硝苯地平双层渗透泵片的制备及家兔体内药动学研究*

B.Enkht ogt okh，吴正红，陈 钦，黄 欣

中国药科大学药剂学教研室，南京 210009

硝苯地平是钙离子拮抗剂中具有代表性的药物，是目前临床上治疗高血压和心绞痛的首选药物之一。 其半衰期短（2～3 h），服药后 30～45 min 即达到血药峰值，血压波动大，同时短而强的扩血管作用可能增加冠心病的发病率[1]。将硝苯地平制成一日一次的渗透泵控释制剂，可避免药物释放受胃肠道蠕动、pH值和食物等因素的影响；良好的零级释药特性可保持更平稳的血药浓度，降低心血管副作用的发生[2]。

硝苯地平属于难溶性药物，本研究采用对包含药物层和助推层的双层片芯进行包衣的方法，考察了药物层、助推层和包衣液处方，确立了较佳的处方和工艺，并对家兔进行了体内药动学的研究。

1 仪器与材料

TDP单冲压片机 （上海第一制药机械厂）；ZRCA6-B药物溶出度测定仪 （上海黄海药检仪器厂）；BS110S电子天平 (北京赛多利斯天平有限公司)；LC-10AT VP高效液相色谱仪（日本岛津公司）；BY-300A小型包衣机（上海黄海药检仪器厂）；片剂硬度测定仪（上海黄海药检仪器厂）；RC-YW-30控释药物实验室激光打孔机（南京瑞弛电子技术工程实业有限公司）。

硝苯地平原料药（纯度为99.9%，青岛黄海药业提供）；Adalat○RGITS硝苯地平控释片 (德国拜耳公司)；羟丙基甲基纤维素 （HPMC E5）、聚氧乙烯（POLYOX WSR N-80 and N-12K）均为上海卡乐康公司产品；聚乙二醇（PEG 400，上海化学试剂采购供应站）；邻苯二甲酸二乙酯（DEP，上海金山经纬化工有限公司）；醋酸纤维素（美国EASTMAN化工公司）；硝苯地平普通片（自制）；乙腈（色谱纯，山东禹王实业有限公司）；其他试剂（分析纯，市售）。

家兔，雌雄各半，体重2.5～3 kg，由南京青龙山实验动物中心提供，合格证号:SCXK(苏)2007-0008。

2 方法与结果

2.1 硝苯地平渗透泵片的制备

2.1.1 片芯的制备 含药层:按处方量，将过80目筛的硝苯地平、氯化钠、POLYOX WSR N-80、HPMC E5混合均匀，加入适量95%乙醇溶液制软材，过24目筛制粒，于50℃下干燥6 h，过20目筛整粒，加入适量的硬脂酸镁，混匀，备用。

助推层:将过80目筛的POLYOXWSRN-12K、HPMCE5、氯化钠、氧化铁按处方量混合均匀后，加入适量的98%乙醇溶液制软材，24目筛制粒，50℃下干燥6h，20目筛整粒，加入硬脂酸镁，混匀，备用。

采用单冲压片机、8 mm浅凹冲、两次填料两次加压的方法压制双层片芯，片芯硬度为5 kg·cm-2。

2.1.2 包衣 将处方量的醋酸纤维素、PEG 400、DEP溶于丙酮，即得包衣溶液。将片芯置包衣锅内，包衣锅转速30 r·min-1,锅内温度30℃，控制包衣增重在10%。包衣后在40℃下干燥12 h。干燥完毕的包衣片用激光打孔机在药物层一侧激光打孔即得硝苯地平渗透泵片,每片含硝苯地平30 mg。

2.2 体外释放度的测定

根据 《中华人民共和国药典》2010版缓控释制剂释放度测定方法对硝苯地平渗透泵片的释放度进行测定[3]。释放介质为1%十二烷基硫酸钠溶液900mL，介质温度（37±0.5）℃，转速为 100 r·min-1。分别于2、4、6、8、12、16、24 h吸取溶出液 5 mL,以 0.45 μm滤膜过滤，取滤液20μL进行HPLC测定。

