金花葵籽不饱和脂肪酸对实验性高脂血症大鼠血脂和肝功能的影响

吴正平

(宜春学院美容医学院，江西宜春336000)

金花葵Hibiscus manihot L.，又名菜芙蓉，为锦葵科秋葵属1年生草本植物，是濒于灭绝的珍稀植物。金花葵具有食用、药用、保健等功能，有较高的利用价值［1-2］。前期对金花葵籽油中脂肪酸的气相色谱-质谱(GC-MS)联用技术分析［3］，结果表明金花葵籽油中含有6种脂肪酸，其中不饱和脂肪酸包括油酸、亚油酸以及少量的棕榈油酸，质量分数达到68.91%。本实验对金花葵籽油中不饱和脂肪酸进行提纯，观察其对实验性高脂血症大鼠血脂和肝功能的影响，探讨金花葵籽不饱和脂肪酸调血脂和护肝作用。

1 材料与方法

1.1 材料

1.1.1 动物 SD大鼠，雄性，体质量(150±20)g，由南昌大学实验动物科学部提供，合格证号:赣医动字第02196-02。

1.1.2 药品 金花葵籽不饱和脂肪酸由宜春学院药妆研发中心采用尿素包合法制备［4］，呈黄色澄清油状物，经气相色谱分析，不饱和脂肪酸量≥95%。

1.1.3 饲料 基础饲料由南昌大学医学院实验动物中心提供。高脂饲料含75%基础饲料，8%猪油，15%蛋黄粉，2%胆固醇。

1.1.4 试剂 血清 TC、TG、LDL-C、HDL-C、TP、ALB、GPT 和GOT检测试剂盒均为上海申索佑福医学诊断用品有限公司产品。

1.1.5主要仪器 OLYMPUS AU2700全自动生化分析仪(日本奥林巴斯)。

1.2 方法

1.2.1 动物分组与给药 将实验大鼠随机分为5组，每组10只:正常组喂普通饲料;高脂组喂高脂饲料;金花葵籽不饱和脂肪酸低、中、高剂量组喂高脂饲料，并灌胃金花葵籽不饱和脂肪酸原液:低剂量组1 mL/kg、中剂量组2 mL/kg、高剂量组4 mL/kg，1次/d。持续饲养6周。

1.2.2 血清生化指标的测定 各组大鼠饲养6周末禁食12 h后，乙醚麻醉，眼眶静脉采血，分离血清，按试剂盒说明书测定各组血清 TC、TG、LDL-C、HDL-C、TP、ALB、GPT 和 GOT。

1.2.3 肝脂堆积观察 取大鼠肝脏同一部位，制备肝脏组织冰冻切片，Herxheimer油红O脂肪染色法进行肝脏组织冰冻切片的脂肪染色。

1.2.4 统计学处理 以SPSS11.0软件分析数据，数据以±s表示，进行方差分析和t检验。

2 结果

2.1 对血脂水平的影响 与正常组比较，高脂组血清TC、TG、LDL-C水平明显升高(P＜0.01)，HDL-C明显降低(P＜0.05)，表明高脂血症模型造模成功。与高脂组比较，低剂量组血清TC、TG、LDL-C水平均有不同程度降低，但无显著差异(P＞0.05);中剂量组和高剂量组血清 TC、TG、LDL-C水平明显降低(P＜0.05或P＜0.01)，高剂量组血清HDL-C水平明显升高(P＜0.05)。见表1。

2.2 对血清TP、ALB、GPT和GOT水平的影响 与正常组比较，高脂组血清 TP、ALB水平明显降低(P＜0.05)，GPT、GOT水平明显升高(P＜0.01)。与高脂组比较，低、中、高剂量组血清TP、ALB水平均有所提高，但无显著差异(P＞0.05);低剂量组血清GPT、GOT水平有所降低，但无显著差异(P＞0.05);中、高剂量组血清 GPT水平明显降低(P＜0.05或P＜0.01);高剂量组血清 GOT水平明显降低(P＜0.05)。见表2。

表1 各组血清TC、TG、LDL-C、HDL-C水平 (±s，n=10)

表1 各组血清TC、TG、LDL-C、HDL-C水平 (±s，n=10)

