三种不同方法在分析尿液红细胞的比较应用

康贵民

（泉州市皮肤病防治院检验科，福建 泉州 362000）

三种不同方法在分析尿液红细胞的比较应用

康贵民

（泉州市皮肤病防治院检验科，福建 泉州 362000）

目的探讨不同方法检测尿液中红细胞的准确性。方法留取1000份门诊患者的随机尿进行分析，应用干化学法和尿沉渣分析仪结合显微镜检查。结果显微镜检查阳性率为30.8%，阴性率为69.2%；尿沉渣分析仪检测RBC的阳性率为34.4%，阴性率为65.6%，假阳性率为8.13%，两种方法的阳性符合率为94.8%，阴性相符率为92.5%。干化学法检查阳性率为32.4%，阴性率为67.6%，假阳性率为3.47%，两种方法的阳性符合率为97.4%，阴性相符率为96.5%。结论尿流式沉渣分析仪与干化学方法对检测RBC的敏感度和特异度均较高，但在工作中如果出现尿沉渣分析仪与尿干化学分析仪检测结果不相符时，作为实验人员，应该能找出问题存在的原因，并经过显微镜检查分析判断出假阴性和假阳性。

尿沉渣分析；尿液干化学法；镜检法；红细胞；尿液检测

目前应用于临床尿液分析的尿干化学法、尿流式沉渣分析法及尿显微镜镜检法均有利弊：尿干化学分析法尽管快速、简便，但由于其方法学上的局限，假阳性及假阴性率均较高。尿沉渣分析仪具有快速、高效、重复性好等特点，能较为准确提供有形成分的定量数据，并可提供尿红细胞的形态特征，鉴别血尿的来源，但由于尿液中有形成分的大小、内容物等并非始终均匀一致，各种病理情况、渗透压改变等均可导致有形成分产生变化，从而导致各信号参数产生变化或重叠，因此尿流式沉渣分析仪在临床可作为技术一致可比性强的筛选方法加以应用。尿沉渣镜检是尿有形成分检查的主要确诊方法，但操作技术要求高、费时,受工作人员主观差异影响较大,重复性差，可用作尿有形成分确证及形态学描述。为此，我们通过以上三种方法，检测尿液中的红细胞，现报道如下。

1 材料与方法

1.1 标本采集 收集2011年5～9月份门诊就诊的患者留取的随机尿1000份，用一次性塑料试管准确收集10ml新鲜尿液。

1.2 仪器与试剂 URIT-500B尿干化学分析仪及配套试纸条，UF-500全自动尿沉渣分析仪及配套试剂，日本奥林巴斯光学显微镜。

1.3 方法 每日上机前均用质控品进行监控，UF-500尿流式沉渣分析，干化学分析仪，均严格按照说明书操作。

尿沉渣显微镜镜检，离心尿沉渣涂片试验：取新鲜尿液10ml于刻度离心管中，采用水平式离心机，有效离心速率1500转/分钟，相对离心力400，离心5min，弃去上清液留沉淀0.2ml。为与尿液分析仪取得一致条件，尿镜检亦采用混匀尿，轻摇离心管，使尿沉渣有形成分充分混匀，吸取20μl滴于玻片，涂成约18mm×18mm面积镜检，先低倍（10×10）、后高倍（10×40）观察，详细记录。

1.4 判断标准 UF-500结果部分参考值范围参照丛玉隆等[1]研究设置，红细胞：男0～12个／L、女0～24个／L；白细胞：男0～12个／L、女0～26个／L。显微镜法：红细胞：0～3个／HP为阴性，白细胞：0～5个／HP为阴性。超出以上范围视为阳性。

1.5 统计学处理 采用配对χ2检验。

2 结果

2.1 显微镜检查与UF-500尿液流式沉渣分析法的对比 显微镜检查阳性率为30.8%，阴性率为69.2%；UF-500尿液流式沉渣分析仪检测红细胞的阳性率为34.4%，阴性率为65.6%，假阳性率为8.13%，两种方法的阳性符合率为94.8%，阴性相符率为92.5%。资料用配对χ2检验进行分析显示，UF-500与显微镜检测红细胞结果的差异有统计学意义（阳性率对比，χ2=3.06，P＜0.05；阴性率对比，χ2=3.11，P＜0.05）。