根据美国FDA推荐的相似因子法对释放度曲线的相似度进行判断[4]。相似因子（f2）用以下方程表示:

其中Rt和Tt分别表示参比制剂和受试制剂在时间t的释放度，n为时间点的个数。受试制剂和参比制剂的溶出必须在同样的条件下进行；当f2大于等于50时，认为两条释放度曲线相似，反之，则认为不相似。

2.3 影响因素考察

2.3.1 基本处方的确定 根据前期试验的结果，确立了基本处方，如表1和表2所示。在基本处方的基础上考察各因素对药物释放的影响。

表1 硝苯地平渗透泵片片芯的基本处方

表2 硝苯地平渗透泵片包衣液基本处方

2.3.2 药物层PEO用量对药物释放的影响 基本处方采用 PEO （POLYOX WSR N-80，Mw=200000）和HPMC E5作为药物层的稀释剂，具有较长时间的水合能力，同时稀释剂水化后可形成粘稠的药物液体，减少药物释放的阻力。在基本处方的基础上，保证稀释剂的总量不变，改变PEO在稀释剂中的质量比。药物层PEO用量分别为45%、60%、75%，同时将3个处方的片剂进行溶出度考察，3个处方的f2值分别是 37.62、53.11、58.31。由图 1 可知，当 PEO质量比只有45%时，硝苯地平24 h的累积释放量为75.2%，而其他两个处方的累积释放量接近100%。

图1 药物层中PEO含量对药物释放的影响

2.3.3 助推层PEO用量对药物释放的影响 在基本处方的基础上，保证助推层中PEO（POLYOX WSR N-12K，Mw=1000000）和HPMC E5组成的稀释剂总量不变，改变稀释剂中PEO的质量比。PEO用量分别为90%、75%、60%、30%。将4个处方的片剂进行溶出度考察，4个处方的f2值分别是 41.96、56.11、53.23、48.22。由图2可知，其中PEO含量为90%时，药物的累积释放量为70.2%，表明该处方24 h药物释放不完全。而当PEO含量为75%和60%时，24h累积释药量接近100%，药物释放完全。当PEO含量为30%时，药物释放慢。由本实验可见，药物层和助推层的水化速度的平衡，决定了24h的药物累积释放量。

图2 助推层中PEO含量对药物释放的影响

2.3.4 包衣膜中PEG 400用量对药物释放的影响固定包衣增重为片芯的10%，固定DEP的用量为醋酸纤维素质量的0%。采用PEG 400作为膜致孔剂，由于其具有水溶性，所以同时作为致孔剂。改变膜包衣液中PEG 400的用量，分别为醋酸纤维素质量的10%、8%、6%。对该3个处方进行溶出度测定，各自的 f2值分别为 30.19、33.85、41.82。 由图 3 可见，随着PEG 400用量的增加，能显著增加药物释放的速度。

图3 PEG 400用量对药物释放的影响

2.3.5 包衣液中DEP用量对药物释放的影响 固定包衣增重为片芯的10%，固定PEG 400的用量为醋酸纤维素质量的10%。DEP用量分别为醋酸纤维素质量的0%、5%、10%，作为膜增塑剂。对该3个处方进行溶出度测定，各自的f2值分别为30.38、46.98、62.02。由图4可知，随着DEP用量的增加，药物释放速度显著下降。24 h释药过程中不会发生衣膜破裂。

图4 DEP用量对药物释放的影响

2.3.6 溶出介质对药物释放的影响 将优化后的处方，分别在pH1.2的盐酸、pH2.4和pH5.8的磷酸缓冲液、1%十二烷基硫酸钠、饱和氯化钠这5种介质中进行溶出度考察，介质体积为900 mL，温度为 （35±0.5）℃，转速为 100r·min-1。结果见图5。其中介质为饱和氯化钠溶液，24h内药物基本没有溶出，表明渗透压差是药物释放的驱动力。其他介质中的f2值分别是52.53、55.46、59.24、57.32，表明介质的 pH 对药物释放没有明显的影响。

