高效液相色谱法测定妇科消炎颗粒中芍药苷的含量

马涵涛 谢秀娟

妇科消炎颗粒是我院开发的中药新制剂，由赤芍、三棱等组成，具有活血化瘀，消炎止痛的功效，主要适用于妇科各类炎症等。赤芍为方中主药，赤芍有效成分为芍药苷。本文采用高效液相色谱法测定妇科消炎颗粒中芍药苷的含量，为该制剂的质量控制提供了快捷准确的方法，获得满意的效果。

1 仪器与材料

日本岛津LC-10AT高效液相色谱仪，SPD-10A紫外检测器，C-R6A处理机。芍药苷对照品(中国药品生物制品检定所，批号110736-200732，供含量测定用)，妇科消炎颗粒(本院制剂室提供，批号 20110305，20110316，20110323);甲醇、乙腈为色谱纯，其他试剂均为分析纯，实验室用水为超纯水。

2 方法与结果

2.1 色谱条件 色谱柱Shim-pack CLC-ODS(150 mm×6 mm)，流动相:乙腈-水(16∶65)，检测波长 230 nm［1］，柱温:室温;流速:1 ml/min。

2.2 溶液的制备

2.2.1 芍药苷对照品溶液的制备 精密称取芍药苷对照品适量，加甲醇制成0.5 g/L溶液作为对照品溶液。

2.2.2 供试品溶液的制备 精密称取妇科消炎颗粒5 g，研成细粉，置100 ml具塞锥形瓶中，精密加入甲醇50 ml，称定重量，放置过夜，超声处理40 min，放冷，再称定重量，用甲醇补足减失的重量，摇匀，用0.45μm微孔滤膜滤过，取续滤液作为供试品溶液。

2.2.3 阴性对照溶液的制备 仿照供试品溶液的制备方法制得缺赤芍的阴性对照溶液。

2.3 专属性实验 分别吸取对照品溶液、供试品溶液、缺赤芍的阴性对照溶液各5 μl，按以上色谱条件分别进样测定。结果，赤芍苷对照品保留时间约为9 min，阴性对照溶液在该时间无吸取峰，供试品溶液在该时间有吸取峰。

2.4 线性关系的考察 分别精密吸取对照品溶液2，4，6，8，10，12 ml分别置50 ml量瓶中，加甲醇稀释至刻度，摇匀，各进样5 μl测定。以对照品进样量C为横坐标，峰面积积分值A为纵坐标，绘制标准曲线，结果芍药苷在进样量0.2～1.2 μg范围内呈良好的线性关系。回归方程为A=819.05C+43.51，r=0.9999。

2.5 精密度试验 芍药苷峰面积的RSD为1.3%(n=5)

2.6 稳定性试验 精密吸取同一份供试品溶液5 μl，分别在0，1，2，4，6 h进样后测定，结果芍药苷峰面积基本不变，RSD为0.97%。

2.7 重复性试验 取同一批样品(批号20110305)5份，分别按样品测定法测定，结果平均含量为2.245 mg/g，RSD为1.2%。

2.8 加样回收率试验 精密称取已知芍药苷含量的妇科消炎颗粒6份，每份1 g，分别精密加入芍药苷对照品适量，按2.2.2项供试品溶液的制备方法处理，从“置100 ml锥形瓶中……”起操作，依法测定，计算回收率。结果平均回收率为100.4%，RSD为1.6%。

2.9 样品含量测定 取3个批号样品，分别精密吸取对照品溶液与样品溶液各5 μl，注入液相色谱仪，测定，外标法计算含量，即得。每批样品平均测定3次，结果含量为2.19 mg/g，RSD 为0.76%。

3 讨论

经比较甲醇-水、乙腈-磷酸二氢钾［2］、乙腈-水［3］、甲醇-0.5 mol/L磷酸二氢钾溶液［4］等流动相的分离效果，结果表明本文采用的乙腈-水的分离效果较好，保留时间适当。

分别对样品进行了甲醇索氏回流提取、甲醇超声处理等探索，结果以甲醇超声处理方法为最佳。

经多批样品中芍药苷的含量测定表明，该方法快速简便，结果准确，重现性好，灵敏度高，可作为该制剂的质量控制方法。

［1］ 中国药典委员会.中国药典.2005年版.一部

［2］ 于开红.高效液相色谱法测定偏瘫康复丸中芍药苷含量.中国药师，2010，13(2):297.

［3］ 王晓飞，等.高效液相色谱法测定开元颗粒中芍药苷含量.中国药师，2008，11(4):431.

［4］ 李水清.HPLC法测定十二太保丸中芍药苷的量.中国药师，2008，11(9):1078.