蛲虫卵玻片标本不同制作方法比较

2011-08-15 00:51刘瑛
卫生职业教育 2011年3期
关键词:玻片透明胶虫卵

刘瑛

(大连大学职业技术学院,辽宁大连116001)

蛲虫卵玻片标本不同制作方法比较

刘瑛

(大连大学职业技术学院,辽宁大连116001)

蛲虫卵;玻片标本;制作方法

蛲虫是人体常见的寄生在肠道的小型线虫,虫体呈乳白色,短线头状。其导致儿童常见的肠道寄生虫病。蛲虫成虫寄生于人体的回盲部,雌虫受精后移行于直肠,宿主睡眠后雌虫移行至肛门周围,受温、湿度变化及空气的刺激产卵。因此,蛲虫多经肛门—手—口的方式导致体外感染,也可经被污染的食物、玩具或吸入被污染的空气而导致交叉感染。蛲虫卵标本的制作,多采用从雌虫子宫内取出虫卵或宿主睡眠后在其肛周收集虫卵。在实验教学中,将收集到的蛲虫卵采用3种不同方法制作成玻片标本,观察卵的外形、大小和完好率并应用于课堂教学。

1 材料与方法

1.1 蛲虫卵玻片标本制作方法

(1)透明胶纸法[1]。在宿主熟睡后,将透明胶带粘在宿主肛门周围,之后将粘有蛲虫卵的胶带平整地附在玻片上镜检。该法简便易行,效果好。(2)单盖片法[2]。在透明胶纸法的基础上,取下附着蛲虫卵的透明胶纸条,用剪刀剪去两头,留取含有蛲虫卵的中间部分,长约1.5~2.0cm,贴于玻片上,滴中性树胶2~3滴,覆以盖玻片1张(2.4cm×2.4cm),平放,温箱内烘干。(3)双盖片法。用棉签拭子法收集虫卵[3],将收集的蛲虫卵放入5%福尔马林固定的多种蠕虫卵中,即为混合虫卵。用孔径0.15mm毛细吸管吸取混合虫卵一滴,置于载玻片中央,然后,用细玻棒挑取甘油明胶1滴,置于载玻片中央,立即覆以盖玻片1张(1.8cm×1.8cm),待凝固后,滴加中性树胶2~3滴,然后,再覆以盖玻片1张(2.4cm×2.4cm),封固后,平放,温箱内烘干。

1.2 蛲虫卵观察方法

将3种不同方法制作的玻片标本分别置于低、高倍镜下,观察蛲虫卵的外形、大小以及虫卵内容物外渗情况。

2 结果

2.1 3种方法制作的蛲虫卵外形、大小及完好率

蛲虫卵的外形,一般教科书多描述为椭圆形,两侧不对称,一侧较扁平,一侧稍凸出[2],从不同方向投视同一蛲虫卵时,虫卵外形轮廓不同,侧面视呈不对称长椭圆形,两极不等大,背面或腹面视呈对称长椭圆形。我们在光镜下观察了3种方法制作的蛲虫卵标本外形。透明胶纸法制作的虫卵标本呈不对称的长椭圆形,两极不等大占96.21%(938/975),呈对称长椭圆形占3.79%(37/975);单盖片法制作的虫卵标本呈不对称形占92.15%(963/1 045),对称形占7.85%(82/1 045);双盖片法制作的虫卵标本全部呈对称形。观察发现,采用不同方法制作的蛲虫卵标本镜下观察时,其外形有差异。

将3种方法制作的蛲虫卵标本分别在高倍镜下随机测量60个,计算虫卵平均大小。透明胶纸法制作的虫卵标本平均大小为(51.94±1.71)μm×(25.13±0.30)μm;单盖片法制作的虫卵标本平均大小为(54.30±0.36)μm×(25.64±0.16)μm;双盖片法制作的虫卵标本平均大小为(55.31±0.36)μm×(24.69±0.27)μm。结果提示,不同方法制作的蛲虫卵标本镜下观察时,其大小无显著性差异。

在高倍镜下观察蛲虫卵的完好率。透明胶纸法收集制作的虫卵标本500枚,单盖片法收集制作的虫卵标本800枚,无一枚外渗、破裂。双盖片法收集制作的虫卵标本200枚中虫卵内容物外渗57枚,占观察总数的3.80%。但未见虫卵卵壳破裂,提示蛲虫卵卵壳较厚。

2.2 制作方法比较

经过观察与比较,发现3种方法中,以透明胶纸法最为简便易行,但取材后的胶纸贴回原玻片时,易出现空隙,镜下观察有空隙处的虫卵呈现暗色折光,同时,蛲虫卵的水分也有可能挥发,不易长时间保存。单盖片法是在透明胶纸法的基础上用中性树胶封制而成,可弥补透明胶纸法的不足,操作过程也比较简便,易长时间保存。双盖片法则是将蛲虫卵保存在液体中,制作过程较前2种复杂,虫卵外形均呈对称长椭圆形,虫卵内容物外渗现象随时间延长增多。用上述3种方法制作的蛲虫卵玻片标本,用于课堂教学10余年,效果较好,其中尤以单盖片法具有制作简便、效果理想、可长期保存的优点。

[1]徐元章.寄生虫学及检验技术[M].第3版.济南:山东科学技术出版社,2000.

[2]陈佩惠.人体寄生虫学实验技术[M].北京:科学出版社,1988.

G424.31

B

1671-1246(2011)03-0148-01

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