2.4 家兔体内药动学研究

图5 释放介质不同对药物释放的影响

2.4.1 实验条件及参数的计算 以6只家兔（雌雄各半）为动物模型，单剂量自身交叉口服自制渗透泵片和自制的普通片，经过两周清洗期，再服用另一制剂。实验中，采用C18色谱柱，以甲醇-水（体积比6︰4）为流动相，灵敏度0.005AUFS，柱温35℃、流速1 mL·min-1的条件下，对家兔血浆中的硝苯地平含量进行测定。

2.4.2 体内试验结果 家兔分别口服两种硝苯地平制剂后血药浓度-时间曲线见图6。采用DAS药动学软件处理，口服硝苯地平片的血药浓度经时过程符合二室模型一级吸收。普通片的药动学参数AUC(0-∞)、Tmax、Cmax分别是 （3.355±0.441） mg·h·L-1、（5.98±0.47）h、（0.452 ±0.038）mg·L-1； 渗透泵控释片的药动学参数 AUC(0-∞)、Tmax、Cmax分别是 （4.010±0.353）mg·h·L-1、（12.05±0.28） h、（0.299±0.035） mg·L-1；根据普通片的剂量为35 mg,控释片的剂量为30 mg，计算得相对生物利用度为119.5%±7.2%。

图6 普通片和控释片的家兔单剂量口服给药后的经时血药浓度曲线

2.4.3 体内外相关性 当体内外相关性良好时，体外释放度测定可以在一定程度上反映药物制剂在体内的吸收情况。笔者以体内累积吸收百分数对体外累积释放度作图，考察硝苯地平渗透泵控释片的体内外相关性，结果r=0.9960，可知本实验制备的硝苯地平渗透泵控释片的体内外相关性良好。

3 讨 论

3.1 体外行为的影响因素

由于硝苯地平难溶于水 （水中溶解度小于10μg·mL-1），制备单室渗透泵制剂时，很可能出现药物后期释放缓慢的情况，所以选择制备双层渗透泵片，采用助推层来促进后期的释药，实现24 h零级给药。双层渗透泵控释片的片芯需要经过一段时间的水化，才能开始释药，这段时间称为“时滞”[5]。本实验结果表明:药物层和助推层中PEO用量对药物释放有显著的影响，PEO的比例越高，片芯的水化速度越快；当药物层和助推层的水化速度平衡时，能提高药物24h累积释放量。

包衣膜的透水性和膜强度显著影响药物的释放[6]。本实验考察了水不溶性增塑剂对药物释放的影响，采用水溶性增塑剂PEG 400和亲脂性增塑剂DEP联用，控制了醋酸纤维素膜的透水能力。

3.2 体内试验结果

因家兔是食草动物，在进行口服胃肠道给药的生物利用度实验时，药物在其胃肠道的吸收和代谢行为可能与人体有一些差异。双层渗透泵制剂可实现难溶性药物在24 h内的零级释药，相对于普通制剂有很多优点:药物释放受体内胃肠道环境的影响小；维持较平稳的血药浓度；减少毒性和不良反应；减少服药次数。在本文的研究中，渗透泵控释片的Cmax明显较普通片小，同时血药浓度维持时间延长。

[1]顾复生.硝苯地平控释片的临床应用进展[J].中华心血管病杂志，1994，22(5):327-8.

[2]陈志鹏，朱家壁.口服渗透泵制剂的研究进展[J].国外医学·药学分册，2005，32(2):87-91.

[3]国家药典委员会.中华人民共和国药典:二部 [M].北京:国家医药出版社，2010:附录 22，74.

[4]Shah VP,Tsong Y,Sathe P,et al.In vitro dissolution profile comparison-statistics and analysis of the similarity factor,f2[J].Pharm Res,1998,15(6):889-96.

[5]颜耀东.缓释控释制剂的设计与开发[M].北京:中国医药科技出版社，2005:294.

[6]甘 勇，潘卫三，张汝华.难溶性药物渗透泵型控释制剂的研究进展[J].世界科学技术·中药现代化，2002，4(2):53-6.