甲氨碟呤红细胞载体对肝癌模型大鼠肝肾功能影响观察

彭丽华

甲氨碟呤红细胞载体对肝癌模型大鼠肝肾功能影响观察

彭丽华

（河南省郑州市中医院药剂科，郑州 450003）

探讨甲氨蝶呤红细胞载体（MTX-RBCs）对于肝癌模型大鼠肝肾功能的具体影响。选取40只大鼠分为4组建模给药，观测各组大鼠生存时间与体重的变化，提取癌性组织和血清样本，检测丙氨酸氨基转移酶（ALT）、天门冬氨酸氨基转移酶（AST）、肌酐（Scr）、血清尿素氮（BUN）等指标，同时比较各组大鼠生存状况和体重。MTX-RBCs静脉给药组明显延长了大鼠生存期限；与MTX静脉注射组和模型对照组比较，MTX-RBCs静脉给药组的大鼠相关指标均明显降低。MTX-RBCs静脉注射对于大鼠肝肿瘤的形成有显著的抑制作用，对大鼠的肝肾功能也有明显的保护作用。

甲氨蝶呤红细胞载体；大鼠；肝肾功能

作为一种新兴的靶向给药系统，甲氨蝶呤红细胞载体把动物或人的红细胞（RBC）经过体外处理，将活性物质包载进RBC里，成为载药RBC回到动物与人体内，在有效性和安全性上有良好的表现[1]。本研究运用高渗法进行红细胞载体的制备，得到MTX-RBCs，注入肝癌模型大鼠体内，观察其对大鼠肝肾功能的影响。现报道如下。

1 资料与方法

1.1 一般资料 选取清洁级的SD大鼠，均为雄性，体重平均（240±18）g；注射用的甲氨蝶呤、ALT试剂盒、AST试剂盒、Scr试剂盒、BUN试剂盒均为南京建成生物工程研究所生产提供；W256肝癌细胞株由南京中医药研究所生产提供；研究中采用BX51光学显微镜和UV2210紫外可见分光光度计。

1.2 方法 选取SD大鼠40只随机分为4组，MTX静脉注射组、MTX-RBCs静脉给药组、模型对照组以及空白对照组；在W256细胞株复苏、接种和传代过程中，确保第3代大鼠细胞活力达到建模要求[2]；应用第3代大鼠进行接种建模，严格记录各组大鼠的体重变化及异常情况；于建模第3天，取MTX静脉注射组、MTX-RBCs静脉给药组的20只大鼠称重，经股静脉注射分别给予MTX注射液及MTX-RBCs溶液，所用剂量均为5mg/kg。于第8天将各组大鼠注射麻醉，颈动脉取得血清样本。

1.3 指标测定 肝功能指标测定：进行ALT和AST水平检测，密切观察大鼠肝功能改变情况；肾功能指标测定：进行Scr和BUN水平检测，密切观察大鼠肾功能的改变情况。

2 结果

从肝功能变化来看，相比空白对照组，模型对照组的ALT与AST活力水平有明显提高（＜0.01），MTX静脉注射组的ALT及AST活力相比模型对照组进一步增强（＜0.01），MTX-RBCs静脉给药组则出现了明显的异常逆转（＜0.01），达到了正常水平。

从肾功能变化来看，相比空白对照组，模型对照组的Scr和BUN水平有显著提高（＜0.01），MTX-RBCs静脉给药组能够显著降低Scr水平，而MTX静脉注射组无效（＜0.01），二者对于BUN水平均有明显降低作用（＜0.01）。各组大鼠体重变化和生存能力比较详见表1。

表1 各组大鼠体重变化与生存能力比较 （±s）

注：组间比较，具有统计学意义（＜0.05）

3 讨论

作为一种周期特异性抗代谢类的肿瘤药，甲氨蝶呤（MTX）得到过广泛的临床应用，但毒副作用极其明显，给患者带来了严重的痛苦和巨大的经济负担。而甲氨蝶呤红细胞载体很好的解决了这一问题。

直接注射MTX能够有效消灭癌细胞，对肝肾功能遭受的癌细胞破坏有一定的限制作用，但是MTX自身的毒副作用又造成了对于肝肾功能的威胁。有研究显示，MTX毒性具有剂量性的依赖，但如果确保MTX浓度位于一个有效而又平缓范围内，便可以降低毒副作用。从本研究来看，MTX-RBCSs静脉给药后，大鼠MTX血浆的峰浓度相比直接MTX注射组有显著下降，在体内的保留时间明显延长，呈现出缓释效应[3]。MTX-RBCs与MTX直接注射，对于大鼠肝肿瘤的形成都有明显的抑制作用，相比于其他组别，MTX-RBCs对大鼠的ALT、Scr及BUN等均有明显的逆转效果，对大鼠的存活能力有显著提高作用，这表明MTX-RBCs对大鼠的肝肾功能有明显保护作用。

综上所述，甲氨蝶呤红细胞载体对大鼠的生存能力和生存质量都有显著的提高效果，对肝肾功能也表现出了良好的保护作用，在临床应用上有待于进一步的研究和发现。

[1] 刘欣,吕哲.两种方式接种肝癌模型的比较[J].中国比较医学杂志,2007,17 (2):96.

[2] 葛卫红.甲氨蝶呤红细胞载体在大鼠体内药动学研究[J].中国新药杂志, 2008,17(15):1308.

[3] 霍晶.正交实验设计优化甲氨蝶呤红细胞载体制备工艺.[J].药学与临床研究,2007,15(4):285.

10.3969/j.issn.1672-2779.2012.01-092

1672-2779（2012）-01-0149-01

（本文校对：王治华 收稿日期：2011-10-23）