），王执，徐素娟//河南农业科学.-2012，(3).-149～153

弧菌素合成酶的A结构域在弧菌素的合成过程中发挥着重要作用。使用DNAStar软件对A结构域的蛋白质二级结构进行预测，截取了多组不同氨基酸长度的A结构域片段。使用PCR方法从霍乱弧菌N16961的基因组中克隆了A结构域基因，通过酶切、连接等方法将其构建到表达载体pET-21b（＋）上，并在大肠杆菌BL21（DE3）中得到高效表达。在30个不同氨基酸长度的A结构域蛋白片段中获得5个可溶性表达的片段；并且通过三步分离纯化的方法获得了一性状良好、均一和高纯度的A结构域蛋白（N861-1410），从而为A结构域蛋白质晶体生长提供了基础。

牛双芽巴贝斯虫rap-1基因的克隆与序列分析/韩琳（甘肃农业大学动物医学院，兰州730070），张继瑜，袁莉刚…//湖北农业科学.-2012，(6).-1251～1253

对牛双芽巴贝斯虫（Babesia bigemina）潜在药物靶标Rap-1的基因进行克隆与序列分析。以兰州株牛双芽巴贝斯虫基因组为模板．经PCR扩增获得了rap-1基因．将该基因克隆到pGEM-T Easy Vector上，对重组质粒进行PCR扩增，对目的基因进行酶切鉴定及序列测定分析。结果表明，rap-1基因长度为846bp．同源性分析结果显示．克隆序列与GenBank收录的巴西株牛双芽巴贝斯虫的核苷酸序列同源性为99．74%，说明兰州株牛双芽巴贝斯虫的rap-1与GenBank公布的参考基因具有高度同源性，rap-1基因具有很高的保守性。

16株猪2型圆环病毒全基因组克隆及序列分析/莫敏（石河子大学动物科技学院，石河子832003），王静梅，李劼…//石河子大学学报：自然科学版.-2012，(1).-37～42

采用猪2型圆环病毒（PCV2）型特异性引物，通过PCR方法直接从疑似PMWS病猪肺、淋巴结病料中扩增出16株PCV2的全基因组序列，将扩增产物回收连接到pMD19-T，转化到DH5α后进行克隆测序。结果显示：16株PCV2中，有12株基因组全长为1767bp，1株全长为1766bp，3株PCV2的基因组全长为1778bp。同源性分析结果表明，16株PCV2之间的核苷酸同源性为95.7%～100%，与GenBank已发表的9株PCV2分离株基因组同源性为94.3%～99.9%，与2株PCV1分离株基因组的同源性为76.6%～77.3%；遗传进化树显示16株PCV2主要分为2种基因型，其中134-ZF1、134-ZF2、134-ZF3、141-ZF1、141-ZF2、141-ZF3、142-TL1、142-TL2、142-TL3、142-TL4、142-TL5和148-ZF3这12株与AF055394（法国株）同属于PCV2b亚型，亲缘关系较近；133-ZF1、143-2-15、148-ZF1和WJQ001与AY181946（中国株）同属于PCV2d亚型，组成一个分支。所得的16株PCV2的ORF2核苷酸及其所推导的氨基酸序列与参考株同源性分别为90.2%～99.9%和92.1%～100.0%，存在较大的变异。

致奶牛恶性水肿腐败梭菌的分离鉴定/张小燕（石河子大学动物科技学院，石河子832003）， 王静梅，孙延明李 …//石河子大学学报：自然科学版.-2012，(1).-47～50

为确诊某规模化奶牛场奶牛爆发恶性水肿死亡病例，采取病变组织触片染色，分离培养，分离菌形态观察，生化鉴定、实验动物接种、16SrRNA同源性序列分析鉴定。结果显示：病死牛肝触片染色菌体形态、分离株培养及菌体形态、生化反应均符合腐败梭菌特征；分离株PCR产物测序后与GenBank已发表的参考基因相应片段同源性比较，同源性为95.43%；分离株培养物经肌肉与腹腔分别接种豚鼠及小鼠后均引起死亡，肝触片染色镜检，其菌体形态与奶牛病例相同。结果表明，该奶牛场奶牛死亡系由腐败梭菌感染引起的恶性水肿所致。

