山东省菏泽学院动物科学系 初汉平
长期以来人们普遍认为,蛋白质必须被水解为游离氨基酸后才能被吸收。然而有研究发现,以理想氨基酸模式配制的纯合日粮或低蛋白质的组合氨基酸日粮饲喂动物,并不能达到最佳的生产性能(Webb 等,1992;Pinchasov等,1990)。 研究表明,小肽比单一氨基酸更容易被吸收和利用(Boze等,2000),在提高蛋白质合成,消除游离氨基酸的吸收竞争,提高动物生产性能,增强动物机体的免疫力等方面也发挥着重要作用(李焕友和何叶如,2004;陈勇等,1999)。
植物小肽是含生物活性物质的小肽蛋白源,是新一代绿色、高效的营养性饲料添加剂(杨维仁等,2008)。本试验以植物小肽为研究对象,分析其对断奶至2月龄新西兰兔生产性能、免疫性能及血液生化指标的影响,为植物小肽在肉兔生产中的应用提供一定的试验依据。
1.1 试验设计与饲养管理 于山东省农科院畜牧所试验兔场,将150只体重相近 [(726.12±33.81)g]、健康状况良好的断奶新西兰兔随机分为5组,分别为对照组和4个试验组,每组30个重复,每个重复1只。试验兔单笼饲养,人工喂料,自由饮水,自然采光,自然通风,每3~5 d消毒兔舍一次。预试期7 d,正试期30 d,试验期间试兔自由采食配合颗粒饲料。
1.2 试验日粮 日粮配制参照NRC(1977)肉兔饲养标准,其组成及营养水平见表1。对照组、试验Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ组日粮的植物小肽添加水平(饲喂状态基础)分别为 0、0.30%、0.60%、0.90%、1.20%。日粮加工成4~6 mm的颗粒饲料。
本试验所用的植物小肽由大豆蛋白质经生物酶解法生产而成,主要以二肽和三肽为主,由上海邦成生物科技有限公司提供。
表1 基础饲粮组成及营养水平
1.3 样品采集与处理 试验开始后的第30天早晨空腹心脏采血10 mL,37℃水浴静置30 min,3000 r/min离心10 min,分离所得血清分装于Eppendorf管中,置于液氮中保存待测。每组随机抽取6只试兔屠宰,取脾脏、胸腺、下颌淋巴结、腹股沟淋巴结并称重。
1.4 测定指标与方法
1.4.1 生产性能 于试兔正试期开始当天晨饲前空腹称重作为试兔始重,试验结束后空腹称重作为试兔末重,正试期内每天准确记录采食量,用于计算平均日采食量(ADI)、平均日增重(ADG)和料肉比(F/G)。
1.4.2 免疫性能
1.4.2.1 免疫器官指数 分别计算脾脏、胸腺、下颌淋巴结、腹股沟淋巴结指数。免疫器官指数(g/kg)=免疫器官重(g)/宰前活重(kg)。
1.4.2.2 血清中免疫球蛋白的测定 免疫比浊法。
1.4.3 血液生化指标 采用Olympus AU 2700全自动生化分析仪测定血清总蛋白 (TP)、白蛋白(ALB)、胆固醇(CHO)、血清尿素氮(SUN),试剂盒购自日本和光纯药工业株式会社,操作按照说明书进行。
1.5 数据处理 用SPSS 16.0统计软件的ANOVA法进行方差分析,并用邓肯氏法进行显著性检验,各组数据以平均数±标准差表示。
2.1 植物小肽对断奶至2月龄新西兰兔生产性能的影响 由表2可知,试验组兔平均日增重显著高于对照组(P<0.05),Ⅱ组平均日增重最高,比对照组提高了29.85%;试验组料重比显著低于对照组(P<0.05),Ⅱ组料重比最低,与对照组相比降低了24.59%。
表2 植物小肽对试兔生产性能的影响
2.2 植物小肽对断奶至2月龄新西兰兔免疫性能的影响
2.2.1 植物小肽对免疫器官指数的影响 由表3可以看出,Ⅱ组的胸腺指数显著高于对照组、Ⅳ组(P<0.05),与对照组比提高了35.47%;Ⅱ组下颌淋巴结指数显著高于对照组、Ⅲ组和Ⅳ组(P<0.05);脾脏指数和腹股沟淋巴结指数各组间差异不显著(P > 0.05)。
2.2.2 植物小肽对血清免疫球蛋白的影响 由表4可知,植物小肽对血清中IgG有显著影响(P<0.05),随着植物小肽添加量的增加,IgG呈现先增加后降低的趋势;而IgA与IgM无明显的变化规律。
