金锁固精丸质量标准研究

王宪忠

金锁固精丸收载于《中华人民共和国卫生部药品标准中药成方制剂第一册》［1］。该部颁标准中只介绍了金锁固精丸的处方、制法、性状和主治功能。本实验方法根据2010版《中华人民共和国药典》(一部)中沙苑子苷的含量测定标准［2］，在金锁固精丸部颁标准的基础上增加了沙苑子苷的含量测定，经过系统实用性实验，表明该方法专属性强，可以有效地控制和提高金锁固精丸制剂的质量标准。

1 仪器与试药

1.1 仪器 SB3200型超声仪(上海必能信仪器厂);2010AHT全自动高效液相色谱仪(岛津);紫外检测器，Classvp工作站。

1.2 试药 沙苑子苷对照品(中国药品生物制品检定所，批号10752-201021);金锁固精丸由湖北襄樊苗泰医药有限公司提供(批号：20100601、20100605、20100703);乙腈为 HPLC级;乙醇为AR级;水为重蒸馏水。

2 系统实用性实验

2.1 色谱条件 色谱柱为Dirmonsil C18(4.6 mm×250 mm，5 μm);流动相为乙腈-0.1%磷酸溶液(11∶89);进样量为10 μL;流速为1.0 ml/min;检测波长为266 nm。

2.2 对照品溶液的制备 精密称取沙苑子苷对照品15.01 mg，置100 ml容量瓶中，加60%乙醇至刻度，摇匀，精密量取1 ml，置10 ml容量瓶中，加60%乙醇稀释至刻度，摇匀，备用。

2.3 供试品溶液的制备 取本品研细，混匀，精密称定3 g，置具塞锥形瓶中，精密加入60%乙醇25 ml，称定重量，超声处理30 min，放冷，再称定重量，用60%乙醇补足减失的重量，摇匀，滤过，取续滤液，即得。

2.4 空白对照溶液的制备 以相同的处方比例，制得不含沙苑子苷的空白样品，按供试品溶液的制备方法制成空白对照溶液。

2.5 空白干扰试验 分别精密吸取沙苑子苷对照品溶液、供试品溶液及空白对照溶液各10 μl，注入高效液相色谱仪，结果表明空白对照溶液无干扰，见图1。

图1 (a)对照品色谱图，(b)供试品色谱图，(c)空白对照色谱图

2.6 线性关系 取浓度为150 μg/ml的沙苑子苷对照品溶液，吸取 0.5、1、2、3、5 和 10 ml，分别置于 10 ml容量瓶中，加60%乙醇稀释至刻度，摇匀，以浓度为横坐标，峰面积为纵坐标作图，得回归方程为Y=7354+32714X(r=0.9967)。结果表明，沙苑子苷在7.5～150 μg/ml范围内具有良好的线性关系。

2.7 稳定性试验 精密量取样品3 g，按“供试品溶液的制备”项下方法同法制备，按上述色谱条件每隔3 h进行测定，共计进样5次，测定其稳定性。结果：峰面积(A)的RSD为0.6%，表明样品溶液在12 h内稳定。

2.8 精密度试验 精密吸取对照品溶液，连续进样5次，测定其峰面积，其 RSD为0.31%(n=5)，结果表明精密度良好。

2.9 重复性试验 取同一批号的样品(批号：20100601)5份，每份约3 g，精密称定，按“供试品溶液的制备”项下方法同法制备，按上述色谱条件测定，每份连续进样2次。RSD为0.5%，结果表明重复性良好。

2.10 加样回收率试验 精密称定已知含量的样品(批号：20100601)5份，每份约3 g，分别精密加入浓度为15 μg/ml的沙苑子苷对照品溶液1 ml，按样品方法制备及测定，计算回收率，平均回收率为99.2%，RSD为0.3%(n=5)。结果表明，本法具有良好的加样回收率。

2.11 样品含量测定 按上述色谱条件对3个批号样品中沙苑子苷的含量进行测定，结果批号为20100601、20100605、20100703的沙苑子苷含量分别为0.297 mg/g，0.298 mg/g，0.294 mg/g，RSD 分别为0.87%，0.75%，0.96%。

3 讨论

3.1 流动相的选择 我们考察了几种流动相，有甲醇-水，乙腈-水等，结果还是乙腈-0.1%磷酸溶液体系分离效果好。故采乙腈-0.1%磷酸溶液体系。

3.2 溶剂的选择 我们分别采用了70%、50%、30%的甲醇和70%、50%、30%的乙醇作为提取溶剂进行比较。结果是在我们所采用的色谱条件下，60%的乙醇作为提取溶剂提取相同的样品所得的沙苑子苷含量较高且峰形较好。故我们采用60%乙醇作为提取溶剂。

本文利用高效液相色谱法建立了金锁固精丸中沙苑子苷含量的测定方法，该方法简便快捷，准确、重现性好，可用于金锁固金丸的含量测定。