青藏龙胆对四氯化碳所致小鼠急性肝损伤的保护作用

唐晓光

（赤峰学院 医学院，内蒙古 赤峰 024000）

青藏龙胆对四氯化碳所致小鼠急性肝损伤的保护作用

唐晓光

（赤峰学院 医学院，内蒙古 赤峰 024000）

目的：探讨不同剂量的青藏龙胆对CCl4所致的小鼠肝损伤的保护作用.方法：先采用青藏龙胆给药，再采用CCl4所致的小鼠肝损伤模型，用赖氏法测定小鼠血清丙氨酸氨基转移酶ALT含量,肝脏常规切片，观察病理组织学改变.结果：不同剂量的青藏龙胆组血清ALT含量明显低于CCl4组，镜下病理显示青藏龙胆对四氯化碳所致的小鼠急性化学性肝损伤有保护作用.

青藏龙胆；ALT；急性肝损伤

青藏龙胆（Flos Gentiance）系龙胆科龙胆属植物，是青藏高原特有的药用植物，目前资源尚未充分利用，该植物的带根全草民间供药用，其味苦，性寒，有清湿热，泻肝火，镇咳，利喉，健胃等功效，主治感冒发烧，目赤咽痛，肺炎，咳嗽，胃炎，脑膜炎，气管炎等.本实验观察青藏龙胆对CCl4所致小鼠急性肝损伤的保护作用.

1 材料和方法

1.1 药品和试剂

青藏龙胆：购自青海省西宁市八一路藏药市场，由中药教研室魏全嘉教授鉴定.

药用部位：水提取液，1g/ml.

ALT试剂盒：南京生物建成研究所操作严格按照试剂盒说明书进行四氯化碳：分析纯，中国医药集团上海化学试剂公司生产，批号W20051218

联苯双酯：联苯双酯片，25 mg/片，上海市医药股份有限公司天平制药厂生产，批号248004

1.2 仪器

721紫外分光光度计；切片机；数码照相显微镜

1.3 实验性肝损伤模型制备

取ICR远交系小鼠，雄性，体重（20±2），由青海省实验动物中心提供，将实验随机分为4组，每组动物10只.A正常对照组，正常饲养，无外加条件，B CCl4肝损伤模型组，用生理盐水0.2ml/20g小鼠灌胃，每天一次，连续10天.C青藏龙胆预防组，用青藏龙胆提取液0.2ml/20g小鼠灌胃，每天一次，连续10天.D联苯双酯片组：0.2ml/20g，连续10天，第11天进行CCl4所致实验性肝损伤模型制备；将CCl4与植物油按1：9配制，正常组给予植物油0.2ml/20g，其余各组给予CCl4植物油溶液0.2ml/20g，24小时后，小鼠断头取血，分离血清待测，同时，取出各组小鼠肝脏，用10%的福尔马林固定作病理切片.

1.4 血清相关酶学测定

1.4.1 血清肝功能酶ALT的测定

实验结束时，每鼠断头取血，3000r/min离心15 min，分离血清，按照ALT试剂盒说明测定ALT活性.

1.4.2 肝病理组织学观察

每鼠断头取血后，迅速摘取肝脏，取各鼠肝组织用百分之十甲醛固定，常规石蜡包埋，用切片机切片，片厚8um，HE常规染色，照相显微镜下观察肝组织的病理变化及照相.

1.6 实验组数据处理

统计学处理实验数据用SPSS11.5统计软件进行方差分析，采用±s表示

组别 鼠数 ALT正常组 A组 10 57.89±7.42模型组 B组 10 243.27±26.04青藏龙胆组 C组 10 184.92±13.74联苯双酯组 D组 10 157.76±6.67

说明：CCl4模型组小鼠血清ALT明显高于正常组（P〈0.01），青藏龙胆组小鼠血清ALT明显低于模型组，与模型组相比（P〈0.01）有显著意义.联苯双酯组血清ALT与模型组相比明显降低（P〈0.01），与模型组相比（P〈0.01）有显著意义.联苯双酯组与青藏龙胆组比较明显降低（P〈0.01）与青藏龙胆组有显著意义.

2 结果

2.1 青藏龙胆对CCl4肝损伤小鼠血清ALT的影响

由表结果可以得出：模型组小鼠血清ALT明显高于正常组表明对小鼠肝细胞造成严重损伤动物模型制备成功，青藏龙胆组的血清ALT明显低于模型组，表明青藏龙胆对小鼠肝有保护作用.

2.2 肝组织的光镜检查

模型组；肝小叶边界不清，肝小叶中心肝细胞气球样变，肝细胞体积增大，排列紊乱拥挤，除肝细胞变性和坏死外，汇管区可见轻度炎细胞浸润.

青藏龙胆组：镜下可见肝小叶结构完整，肝细胞围绕中央静脉呈放射状排列，肝细胞大小正常，无变性和坏死.

模型组

青藏龙胆组

讨论：（1）青藏龙但作为青藏高原特有的药物，藏医认为其味苦，性寒，有清湿热，泻肝火，镇咳，利喉，健胃等功效，主治感冒发烧，目赤咽痛，肺炎，咳嗽，胃炎，脑膜炎，气管炎等.民间一直将其作为抗肝炎的药物使用，但其对肝脏损伤方面的治疗还未见报道，为此我们选择了此药进行实验.

（2）肝脏是体内重要的生物代谢功能器官，CCl4在肝脏产生三氯甲基自由基，启动肝细胞膜肝微粒体膜脂质过氧化，使肝细胞受损.ALT主要分布于肝脏，肝脏正常时，血清中其含量较低，但肝炎，肝硬化，药理中导致肝细胞坏死时，肝细胞通透性增加，使得血浆ALT含量升高.因此，ALT被认为是肝受损的敏感指标，本实验我们观察了青藏龙胆对CCl4诱发的小鼠肝损伤的作用.预处理青藏龙胆组血清ALT水平明显减低（P＜0.01），结合病理切片检查结果显示，可以说明，青藏龙胆对CCl4所致小白鼠肝损伤具有保护作用，作用机理有待于进一步研究.

（3）根据实验结果知，加大对青藏龙胆的开发进度，积极探索其治病机理，争取其再抗肝炎方面的突破，将其开发成新药，将是藏药史上的一大创新.

〔1〕谭睿，石雪.藏药色吉美多对小鼠实验性肝损伤的保护作用.中草药，2005，36（4）：376—577.

〔2〕康东周，赵莲芳.全仙花大豆磷脂对小鼠酒精性肝损伤的保护作用.延边大学医学学报，2006，29（1）：42—44.

〔3〕汪德清,丁保国，马艳青，等.黄芪总黄酮对扑热息痛所致小鼠肝损伤防护作用的研究[J].中国中药杂志，2001，26（7）:483.

〔4〕彭小东，王波，王天才.四氯化碳皮下注射构建大鼠肝纤维化模型的研究[J].江西医学院学报，2005，45（2）:5.

〔5〕刘春宇,顾振纶,韩蓉,等.沙苑子提取物对小鼠四氯化碳肝损伤的保护作用 [J].中草药,2002,33(12):1104-1106.

R96

A

1673-260X（2011）03-0147-02