传染性法氏囊病病毒NN1107广西株的分离鉴定及遗传进化分析/李军（广西兽医研究所，广西南宁530001），陶立，兰美益…//动物医学进展.-2012，(4).-63～67

为研究从广西南宁市某鸡场疑似患传染性法氏囊病的鸡群中分离鉴定出的一株传染性法氏囊病病毒NN1107株的分子特征，通过反转录-聚合酶链反应特异扩增后进行克隆、序列分析。NN1107株VP2基因高变区（vVP2）的克隆测序和序列比较结果显示，序列符合超强毒传染性法氏囊病病毒（vvIBDV）的分子特征；其与广西vvIBDV毒株的核苷酸同源性在96%～99.6%之间。根据vVP2核苷酸序列同源性绘制的遗传进化树结果显示，NN1107株属于vvIBDV毒株群，与2004年、2005年、2007年和2010年流行毒株BH09、NNTZ（3）、NN07122、HP1001的亲缘关系最近，与疫苗株B87（in）、Bursine-2、FW2512株的亲缘关系较远。

口蹄疫合成肽疫苗研究进展/李婷婷（东北农业大学动物医学学院，黑龙江哈尔滨150030），王君伟//动物医学进展.-2012，(4).-76～79

口蹄疫（FMD）是一种严重威胁世界畜牧业发展和国际进出口贸易的重大传染病。尽管FMD传统疫苗在免疫效力上具有一定优势，但其自身仍存在诸多弊端及隐患。随着分子生物学技术的飞速发展，及其在兽医领域不断取得的创新性应用，FMD合成肽疫苗作为新型基因工程疫苗的一种，以其具有更为广谱的特异性、更加安全稳定、经济实用等特点，现已成为FMD研究领域的主要热点及方向。论文从抗原位点的选择、空间构象的研究、疫苗载体的探索以及免疫佐剂的优化等多方面对FMD合成肽疫苗的发展过程及其研究进展进行了深入探讨，旨在为FMD合成肽疫苗的进一步发展以及其他病原微生物合成肽疫苗的深入研究提供借鉴。

抵抗素样Relmβ分子研究进展/王静（华南农业大学动物科学学院，广东广州510642），刘义志，谢青梅//动物医学进展.2012(4).-79～84

Relmβ亦称发现于炎症带2（found in inflammatory zone2，FIZZ2），是一种富含半胱氨酸的分泌蛋白。目前的研究表明，Relmβ在许多方面发挥着非常重要的作用，包括胰岛素抵抗，抵制肠腔寄生线虫的感染，预测胃肠道肿瘤的发生，促进小鼠结肠炎和回肠炎模型中的炎症反应，诱导肺部纤维化、缺氧肺血管的重建，促进气道重塑等。通过对Relmβ分子的结构、表达分布、生物学功能的研究进展进行归纳，为Relmβ分子在生物学和医学方面更深入的研究提供参考。

新城疫病毒结构蛋白功能及检测技术研究进展/邹海涛（南京农业大学动物医学院，江苏南京210095），兰邹然，姜平//动物医学进展.-2012，(4).-85～89

新城疫是一种由新城疫病毒引起的烈性传染病，病死率很高，严重危害家禽养殖业，被世界动物卫生组织列为必须报告的动物传染病。在我国，新城疫的暴发和流行虽然已得到了控制，但病毒的变异给新城疫的防控工作带来了困难。新城疫病毒的隐性感染也对我国禽类产品的质量及出口造成了一定影响。因此，明确新城疫病毒各结构蛋白的功能、改进现有检测技术以及开发新的检测技术平台是目前新城疫防控工作的重点。论文对新城疫病毒结构蛋白功能及检测技术的进展进行了系统的阐述。

三种猪繁殖与呼吸综合征疫苗免疫效果评价/王建（上海市动物疫病预防控制中心，上海201103），齐新永，李凯航…//动物医学进展.-2012，(4).-107～113

