运用GC-MS技术对2种淫羊藿挥发性成分的比较分析

施启红，吕 磊，李 玲，赵 亮，张国庆

(1.启东市人民医院药材科，江苏 启东 226200；2.第二军医大学东方肝胆外科医院药材科，上海 200438；3.第二军医大学药学院分析测试中心，上海 200433)

运用GC-MS技术对2种淫羊藿挥发性成分的比较分析

施启红1，吕 磊2，李 玲3，赵 亮1，张国庆2

(1.启东市人民医院药材科，江苏 启东 226200；2.第二军医大学东方肝胆外科医院药材科，上海 200438；3.第二军医大学药学院分析测试中心，上海 200433)

目的运用GC-MS技术对柔毛淫羊藿与朝鲜淫羊藿挥发性成分进行比较分析。方法采用水蒸气蒸馏法提取柔毛淫羊藿和朝鲜淫羊藿挥发油，运用气相色谱-质谱联用技术，结合计算机检索对其挥发油进行分离鉴定。结果共鉴定出2种淫羊藿中76个挥发性成分，其中28个共有成分。结论柔毛淫羊藿与朝鲜淫羊藿挥发油在组分和含量上存在一定的差异，本研究为2种淫羊藿药材的鉴别及质量控制提供了重要依据。

柔毛淫羊藿；朝鲜淫羊藿；挥发油；GC-MS

柔毛淫羊藿和朝鲜淫羊藿分别为小檗科植物柔毛淫羊藿EpimediumpubescensMaxim.和朝鲜淫羊藿EpimediumkoreanumNakai.的干燥地上部分，是我国传统的补益中药，始载于《神农本草经》，在中医上常用于补肾阳，强筋骨，祛风湿[1，2]。

近年来对于两种淫羊藿的研究报道以几个主要黄酮类成分的含量测定及指纹图谱研究居多[3，4]，对其挥发性成分分析的报道较少。对于单个淫羊藿挥发油研究的报道[5～8]，由于实验条件不同，结果各异。为能从整体上把握不同种淫羊藿药材挥发性成分的差异，现用统一的分析条件对2个品种淫羊藿挥发油成分进行比较分析，找出差异。本实验采用了水蒸气蒸馏法提取柔毛淫羊藿和朝鲜淫羊藿的挥发油，采用GC-MS首次对其进行了比较分析，为两种淫羊藿药材的鉴别及质量控制提供了重要依据。

1 仪器与试药

1.1仪器 Thermo Trace GC Ultra气相色谱仪(美国赛默飞世尔公司)，Thermo DSQⅡ质谱仪，Xcalibur工作站。挥发油测定器(上海华连医疗器械有限公司)； METTLER AE240型电子天平(德国梅特勒公司)； LX-02药材粉碎机(上海利祥公司)。

1.2试药 原药材柔毛淫羊藿产自湖北，购自上海德康大药房，批号20101121、20101215和20110104；朝鲜淫羊藿于产自东北，购自辽宁沈阳，批号20101209、20110129和20110217。经第二军医大学药学院生药教研室黄宝康教授鉴定分别为小檗科植物柔毛淫羊藿EpimediumpubescensMaxim.和朝鲜淫羊藿EpimediumkoreanumNakai.的干燥地上部分。所用试剂乙醚为分析纯，水为重蒸水，载气为高纯氦气。

2 方法与结果

2.1挥发油的提取 分别取柔毛淫羊藿和朝鲜淫羊藿药材各100 g，粉碎后置于圆底烧瓶中，加蒸馏水500 ml，按照《中华人民共和国药典》(一部)2010年版附录“挥发油测定项”中甲法提取挥发油，得到淡黄色、味浓香的油状液体，柔毛淫羊藿和朝鲜淫羊藿的出油率分别为为0.13%和0.14%。样品取10 μl以0.5 ml无水乙醚溶解 。

2.2气相条件 色谱柱TR-5MS(30 m×0.25 mm，0.25 μm)，分流比10:1，进样口温度250 ℃，程序升温(起始温度40 ℃ ，以20 ℃/min的速率升至150 ℃，然后以5 ℃/min升至220 ℃，再以20 ℃/min升至280 ℃并保持5 min)，传输线温度260 ℃，载气流速1 ml/min 。

2.3质谱条件 电离方式：EI源；电子能量70 eV；离子源温度200 ℃；质量范围(m/z)：30～450；检测器增益1.0×105；溶剂延迟时间2 min；质谱采集时间28 min。

2.4药材中挥发油的GC-MS图谱 分别取以乙醚溶解的柔毛淫羊藿和朝鲜淫羊藿挥发油，按“2.2”和“2.3”项下实验条件进样1 μl，得到2种淫羊藿挥发油的总离子流图，如图1所示。