2.2 显微镜检查与干化学法的对比 显微镜检测红细胞的阳性率为30.8%，阴性率为69.2%；干化学法检查阳性率为32.4%，阴性率为67.6%，假阳性率为3.47%。两种方法的阳性符合率为97.4%，阴性相符率为96.5%。资料用配对χ2检验进行分析显示，干化学检测与显微镜检测红细胞结果的差异有统计学意义（阳性率对比，χ2=2.37，P＜0.05；阴性率对比，χ2=2.18，P＜0.05）。

3 讨论

仪器法检测尿红细胞的假阳性率高于干化学法和显微镜法，而干化学法的阴性相符率高，可以作为大批量尿液检查的过筛实验，缩短检测时间，减少标本放置时间过长引起的污染、计数误差等问题。

UF-500尿流式沉渣分析仪采用流式细胞及电阻抗原理，通过检测经荧光染色后的尿沉渣中单个细胞的荧光强度和荧光波幅度、激光散射强度和散射波幅度及电阻抗的大小来识别尿中细胞、管型、结晶等各种有形成分。

UF-500尿流式沉渣分析仪具有快速、高效、重复性好等特点，能较为准确提供有形成分的定量数据；但是，尿液中有形成分十分复杂，尤其是在各种病理情况下，会有许多影响因素造成技术结果的误差。检验人员应该了解哪些因素会造成红细胞计数的误差：

UF-500尿液分析仪检测结果阳性而干化法阴性时，应考虑如下原因：1）尿中含有大量草酸钙、非晶型盐、细菌、真菌等，这些物质的荧光参数与红细胞有重叠，对荧光染料几乎不着色且大小形态不均，所以其荧光强度很低，其中以结晶的干扰最为常见。草酸钙结晶是尿中常见结晶之一，它不溶于乙酸。UF-500尿流式沉渣分析仪通过在稀释液中加入螯合剂经35℃加温处理，消除结晶，而草酸钙不能被除去，由于草酸钙与红细胞大小相似，荧光强度低，所以UF-500尿流式沉渣分析仪不能将草酸钙结晶与红细胞区分[2]。2）细菌为RNA或DNA构成，但UF-500尿流式沉渣分析仪的染料菲啶对膜渗透性低，所以染色后其荧光强度低，前向散射光强度也低（但比红细胞稍强），所以当尿中细菌超过一定量聚焦时，易将细菌误认为红细胞[3]。3）某些药物如卡托普利、罗丁缓解片及大量维生素C及其他具有较强还原性的物质存在于尿中。4）尿中出现RBC为小红细胞时，形态完整不易破碎。

UF-500尿液分析仪检测结果阴性而干化法阳性时，可能的原因：1）尿中红细胞形态被破坏，释放出血红蛋白。2）肌红蛋白尿。因为试纸条对肌红蛋白和血红蛋白有同样的灵敏度，可以催化分解过氧化物，使四甲基联苯胺氧化呈色。3）尿液中含有强氧化剂、对热不稳定酶和大量细菌。

UF-500尿液分析仪和尿干化学分析仪检查红细胞各有其优缺点，干化学法虽然操作简便、省时省力，但经常会出现假阴性和假阳性。UF-500尿液分析仪虽然可以实现标准化操作且精确度较高，但对个别项目如结晶、红细胞、真菌等的识别仍容易混淆。若两种方法联合使用就可以优势互补，降低漏检率。在工作中如果出现UF-500尿液分析仪与尿干化学分析仪检测结果不相符时，作为实验人员，应该具体情况具体分析，找出问题存在的原因，并以显微镜检查为标准进行具体情况的分析，才能确保检验质量。

[1]丛玉隆，马骏龙，李云莲.尿沉渣测定四种方法参考值范围调查[J].中华医学检验杂志，1997，20（4）：229-230.

[2]陈桂桂.全自动尿沉渣分析仪与尿沉渣显微镜检查的联合应用[J].医药论坛杂志，2007，28（5）：98.

[3]李一龙.UF-100尿沉渣仪红细胞测定质量探讨及对策[J].检验医学与临床，2009，47（31）：89.

R446.12;R446.11+3

A

1008-4118（2011）04-0026-02

10.3969/j.issn.1008-4118.2011.04.10

2011-10-05