为研究不同猪繁殖与呼吸综合征病毒（PRRSV）疫苗的的免疫特性，分别采用PRRSV变异株（JXA1-R）弱毒疫苗、经典PRRSV（VR 2332）弱毒疫苗、变异株（JXA1）灭活疫苗，免疫接种PRRSV抗原和抗体阴性的健康断奶仔猪，免疫接种后70d用PRRSV变异株强毒攻毒，ELISA检测血清中PRRSV特异的抗体水平及IFN-γ、IL 2、IL 4、IL 8、IL 10的水平，并进行临床症状和肺部病理组织学观察和评分。结果表明，VR 2332、JXA1-R弱毒疫苗对免疫猪攻毒保护效果差异不显著，均为63.6%（7/11），JXA1灭活疫苗免疫攻毒保护效果较差，为36.4%（4/11）。试验还发现病毒感染猪血清中细胞因子IFN-γ和IL-10的比值可以作为评价疫苗免疫效果的一个指标。

不同肠球菌基因组DNA提取方法对PCR鉴定的影响/张祥（河南农业大学牧医工程学院，河南郑州450002），李晓博，谷素美…//河南农业大学学报.-2012，(1).-67～71

为研究肠球菌基因组DNA的不同提取方法对16SrRNA基因序列PCR、种属多重PCR、RAPDPCR等肠球菌鉴定结果的影响，分别采用6种基因组DNA提取方法（水煮法1、水煮法2、常规酚／氯仿抽提法、chelex-100法1、chelex-100法2和试剂盒法），对l株肠球菌标准菌株ATCC29212基因组DNA进行提取，以这些分别提取的DNA为模板在相同的扩增条件下进行PCR检测．结果表明，在16SrRNA基因序列PCR和种属多重PCR检测中以水煮法1进行肠球菌DNA的提取最适宜，而试剂盒法在RAPDPCR检测中效果最佳，

犬瘟热病毒N蛋白基因真核表达质粒的构建与瞬时表达/简子健（新疆农业大学动物医学学院，乌鲁木齐830052），马素贞，申卫红…//新疆农业科学.2012(3).-560～564

【目的】构建犬细小病毒（CPV）VP2基因真核表达质粒，为研究核酸疫苗奠定基础。【方法】参考GenBank中发表的CDV N蛋白基因序列设计引物， 采用RT-PCR方法从疑似犬瘟热病犬全血样品中扩增CDV N蛋白基因，将其克隆至真核表达载体pcDNA3.1（＋）。经测序验证后，小白鼠尾静脉注射瞬时表达CDV N蛋白基因，8 h取其肝脏提取总RNA，进行RT－PCR方法扩增。【结果】在病犬的全血样品中扩增得到1 572 bp的CDV N蛋白基因片段，并构建了真核表达质粒pcDNA3.1（＋）-CDV N，从瞬时表达的小白鼠肝脏总RNA中可扩增到目的条带。【结论】构建了犬瘟热病毒N蛋白基因真核表达质粒，并在小白鼠体内进行了瞬时表达。

脂多糖、苯酚、硫酸铜对红笛鲷非特异性细胞毒性细胞受体基因表达的影响/周晴（广东海洋大学水产学院广东省水产经济动物病原生物学及流行病学重点实验室暨广东省高等学校水产经济动物病害控制重点实验室，广东湛江524025），简纪常，鲁义善…//广东海洋大学学报.-2012(1).-1～10

应用Real-time PCR技术，研究脂多糖（lipopolysaccharide，LPS）、苯酚、硫酸铜刺激红笛鲷（Lutjanussanguineus）后非特异性细胞毒性细胞受体（NCCRP-1）基因在不同组织里的表达差异。结果发现，LPS刺激红笛鲷24 h后NCCRP-1在红笛鲷头肾、脾脏、胸腺、肝脏、心脏、脑、肌肉和肠组织中均有表达，其中头肾表达量最高，脾脏次之，然后依次是肝脏、脑、肌肉、胸腺和肠，心脏表达量最少。LPS、苯酚和CuSO4刺激红笛鲷后，随着刺激时间的增长，NCCRP-1表达量在各组织达到峰值的时间不同。以头肾为模式组织，RTPCR的结果显示，红笛鲷NCCRP-1在LPS、苯酚和CuSO4的刺激下的表达模式相似，随着时间的增加NCCRP-1表达量逐渐增加，分别在24、9、12 h处达到最高，达到对照组的52、30、24倍左右，之后表达量开始下降。免疫组织化学表明，NCCRP-1只在头肾、脾脏和胸腺的特定细胞中表达。