芍药内酯苷抗抑郁作用的实验研究

张建军，王景霞，李伟，欧丽娜，陈振振，葛阳

白芍为毛茛科植物芍药Paeonia lactiflora Pall.的根，味苦、酸，性微寒，归肝、脾经。酸性收敛，有补血敛阴，柔肝缓急之功，因而白芍既能养肝血，又能柔肝体，最能顺应肝之特性，为养血柔肝的代表[1]。《傅青主女科》在应用白芍的34证中，以白芍为君药者12证，其病机以肝失条达，气郁不舒为主。傅氏曾言: “病之在肝者，(白芍)尤不可不用。”肝性多郁，养血柔肝解郁，是白芍临床应用的一个重要特色[2]。

白芍的主要成分为一组单萜苷类物质，包括芍药苷（Paeoniflorin，PF）、芍药内酯苷(albiflorin，AF)等，已有研究表明芍药苷有多方面药理活性[3～4]，而白芍另一主要成分芍药内酯苷药理作用的报道尚不多见。据报道，白芍水煎剂、乙醇提取物、总单萜苷以及芍药苷有抗抑郁作用[5～9]。本文根据传统中医药理论对白芍的认识，以及白芍的中医临床应用经验和现代研究报道，对芍药内酯苷进行抗抑郁作用的研究，以期进一步揭示白芍抗抑郁的有效成分。

1 实验材料

1.1 实验药物

受试药：芍药内酯苷，自制，纯度大于96%；阳性药：盐酸氟西汀（Fluoxetine, Prozac百忧解），礼来苏州制药有限公司，批号：A333341-070608。

1.2 实验动物

ICR小鼠，雄性，体重18-22g。由维通利华动物实验中心提供，合格证编号：SCXK（京）2007-0001。动物购入后，适应一周，常规饲养。

1.3 仪器

JZ100型100g张力换能器(高碑店市新航机电设备有限公司)，Medlab生物信号采集系统（南京易美科技有限公司），Sony数码摄像机（上海索广电子有限公司），XZC-1型小鼠自主活动仪（黑龙江省牡丹江市中华电器厂），秒表，玻璃缸。

2 实验方法

2.1 分组和给药

取正常小鼠100只，按随机区组法分为5组，即空白组、百忧解组、芍药内酯苷14、7、3.5mg/kg剂量组。各组均按0.2ml/l0g体重灌胃，空白组给去离子水。以上各组连续7天给药，于末次给药1h后进行实验。

2.2 小鼠悬尾实验[10]

将小鼠尾端(距尾尖2cm处)用胶布固定在100g张力换能器的连线上，使其呈倒悬状态，头部离实验台约15cm，换能器连接到Medlab生物信号采集系统，适应2min后，记录4min内的不动时间(s)。

2.3 小鼠强迫游泳实验[10]

将小鼠单个放入高20cm、直径18cm、水深10cm、水温23±2℃的水缸中，观察6min，适应2min，记录后4min内累计不动时间(s)。

2.4 对小鼠自主活动的影响[10]

将小鼠放入小鼠光电计数仪活动箱，适应环境10min后，观察5min内小鼠的活动次数。每只小鼠测试完毕用湿布擦拭活动仪，清除粪便，继用干布擦净后再进行下一只小鼠的测试。

2.5 统计学处理

3 实验结果

3.1 芍药内酯苷对小鼠悬尾不动时间的影响

结果表明，给予芍药内酯苷14，7mg/kg能明显缩短小鼠悬尾不动时间，与空白组比较差异显著（P<0.01，0.05）。见表1。

表1 芍药内酯苷对小鼠悬尾不动时间的影响（）

表1 芍药内酯苷对小鼠悬尾不动时间的影响（）

注：与空白组比较， ** P<0.01，* P<0.05

组别 剂量(mg/kg) n 不动时间（s）空白组 —— 20 64.92±54.620盐酸氟西汀 3.5 20 30.15±44.888*芍药内酯苷 14 20 27.45±34.097**7 20 33.65±43.762*3.5 20 44.85±59.695

3.2 芍药内酯苷对小鼠强迫游泳不动时间的影响

结果显示，芍药内酯苷14，7mg/kg均能明显缩短小鼠游泳不动时间，与空白组比较差异显著（P<0.05），结果见表2。

表2 芍药内酯苷对小鼠强迫游泳不动时间的影响（）

表2 芍药内酯苷对小鼠强迫游泳不动时间的影响（）

注：与空白组比较， * P<0.05

组别 剂量(mg/kg) n 不动时间（s）空白组 —— 20 89.115±35.391盐酸氟西汀 3.5 20 56.725±31.340*芍药内酯苷 14 20 55.335±30.684*7 20 63.025±39.461*3.5 20 75.763±36.892

3.3 芍药内酯苷对小鼠自主活动的影响

结果显示，各剂量芍药内酯苷对小鼠的自主活动无明显影响( P > 0.01)，提示芍药内酯苷无中枢兴奋或抑制作用，结果见表3。

表3 芍药内酯苷对小鼠自主活动的影响（）

表3 芍药内酯苷对小鼠自主活动的影响（）

组别 剂量(mg/kg) n 活动次数空白组 —— 20 125.00±32.78盐酸氟西汀 3.5 20 101.87±33.47芍药内酯苷 14 20 101.27±43.43 7 20 102.20±34.48 3.5 20 107.13±20.55

4 讨论

肝郁，中医认为可引起情志疾病，与现代医学的慢性心理应激（应激）一致，而应激可导致抑郁症。应激损伤的病位主要在肝[11]。“肝体阴而用阳”，性刚而喜柔，肝之体以阴为养，以柔为生，藏血充足是疏泄正常的前提，因此，养血柔肝解郁至关重要。治肝大家王旭高体会“肝气胀甚，疏之更甚者，当柔肝”。张山雷指出：“肝阴耗损之证，专事疏肝不独无效，反增其燥伤阴血，柔可驭之。”叶天士云：“肝为刚脏，当济之以柔药”。解郁多用疏肝理气法，但如果患者素秉阴虚之质，或郁久化热伤阴者，即不可再用疏理，以疏理之药多香燥，往往出现愈疏愈郁，而柔肝解郁法即为有效良法，白芍即为中医应用该法的首选药物。

本实验采用小鼠抑郁动物模型对芍药内酯苷进行研究，探讨其抗抑郁作用。小鼠悬尾试验和小鼠强迫游泳试验为经典的抗抑郁小鼠实验，具有简单、敏感和可靠性较强的特点[12]，因此本研究首先采用这两个模型结合小鼠自主活动实验进行初步研究，结果表明芍药内酯苷具有抗抑郁作用。

已有研究报道和本研究结果提示，白芍抗抑郁的主要有效成分可能是芍药苷和芍药内酯苷，两者是通过单独的机制来发挥抗抑郁作用，还是具有协同作用，或是两者兼具，还有待于进一步研究。本研究为深入研究白芍抗抑郁的有效成分和作用机制奠定了基础。

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