HBV相关疾病患者血清IL-6、T淋巴细胞亚群、HBV DNA的变化及临床意义

刘曦东

(胜利油田中心医院，山东东营257034)

研究证实，T淋巴细胞亚群、细胞因子调节失衡与慢性肝病的发生、发展密切相关。2008年12月～2011年1月，我们对70例HBV相关性疾病患者血清IL-6、T淋巴细胞亚群、HBV DNA及肝功能的变化进行了检测。现报告如下。

1 资料与方法

1.1 临床资料 70例HBV相关性疾病患者均来自胜利油田中心医院感染病科。其中，慢性乙肝43例(乙肝组)，男30例、女13例，平均年龄36.5岁;肝硬化15例(肝硬化组)，男11例、女4例，平均年龄47.8岁;慢性重型肝炎12例(肝炎组)，男9例、女3例，平均年龄44.2岁。患者均符合2006年中华医学会肝病学分会及中华医学会感染病学分会联合修订的《慢性乙型肝炎防治指南》的诊断标准［1］，并排除其他病毒重叠感染。另取健康查体者18例为对照组，其心、肝、肺、肾等重要脏器无疾患，经临床检查除外免疫性疾病和肿瘤，HBV标志检测阴性，肝、肾功能正常。

1.2 方法 各组清晨空腹采肘静脉血3.5 ml，其中2 ml 4℃ 3 000 r/min离心10 min，分离血清分装，-20℃保存待测;另1.5 ml血抗凝。IL-6的测定采用ELISA法，试剂盒由晶美生物科技公司提供，操作严格按使用说明进行。HBV DNA定量采用FQPCR法，依据HBV DNA标准样品(单位:拷贝/ml)建立的标准曲线，由仪器软件自动分析计算出待测标本 HBV DNA起始拷贝/ml，HBV DNA＞103拷贝/ml为阳性，HBV DNA≤103拷贝/ml(荧光 PCR检测下限)定为阴性。肝功检测应用全自动生化分析仪。应用流式细胞仪直接免疫荧光法检测外周T淋巴细胞亚群CD4+、CD8+。

1.3 统计学方法 采用SPSS10.0统计软件，组间差异性比较采用方差分析或t检验。P≤0.05为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 各组IL-6、ALT及T淋巴细胞亚群的变化 见表1。

表1 各组IL-6、ALT及T淋巴细胞亚群的变化(±s)

表1 各组IL-6、ALT及T淋巴细胞亚群的变化(±s)

注:与对照组比较，*P ＜0.05;与乙肝组比较，△P ＜0.05

组别 n IL-6(pg/ml) ALT(U/L) CD4+(%) CD8+(%)对照组 18 7.13 ±1.75 24.78 ±12.56 45.62 ±4.86 27.87 ±5.08乙肝组 43 37.45 ±1.79* 104.16 ±22.36* 38.35 ±5.12* 32.11 ±6.83*肝炎组 12 96.28 ±4.25＊△ 295.12 ±79.08＊△ 32.85 ±4.87＊△38.08 ±5.15＊△肝硬化组 15 70.63±8.12＊△188.50±35.20＊△ 35.13 ±5.06＊△34.97±5.24＊△

2.2 HBV DNA变化与IL-6、T淋巴细胞亚群的关系 70例患者中，HBV DNA阳性58例，HBV DNA阴性12例，HBV DNA阳性与阴性患者IL-6、T淋巴细胞亚群检测结果见表2。

表2 HBV DNA阳性与阴性患者IL-6、T淋巴细胞亚群比较(±s)

表2 HBV DNA阳性与阴性患者IL-6、T淋巴细胞亚群比较(±s)

注:与HBV DNA阴性组比较，*P＜0.05

组别 n IL-6(pg/ml) CD4+(%) CD8+(%)HBV DNA阴性组12 35.85 ±6.43 35.22 ±12.45 32.29 ±8.19 HBV DNA 阳性组 58 58.67 ±13.58*31.29 ±8.96* 36.87 ±7.75*

3 讨论

人体感染HBV后免疫调节功能紊乱，细胞因子网络失调，产生并释放各种细胞因子，促使肝细胞合成大量肿瘤坏死因子α［2，3］，进而诱导机体产生和释放 IL-6［4，5］。本研究发现乙肝组、肝炎组、肝硬化组外周血清IL-6水平均升高，各组血清IL-6水平与ALT水平呈正相关，说明血清IL-6水平与肝细胞坏死程度密切相关，其发病机理尚不十分清楚［6］。

HBV相关疾病患者存在着细胞免疫功能的紊乱。本研究表明，与正常对照组比较，HBV相关疾病患者外周血CD4+降低、CD8+增加，与文献报道一致［7］，二者升降程度与血清IL-6水平高低亦有密切关系。研究发现，各型肝炎在肝细胞坏死区以CD8+细胞和巨噬细胞为主，其数量与病情的严重程度有关［8］。另有研究表明，病毒性肝炎CD8+细胞增加一般认为主要是细胞毒性T淋巴细胞增加［9］。IL-6是CTL的终末辅助因子，可以诱导其增殖、分化［10］，增强其杀伤靶细胞的能力，并导致肝纤维化的形成。本研究还发现，HBV DNA阳性组CD4+下降、CD8+上升比HBV DNA阴性组更显著，两组差别有统计学意义。提示HBV相关性疾病患者各T细胞亚群改变与HBV感染和HBV DNA复制有关，HBV DNA载量增加可进一步导致乙肝患者细胞免疫功能紊乱加重。

［1］中华医学会肝病学分会，中华医学会感染病学分会.慢性乙型肝炎防治指南［J］.现代消化及介入诊疗，2006，11(4):245-255.

［2］Sheron N，Williams R.IL-8 as a circulating cytokine induction by recombinant tumor necros is factor-alpha［J］.Clin Exp Immunol，1992，89(1):100-103.

［3］Chu YK，Wu JS，Ma QJ，et al.Plasma TNF levels during the formation of liver cirrhosis and portal hypertension in rats［J］.Huaren Xiaohua Zazhi，1998，6(9):755-756.

［4］中华医学会传染病与寄生虫病学分会、肝病学分会.病毒性肝炎防治方案［J］.中华肝脏病杂志，2002，10(6):54-58.

［5］Lan JY，SheronN，Nouri-Aria KT，et al.Increased tumor necrosis factor alpha receptor number in chronic hepatitisB virus infection［J］.Hepatology，1991，14(1):44-50.

［6］甄真，王麟士，曹治宸，等.病毒性肝炎患者血清IL-6和T细胞亚群的关系［J］.中华微生物和免疫学杂志，1996，16(4):301-303.

［7］詹丽萍，李培成.T细胞亚群和TNFα慢性肝病的关系［J］.临床肝胆病杂志，1998，14(3):176.

［8］Kakumu S，Fukatsu A，Shinagawa T，etal.Localization of intrahepatic interleukin 6 in patients with acute and chronic liver disease［J］.JChin Pathol，1992，45(5):408.

［9］何东苟，陈柏铭，林勇平，等.病毒性肝炎两类免疫效应细胞的功能变化［J］.临床肝胆病杂志，2000，16(1):31.

［10］Takai Y，Wong GG，Clark SC，et al.B cell stimulatory factor-2 is involved in the differentiation of cytotoxic T lymphocytes［J］.J Immunol，1988，140(2):508.