葡萄果实中葡萄糖苷酶VvBG1具有较高的生理活性

据《园艺学报》2012年第 6期《葡萄果实 β-葡萄糖普酶基因克隆、原核表达及活性检测》（作者董银行等）报道，以“玫瑰香”葡萄着色期的果肉为试材，通过反转录技术克隆了ABA合成相关酶-葡萄糖苷酶基因VvBG1的1518bp编码区核苷酸序列，其编码1个含有505氨基酸的多肽。生物信息学分析表明，VvBG1含有1个跨膜区和糖基水解酶1超家族保守域。通过BamHⅠ和XhoⅠ限制性内切酶将除去信号的编码区克隆到原核表达载体pET28a（+）中，并转化大肠杆菌表达菌株BL21（DE3），成功诱导并纯化了 VvBG1融合蛋白。经过透析复性和超滤浓缩得到了0.8mg·mL-1可溶的融合蛋白。通过纯化蛋白葡萄果肉均浆液孵育试验和GC-MSABA含量分析证实了葡萄果实中β-葡萄糖苷酶VvBG1具有较高的生理活性。