表3 植物小肽对试兔免疫器官指数的影响g/kg
表4 植物小肽对试兔血清免疫球蛋白的影响nmol/L
2.3 植物小肽对断奶至2月龄新西兰兔血液生化指标的影响 由表5可以看出,植物小肽对试兔血清总蛋白影响显著(P<0.05),Ⅱ组显著高于Ⅰ组和对照组(P<0.05);植物小肽对试兔血清胆固醇影响显著(P<0.05),Ⅱ组显著高于对照组、Ⅰ组和Ⅳ组(P<0.05);血清白蛋白和血清尿素氮未出现显著性变化(P>0.05)。
表5 植物小肽对试兔血清生化指标的影响
3.1 植物小肽对断奶至2月龄新西兰兔生产性能的影响 王恬等(2003)认为,小肽可以被仔猪完整而有效地吸收,减少大肠后段氨气和有毒胺类的产生,同时能维持消化道正常的免疫功能,降低腹泻率。完全以小肽形式供给动物蛋白质时,蛋白质沉积效率高于相应游离氨基酸日粮或完整蛋白质日粮(王碧莲等,2000),且赖氨酸的吸收速度不再受精氨酸的影响(施用辉,1996),由此可以充分发挥各种游离氨基酸的营养吸收作用,提高动物的生产性能。另外,一部分作为营养调控物的生理活性小肽,可作为神经递质间接刺激肠道激素受体或促进酶的分泌,进而促进小肠发育,增强了仔猪对营养物质的吸收(Kelly等,1992)。小肽对兔的促生长作用机理可能与仔猪相同。
本试验条件下,日粮中添加植物小肽可以提高肉兔的日增重和饲料转化率,与蒋培红等(2007)的研究结论基本一致。
3.2 植物小肽对断奶至2月龄新西兰兔免疫性能的影响
3.2.1 植物小肽对断奶至2月龄新西兰兔免疫器官发育的影响 一般来说,免疫器官和免疫指数在一定程度上反映了动物的免疫功能,在动物健康的情况下,免疫指数越高动物的免疫功能越强(陶志勇和李福昌,2005)。李清和毛华明(2005)报道,小肽可以显著促进鲤鱼的免疫性能。本试验结果显示,添加植物小肽组试兔的免疫器官发育明显好于对照组。
3.2.2 植物小肽对断奶至2月龄新西兰兔血清中免疫球蛋白的影响 Berger等(1993)认为,免疫球蛋白的含量以及机体对于某些特异性抗原的抗体产生情况都是衡量动物免疫功能强弱的重要指标,也是评价营养对机体免疫功能作用情况的常用参数。免疫球蛋白的含量反映了动物体液免疫的状况,一般在正常范围内,其数值越大,动物的免疫功能则越强(吕建敏等,2010)。
IgG是介导体液免疫的主要抗体,淋巴细胞在免疫应答过程中起核心作用,是体液免疫中最为重要的物质。祝平(2007)发现,哺乳仔猪日粮中使用植物小肽能够显著提高断奶仔猪血清中IgG水平。本试验中,血清IgG含量随植物小肽水平的增加呈现先增加后降低的趋势。因此可以认为,适宜的植物小肽水平有利于增强生长肉兔的体液免疫功能。但本试验中,试兔血清IgA、IgM含量无明显的变化规律,其原因有待进一步探讨。
3.3 植物小肽对断奶至2月龄新西兰兔血液生化指标的影响 血清总蛋白和白蛋白在一定程度上反映了日粮蛋白质的营养水平及动物对蛋白质的消化吸收程度。一般来说,机体的营养状况好,蛋白质合成增加,血清总蛋白水平升高(张永翠和李福昌,2008)。本试验中,当植物小肽添加量为0.6%时,血清总蛋白的含量显著升高,表明此时氨基酸基本平衡,试兔对氨基酸和小肽的吸收利用最佳,蛋白质沉积达到最大。
秦应和等(2010)指出,胆固醇是构成细胞膜的重要成分,也是合成胆汁、维生素D和激素的原料,可在一定程度上反映体内脂肪代谢状况,血清胆固醇与生长性能呈现正相关。本试验结果发现,植物小肽能显著提高血清胆固醇含量,表明植物小肽对生长肉兔体内脂肪代谢可能产生一定影响,并提高肉兔的生产性能。
血清尿素氮浓度可以较准确的反映动物体内蛋白质代谢和氨基酸代谢之间的平衡状况。当氨基酸平衡良好时,血清尿素氮的浓度显著下降(Scott等,1982)。本试验中,添加植物小肽未对血清尿素氮的含量产生显著影响,说明添加植物小肽未造成体内氨基酸的不平衡。
植物小肽可以显著提高断奶至2月龄新西兰兔的生长发育和免疫性能;并显著影响血清总蛋白和胆固醇含量;添加效果以0.60%最好。
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