未成熟网织红细胞分数对评估30例造血干细胞移植效果的分析

董 磊，吉品健，刘 娟，马红雨△，冯 戟，全首祯，朱美财

(1.中国人民解放军空军总医院临床检验中心,北京 100142；2.大连医科大学检验医学院，辽宁大连 116044；3.中国人民解放军空军总医院输血科,北京 100142)

造血干细胞移植(hematopoietic stem cell transplant,HSCT)可以治疗多种血液病、实体肿瘤、免疫缺陷病和重度急性放射病，而在移植后对造血功能恢复的监测有利于病情的观察及制订治疗方案，是判定移植成功与否的重要依据。

传统监测造血功能恢复的方法主要是外周血细胞的计数，如中性粒细胞绝对计数(absolute neutrophil count,ANC)、PLT等，但受外界因素的影响较大。随着流式细胞技术和荧光技术的发展，新型的血细胞分析仪可将网织红细胞(reticulocyte,RET)分成低荧光强度 RET(LFR)、中荧光强度RET(MFR)和高荧光强度RET(HFR)，未成熟网织红细胞分数(immature reticulocyte fraction，IRF)为MFR和HFR之和，表示幼稚细胞占总RET的百分比[1-2]。研究表明，重度骨髓抑制后造血功能恢复开始于红细胞系统，红细胞植入早于粒系系统的重建，IRF是造血系统抑制后造血系统恢复的较敏感指标[3-5]。为探讨IRF在HSCT中造血功能恢复的临床意义，本研究使用Sysmex XE-2100血细胞分析仪对空军总医院30例白血病患者HSCT后的IRF进行动态检测，现报道如下。

1 资料与方法

1.1一般资料 空军总医院30例白血病HSCT患者，男21例，女9例；年龄3～48岁，中位24.5岁。其中，急性淋巴细胞白血病(ALL)10例，急性髓细胞白血病(AML)中M1、M4a、M4b、M5各1例，慢性粒细胞白血病(CML)3例，再生障碍性贫血(AA)7例，红白血病2例，急性粒单核细胞白血病(M4)1例，急性单核细胞白血病(M5)1例，骨髓增生异常综合征(MDS)1例，继发性骨髓纤维化(SMF)1例。

1.2方法

1.2.1检测方法 采用希森美康Sysmex XE-2100全自动血细胞分析仪、配套试剂及全血质控物。患者从移植前1 d至监测结束每天抽取静脉血2 mL注入真空抗凝管(EDTA-K2)混匀，严格按仪器操作规程对标本进行WBC、PLT、ANC、RET%及IRF等检测，标本检测在1 h内完成。

1.2.2造血功能恢复的指标[6-7]从患者接受移植术开始，依据WBC>3.0×109/L、PLT>50×1012/L、ANC>0.5×109/L、RET%>0.5%、IRF>0.2分别作为造血功能恢复的指标。

1.3统计学处理 采用SPSS17.0统计软件对数据进行分析，WBC、ANC、PLT、RET%及IRF两两比较用两组独立样本的t检验，以P<0.05为差异有统计学意义。

2 结 果

30例患者HSCT后WBC、PLT、ANC、RET%及IRF的恢复情况见表1。患者移植后WBC、PLT、ANC、RET%及IRF处于低值，其中ANC和IRF最低为0，随着患者造血功能的逐步恢复，IRF在移植后16.5(7～24)d达到0.2，ANC于18.5(10～27)d达到0.5×109/L，RET%在19.0(11～30)d达到0.5%，WBC在21.0(12～30)d达到3.0×109/L，PLT在26.0(13～37)d达到50×1012/L。IRF达到恢复指标天数短于WBC、PLT、ANC及RET%(P<0.05)，ANC及RET%达到造血功能恢复指标的天数要低于WBC及PLT(P<0.05)，而ANC与RET%恢复时间比较，差异无统计学意义。6.7%(2/30)的患者PLT首先升至恢复指标，而有93.3%(28/30)的患者IRF最先升至恢复指标。

表1 HSCT后WBC、PLT、ANC、RET%及IRF达到恢复指标时间(d)

3 讨 论

HSCT泛指将各种来源的正常造血干细胞在患者接受超剂量放、化疗后，通过静脉输注移植入受体内，以替代原有的病理性造血干细胞，最终实现造血重建和免疫重建。传统的HSCT后造血系统的重建观察指标如ANC、PLT等受影响较大，作为移植后造血功能恢复的评价指标有其局限性[8]。RET是晚幼红细胞脱核后到成熟红细胞之间的过渡细胞，因幼稚RET有大量RNA显示较强的嗜色性和光散射性，显示高荧光度值。当移植患者造血受到刺激时，大量幼稚RET从骨髓释放入外周血，IRF值相应增高，因此IRF能够反映骨髓红系造血功能，是判断贫血和相关疾病疗效的重要指标[9-11]。郭振涛等[12]研究表明，IRF能准确、敏感地反映患者应用重组人促红细胞生成素(recombinant human erythropoietin,rHuEPO)以后骨髓的造血状况，能够成为肾性贫血患者应用rHuEPO后早期疗效监测的有效指标。

本研究结果表明30例患者HSCT后最先升高并达到恢复指标的为IRF，时间要早于WBC、PLT、ANC及RET%，且有93.3%的患者IRF最早达到造血功能恢复的指标；ANC及RET%达到造血功能恢复指标的时间要低于WBC及PLT，而ANC与RET%达到恢复指标的时间比较，差异无统计学意义(P>0.05)。研究结果说明，患者移植后造血功能得到增强，骨髓生成RET的能力显著提高，较为幼稚的RET显著增多，而幼稚RET水平的改变一般比移植患者的WBC、PLT、ANC、RET%及临床症状的改变要提早出现。本研究结果可以看出，WBC及PLT作为造血功能恢复的监测指标并不适宜，而IRF是较为敏感的能够反映患者机体造血功能恢复情况的指标。Testa等[13]观察骨髓移植和外周血HSCT患者的HRF变化，发现在ANC上升前2～7 d，HRF就已增加，与本研究结果相一致。Molina等[14]认为IRF可作为可靠的异体HSCT后造血功能的预测因子。虽然ANC及RET%在反映机体造血功能恢复的时间上较IRF略有滞后，但作为目前常用的监测移植患者造血功能恢复的指标，它们仍具有重要的参考价值。有研究表明把IRF和ANC联合起来作为观察HSCT后造血功能恢复的指标将更有效，其符合率也将提高至90%以上[15]。

综上所述，在HSCT后， IRF的变化均明显早于WBC、PLT、ANC及RET%，是观察HSCT后造血功能恢复的敏感指标，对于HSCT后造血功能恢复的监测、病情观察及指导临床治疗有重要的应用价值。

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