图1 2种淫羊藿挥发油总离子流图A⁃柔毛淫羊藿(批号20110104)；B⁃朝鲜淫羊藿(批号20110129)

2.5两种淫羊藿药材中挥发油成分的GC-MS鉴别结果 每个组分的质谱图通过计算机检索与标准谱库(NIST,WILEY库)对照，以匹配度为基础(SI>800)结合相关文献[5～8]进行筛选。并以各色谱图扣除溶剂峰的全部峰面积作为100%，通过色谱峰面积归一化法计算得出各化学成分的相对百分含量，比较两者共有成分的在含量上的差异，共鉴定出76个化合物，结果见表1。由表可见，2种淫羊藿的挥发油含有24个共有成分，两者在组分和含量上存在一定的差异。

表1柔毛淫羊藿和朝鲜淫羊藿挥发油成分及其含量的比较(%)

3 讨论

3.1实验条件优化 挥发油提取首先考察了乙醚超声法，此法操作简单，但提取率低，提取物图谱峰容量少，后采用经典的水蒸气蒸馏法，获得良好收率。GC条件主要考察了程序升温的过程，经过系列优化，最后选择了起始温度40 ℃，以3个阶段升至280 ℃并保持5 min的过程，保证了采样时间短，峰容量大，分离度好。MS条件主要是对质谱检测范围的选择，在查阅相关文献并分析了淫羊藿中可能的挥发性成分后，选择了30～450(m/z)。

3.2鉴别结果分析 通过对两种淫羊藿各3个批次样品GC-MS分析，总共鉴别出中76个挥发油成分，其中柔毛淫羊藿66个，朝鲜淫羊藿38个，分别占各自挥发油总量的95.58%和93.37%。两者含共有化合物28个，柔毛淫羊藿中的38个成分与朝鲜淫羊藿中的10个成分为各自特有成分。从组分上看，两者挥发油中长链脂肪酸、不饱和醇及各种烃类居多。从含量上看，棕榈酸为2种淫羊藿中共有的含量相对较高的化合物，分别占挥发油总量的16.40%和22.03%，与文献报道一致[5～8]，但其它几种相对含量较高的化合物含量存在很大差异，如十四烷酸在朝鲜淫羊藿中的含量为19.31%，而在柔毛淫羊藿中没有；6,10,14-三甲基-2-十五烷酮在柔毛淫羊藿中的含量为13.96%，而在朝鲜淫羊藿中的含量仅为1.69%；植醇也仅在柔毛淫羊藿中有，含量为16.92%。推测可能两种淫羊藿生长环境不同而造成的差异。

综上所述，本实验运用GC-MS技术对柔毛淫羊藿与朝鲜淫羊藿挥发油成分进行比较分析，虽然两者挥发油含有大量共有成分，但在组分和含量上还是存在很大的差异。本研究为两种淫羊藿药材的鉴别及质量控制提供了重要依据，为淫羊藿的进一步合理应用提供了理论参考。

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[2] 谢娟平，孙文基. 淫羊藿属植物化学成分及药理活性研究进展[J]. 海峡药学，2006，18(5)：17.

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2011-06-25

[修回日期]2011-09-01

AnalysisoftheessentialoilfromtwovarietiesofepimediumsbyGC-MS

SHI Qi-hong1, LV Lei2, LI Ling3, ZHAO Liang1, ZHANG Guo-qing2

(1. Department of Pharmacy, People′s Hospital of Qidong, Qidong 200438，China; 2. Department of Pharmacy, Eastern Hepatobiliary Surgery Hospital, Shanghai 200438, China; 3. Pharmaceutical Analysis Center, School of Pharmacy,the Second Military Medical University of PLA,Shanghai 200433, China)

ObjectiveTo analyze the chemical components of the essential oil fromEpimediumpubescensMaxim.andEpimediumkoreanumNakai. by GC-MS．MethodsThe essential oil was extracted from two epimediums by steam distillation, the chemical components of the essential oi1 were detected by GC-MS, peaks and their corresponding compounds were identified through database index.Results76 chief components from two varieties of epimediums were identified, 24 components were noted in both.ConclusionThere were some differences in composition and content between the two kinds of epimediums. A scientific basis for the further identification and quality control of the two different species of epimediums was offered in this paper.

EpimediumpubescensMaxim；EpimediumkoreanumNakai；essential oil；GC-MS

施启红(1973-)，女，主管药师.Tel:13962828882，E-mail:shiqihong2011@126.com.

张国庆. Tel:(021)81875571，E-mail:guoqing_zhang91@126.com.

R917

A

1006-0111(2011)06-0445-04