HPLC 法测定头孢地尼分散片中头孢地尼的含量

俞 平（江苏溧水县人民医院药库，溧水县 211200）

头孢地尼（Cefdinir）是优秀的第3代口服头孢菌素品种之一，对β-内酰胺酶高度稳定，抗菌谱广、抗菌活性高、毒性低、副作用小[1，2]。国内对于头孢地尼原料、胶囊的含量测定有紫外分光光度法和高效液相色谱（HPLC）法[3]，但未见对头孢地尼分散片中主药含量测定方法的报道和研究。笔者以头孢地尼为指标成分，建立了头孢地尼分散片中头孢地尼的HPLC测定方法，旨在为该制剂的质量控制提供参考。

1 仪器与试药

Agilent 1200型HPLC仪（美国安捷伦公司）；AUW-220D电子天平；5210DT超声处理器（250 W，33 kHz）；pH计（MettlerToledo，Seven Multi）。

头孢地尼对照品（中国药品生物制品检定所，批号：130502-201001）；头孢地尼分散片（天津中央药业有限公司，批号：100728、100802、100806）；乙腈、甲醇为色谱纯（美国天地公司），水为重蒸水，其余试剂为分析纯。

2 方法与结果

2.1 色谱条件

色谱柱：Phenomexex Luna-C18（250 mm×4.6 mm，5μm）；流动相：0.25%四甲基氢氧化铵溶液（用磷酸调节pH至5.5）-乙腈-甲醇（900∶60∶40）（每1 000 mL加入0.1 mol·L－1乙二胺四醋酸二钠溶液0.4 mL）；流速：1.0 mL·min－1；检测波长：254 nm；进样量：20 μL；柱温：40℃。头孢地尼与相邻杂质峰的分离度应≥1.2，头孢地尼峰的拖尾因子应≤1.5，理论板数按头孢地尼峰计算应≥2 000。

2.2 溶液的制备

2.2.1 对照品贮备液的制备 精密称取头孢地尼对照品40 mg，置于100 mL容量瓶中，加磷酸盐缓冲液（pH 7.0）溶解后用流动相稀释至刻度，摇匀，即得。

2.2.2 对照品溶液的制备 精密吸取对照品贮备液5 mL，置于10 mL容量瓶中，加磷酸盐缓冲液（pH 7.0）溶解后用流动相稀释至刻度，摇匀，即得。

2.2.3 供试品溶液的制备 取头孢地尼分散片2片，置于研钵中研细，精密称取适量（约含头孢地尼20 mg），置于100 mL容量瓶中，加磷酸盐缓冲液（pH 7.0）溶解后用流动相稀释至刻度，0.45 μm的微孔滤膜滤过，即得。

2.2.4 空白溶液的制备 取处方量辅料，精密称定，置于100 mL容量瓶中，加磷酸盐缓冲液（pH 7.0）溶解后用流动相稀释至刻度，0.45 μm的微孔滤膜滤过，即得。

2.3 方法专属性

取空白溶液20 μL，注入HPLC仪，记录色谱。另取头孢地尼对照品溶液20 μL，注入HPLC仪，记录色谱。结果，空白溶液在与头孢地尼对照品溶液主峰相同的保留时间处无色谱峰出现，表明辅料对样品的测定无干扰。色谱见图1。

2.4 线性关系考察

精密吸取头孢地尼对照品贮备液适量，定量稀释成40、80、120、160、200、240 μg·mL－1的溶液，分别进样20 μL。以头孢地尼检测浓度（C）为横坐标，峰面积积分值（A）为纵坐标，得回归方程：A＝27 221.4C+30 496.4（r＝0.999 9）。表明头孢地尼检测浓度在40～240 μg·mL－1范围内与峰面积积分值呈良好的线性关系。

图1 高效液相色谱图Fig 1 HPLC chromatograms

2.5 精密度试验

精密吸取浓度为200 μg·mL－1的头孢地尼对照品溶液，连续进样5次。结果，峰面积的RSD＝0.10%，说明精密度良好，符合要求。

2.6 稳定性试验

精密吸取同一供试品溶液，分别在0、1、2、4、6、8、12 h进样，记录色谱图。结果，RSD＝0.42%（n＝7），说明供试品溶液在12 h内比较稳定。

2.7 加样回收率试验

按照处方比例，取高（120%）、中（100%）、低（80%）不同量的头孢地尼对照品，分别加入处方量的辅料，过120目筛混合均匀。精密称取该粉末适量（约相当于头孢地尼16、20、24 mg，按“2.2.3”项下方法制备处理后（每个浓度3份样品），进样20 μL，记录色谱图。另取对照品溶液，同法测定，按外标法计算3种含量样品中头孢地尼的回收率，平均加样回收率分别为：99.76%、100.11%、99.92%，RSD＝0.26%（n＝9），详见表1。

2.8 重复性试验

取同一供试品溶液，连续进样6次，记录色谱图；另取对照品溶液，同法测定。按外标法计算样品的含量，测得的含量平均值为：99.89%，RSD＝0.56%，表明本方法的重复性良好。

2.9 样品含量测定

3批样品按“2.2.3”项下方法制备处理后，测定含量。结果，含量分别为99.90%、99.81%、100.03%。

表1 加样回收率试验结果（n＝9）Tab 1Results of recovery tests（n＝9）

3 讨论

头孢地尼在水、乙醇、乙醚中均不溶解，只在pH 7.0的磷酸盐缓冲液中微溶，故选择pH 7.0的磷酸盐缓冲液作为溶剂。笔者在试验过程中对流动相进行了筛选，采用了不同的流动相[4，5]，试验结果表明，以0.25%四甲基氢氧化铵溶液（用磷酸调节pH至5.5）-乙腈-甲醇（900∶60∶40），每1 000 mL加入0.1 mol·L－1乙二胺四醋酸二钠溶液0.4 mL为流动相，效果最佳。

综上所述，本方法操作简便，具有较强的专属性，且回收率好，可以为头孢地尼分散片的含量测定提供有效的质量控制依据。

[1] 周永健，边 颖，蔡 毅.第3代口服头孢菌素-头孢地尼[J].天津药学，2003，15（2）：66.

[2] 林 燕.头孢地尼的国内外临床应用进展[J].中国药房，2010，21（4）：382.

[3] 张新萍，赵利萍，雷光明.头孢地尼分散片的人体生物等效性研究[J].中国药房，2007，18（32）：2 514.

[4] 钱 妍，赵春景，喻娅婷.HPLC测定头孢地尼胶囊的含量[J].华西药学杂志，2005，20（3）：253.

[5] 王杏林.HPLC测定头孢地尼的含量及有关物质[J].中国新药杂志，2003，12（2）：114.