HPV感染宫颈病变T细胞亚群与细胞因子变化的初步研究

李亚明，刘 奇

（宜兴市人民医院，江苏 宜兴 214200）

目前已经证实生殖道HPV感染是宫颈癌发生的必要条件，生殖道感染的HPV亚型有30多种，分高危型和低危型。HPV感染的致癌性，反应了感染阶段的流行性。随着宫颈疾病的研究进展，宫颈癌中无性HPV生长周期通常整合病毒DNA到宿主染色体上，提示HPV和宫颈损伤共同进展。而整合HPV病变细胞的清除，主要和T细胞亚群的数量和功能有一定的相关性。本文主要是研究宫颈病变HPV感染者T细胞亚群和IL－2的变化情况。

1 资料与方法

1.1 一般资料

选择2009年8月—2011年4月在我院妇科检查，有宫颈病变感染HPV的患者209例，年龄24～57岁，A组：高危组（87例），B组：低危组（122例），同时选择正常体检，无HPV感染，C组（53例）作为对照组。

1.2 样本采集

采用亚能生物技术（深圳）有限公司提供的宫颈细胞脱落采集器，采集宫颈细胞标本1份，同时，抽取静脉血3mL抗凝保存。

1.3 试剂和仪器

ABI7500Real Time PCR system基因扩增仪产于美国；核酸分子杂交仪及配套试剂由亚能生物技术（深圳）有限公司提供物；BD－流式细胞仪、CD3、CD4、CD8及IL－2试剂购于美国BD公司。

1.4 方法

实验操作方法、步骤及结果判读严格按照操作说明书进行。统计学方法采用F检验和t检验。

2 结果

根据PCR扩增后，核酸杂交检测结果，将209例患者分成三组，高危组87例（HPV161826313539455153565859666873），低危组122例（HPV6114042445461707281）。正常组53例。T细胞：三组相比无显著性差异（P＞0.1）；T细胞：A、B组低于C组，差异有显著性（P＜0.005），且A组低于B组（P＜0.025）T细胞：A组低于B、C组差异有高度显著性（P＜0.005），B、C组差异无显著性（P＞0.25）；比值：A组低于C组，差异有显著性。IL－2：A、B 组低于 C 组，差异有显著性（P＜0.005），A、B组差异无显著性。外周血及IL－2检测结果见表1。

3 讨论

病毒感染一方面可以激发宿主的非特异性细胞免疫和体液免疫，一方面抑制特异性免疫反应的形成，病毒的清除主要依靠宿主的特异性细胞免疫［1］。HPV早期蛋白E1－E7不仅参与病毒复制，还可以调节免疫反应，E7参与局部抗原提呈的调节，E7过度复制可抑制抗原提呈细胞功能。E7抗原可减弱HPV感染细胞对INF－α的反应，影响INF－α的抗病毒作用，其中HPV16E7抗原可在CTL水平诱导特异性耐受。HPV高危型与泌尿生殖道的恶性肿瘤有关，而低危型仅与泌尿生殖道的良性病变有关［2］。

IL－2是由激活的T细胞产生，主要能刺激T细胞增殖和产生细胞因子；使NK细胞活化、增殖；刺激B细胞增殖，分泌抗体［4］。本次实验发现，高危型和低危型的IL－2浓度均低于正常组，进一步印证HPV感染的患者其细胞免疫和体液免疫均受到抑制，提示HPV感染不易治愈且有反复发作的可能。在目前HPV预防性疫苗和治疫性疫苗还没有实质性进展的时候，我们认为临床使用白细胞介素治疗，提高机体特异细胞免疫和体液免疫，对治愈HPV感染有一定作用。

表1 不同程度患者外周血CD＋3、CD＋4、CD＋8、及IL－2检测结果（）

表1 不同程度患者外周血CD＋3、CD＋4、CD＋8、及IL－2检测结果（）

高危组（A组）低危组（B组）正常组（C组）ACD＋4／B A／C B／C F t P F t P F t P CD＋0.25 CD＋367.56±2.64 66.98±2.18 68.17±2.421.3030.351 ＞0.2501.1301.127 ＞0.1001.9120.315 ＞19.25±1.86 23.19±2.14 24.37±3.141.30210.85 ＜0.0051.1603.726 ＜0.0051.5421.716 ＞0.05 CD＋4／CD＋8 1.09±0.14 1.17±0.24 1.31±0.191.7210.196 ＞0.252.4202.513 ＜0.0251.4031.715 ＞0.25 IL－2 7.77±11.73 8.36±11.52 18.25±8.751.9470.347 ＞0.252.7731.826 ＜0.054.6271.619 ＜0.0521.17±3.58 27.21±4.23 31.81±2.461.0122.241 ＜0.0251.2404.812 ＜0.0050.9782.316 ＜0.025 CD＋48

［1］MITTAL K DEMOPOULOS RI.Tatam［J］.Int J Gyecol Pathol，1998，12（13）：2016－2072.

［2］SEUNG H S，JEA K L，O YE S S.The relationship between cytokines and HPV 216，HPV216E6，E7andhigh2risk HPV viral load in the uterine cervix［J］.Gynecol O ncol，2007，104（3）：732－728.

［3］张培影，徐侠，杨海燕，等.HPV16／18型表达和细胞病理学检查与宫颈癌及癌前病变的相关性研究［J］.南京中医药大学学报，2009，50（1）：778－781.

［4］董金蓉，谢飞.人乳头瘤病毒的病原免疫学及其疫苗的研究进展［J］.微生物学免疫学进展，2007，35（3）：74－79.