注:与高脂组比较，*P ＜0.05，＊＊P ＜0.01。下同。

组别 TC/(mmol/L) TG/(mmol/L) LDL-C/(mmol/L) HDL-C/(mmol/L)正常组 1.97±0.24＊＊ 0.62±0.17＊＊ 0.37±0.10＊＊ 0.58 ±0.12*高脂组 6.89 ±1.92 0.89 ±0.15 2.56 ±0.76 0.44 ±0.13低剂量组 5.82 ±0.96 0.87 ±0.16 2.13 ±0.54 0.43 ±0.15中剂量组 4.85 ±1.62* 0.69 ±0.15* 1.57 ±0.68* 0.49 ±0.17高剂量组 3.87±0.35＊＊ 0.63±0.21＊＊ 1.25±0.46＊＊ 0.54 ±0.11*

表2 各组血清TP、ALB、GPT和GOT水平 (±s，n=10)

表2 各组血清TP、ALB、GPT和GOT水平 (±s，n=10)

GPT/IU GOT/IU正常组 71.04±7.59* 39.13±3.97* 22.13±8.71＊＊ 39.45 ±14.53组别 TP/(g/L) ALB/(g/L)＊＊高脂组 60.84 ±5.62 32.76 ±7.37 65.19 ±17.85 80.35 ±15.56低剂量组 62.87 ±4.53 33.46 ±5.47 60.24 ±18.57 75.64 ±19.35中剂量组 63.75 ±5.48 34.42 ±2.75 49.65 ±8.57* 73.85 ±21.15高剂量组 65.07±4.86 34.72±3.78 45.23±14.45＊＊ 68.50 ±15.67*

2.3 对肝脂堆积的影响 正常组肝脏有组织弹性，色泽红，质地紧密;高脂组肝脏表面色泽苍白或带灰黄色，压时现凹陷或易碎;金花葵籽油不饱和脂肪酸中、高剂量组肝脏形态则近似于正常组。Herxheimer油红O脂肪染色法观察到高脂组肝细胞间隙以及细胞内堆积了大量脂滴，正常组切片则没有发现明显脂滴，金花葵籽不饱和脂肪酸中、高剂量组切片中脂滴明显少于高脂组。见图1。

3 讨论

图1 肝脏冰冻切片油红O染色(×600)

高血脂是导致心脑血管疾病的一个重要原因。大量动物实验和临床实验表明，不饱和脂肪酸具有调血脂作用而降低心血管疾病发生的风险［5-6］。在与血脂水平密切相关的心血管疾病发病率逐年攀升的今天，不饱和脂肪酸的应用前景十分广阔。动物血清TC、TG、LDL-C和HDL-C水平是反映机体脂质代谢重要指标。其中HDL-C可逆向转运TC，从而降低血清TC水平，因此，高水平HDL-C是心血管的保护因素［7］，而HDL-C水平降低成为诱发早发性冠心病的危险因素之一［8］。本研究结果表明，金花葵籽油不饱和脂肪酸中、高剂量组能降低大鼠血清TC、TG、LDL-C水平(P＜0.05或P＜0.01)，高剂量组升高血清 HDL-C水平(P ＜0.05)，显示具有明显的调血脂作用。

肝脏在营养代谢中起到非常重要的作用，是脂质和脂蛋白代谢的中心，过量的脂质摄入常引起肝损伤的发生［9-12］。血液中蛋白的含量可以反映肝脏功能，一旦肝脏合成功能下降，蛋白在血液中浓度随之降低，其降低程度与肝脏合成功能损害程度呈正相关。实验结果显示高脂组与正常组相比，血清TP和ALB明显降低，表明此造模方法可使实验大鼠肝功能下降;转氨酶是反应肝脏损伤的灵敏指标，与高脂组比较，金花葵籽不饱和脂肪酸中、高剂量组血清GPT水平明显降低(P＜0.05或P＜0.01)，高剂量组血清GOT水平明显降低(P＜0.05)，表明金花葵籽不饱和脂肪酸能抑制因高血脂造成的肝功能下降。从肝脂堆积的观察结果来看，金花葵籽不饱和脂肪酸中、高剂量组肝脏形态好于高脂组，且切片中脂滴明显少于高脂组，这也说明金花葵籽不饱和脂肪酸能有效逆转高血脂对肝脏的影响，促进肝脏脂质分解，减少大鼠肝脏脂质堆积，保护肝细胞的正常功能，发挥护肝效果。

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