离心积分法制备血小板制品的质量观察

刘云华，王宏碧，王绍兰，邓 萍

(1、宜春市中心血站，江西 宜春 336000；2、宜春市人民医院，江西 宜春 336000)

目前血小板在临床的应用越来越广，主要应用于治疗血小板生成障碍，引起的血小板减少，血小板功能异常、稀释性血小板减少，预防性输注等。而制备高品质的浓缩血小板，满足临床应用的需要，对制备浓缩血小板技术、设备等提出了更高要求。目前血小板制备方法分两种，一种是手工法，另一种是用血细胞分离机采集法[1，2]。我们应用具有离心积分功能的Thermo-KR4i大容量冷冻离心机，离心制备浓缩血小板，大大提高了血小板回收率。现报告如下。

1 材料与方法

1.1 材料与仪器

400 ml四联袋 (山东威高集团医用高分子制品有限公司，CPD方)，血小板保存袋具有良好的透气性[3]。 大容量冷冻离心机(德国，Thermo-KR4I)、大容量冷冻离心机(德国，Cryofuge-6000i)、热合机(费森尤斯)。

1.2 原料血

1.2.1 采血过程中要注意影响浓缩血小板制备的因素，采血时需求一针见血，尽量减少组织损伤，采400mL全血在6min内完成。采血过程中要不间断地轻摇血袋，使血液和抗凝剂充分混匀，以防血液凝固，影响血小板回收率[3]。

1.2.2 血液的保存和运输环境对浓缩血小板制备的影响，从采血到制备过整个过程均需求在22℃±2℃环境中。若保存不当，受损血小板可达95%[4]；血小板保存5d后，PF3活性可增加12倍，血小板出现广泛聚集。

1.3 分组 对照组：随机抽取2010年2月至2011年 6月采用方案 3（2600×g离心 8min)，以 Cryofuge-6000i普通离心机离心制备血小板制品50份。实验组：随机抽取2010年2月至2011年6月采用方案3(2600×g离心8min)，以具有离心积分功能的Thermo-KR4i离心制备血小板50份。对照组和实验组的全血与血小板制品均采用AC970血球计数仪检测血小板含量。

1.4 制备方法

1.4.1 400ml全血的四联袋置于22℃±2℃温度离心2600×g离心8min，离心后主袋置于分浆夹内，先将大部分血浆分入第二袋，然后将白膜层（血小板、白细胞和少量红细胞层）挤入第三袋，再从第二袋分出适量血浆至第三袋。

1.4.2 夹住第二、三袋间的塑料管，将第四袋内的红细胞保存液加入主袋内，使之与主袋内红细胞混匀，热合主袋与第四袋间的塑料管。

1.4.3 将第三、四袋置于22℃±2℃ 280×g轻度离心10min，将第三袋上层悬液分入第四袋即得血小板浓缩液。

2 结果

对照组和实验组的数据应用SPSS软件进行数据分析，描述性统计结果见表1，独立样本t检验结果显示全血血小板总体均数无显著性差异的情况下，通过采用具有离心积分功能的德国Thermo-KR4i大容量冷冻离心机制备血小板，回收率(81.56±0.17)%显著高于对照组(60.00±0.18)%，P<0.05。

表1 100例血小板制备的效果

3 讨论

离心效果影响对浓缩血小板制备的质量，离心力和离心时间是决定离心效果的关键因素[4]，但无法仅用这两个参数来准确衡量离心效果，因为离心提速是个加速度过程，离心样品量增加、电压骤变、环境温度和湿度改变、离心机转子老化等因素都会减缓提速，从而影响最终的离心效果。离心积分(HRF)是国际公认衡量离心效果的科学标尺。HRF=RCF(相对离心力)与离心时间的积分，它是离心效果重复性的保证。Thermo-KR4i大容量冷冻离心机具备离心积分的功能，充分考虑了离心过程中各种影响因素对离心加速的影响，保证施加于样品的离心力总量的一致，从而保证一致的离心效果。

实验数据表明，利用具有离心积分功能的德国Thermo-KR4i大容量冷冻离心机离心制备的浓缩血小板含量比普通冷冻离心机的更高，回收率更稳定。

[1]秦艳兰,刘景春,刘仁强.自动和手工制备浓缩血小板的质量评价[J].实验与检验医学,2009,27(01):33-34.

[2]袁小玲,李文斌,熊春梅,等.优化手工制备浓缩血小板方法的应用[J].实验与检验医学,2010,28(05):493-494.

[3]刘海田.血液血液制品采集检测技术标准及质量控制实务全书[M].北京中软电子出版社,2003:409.

[4]习 燕,雷 宇,付雪梅,等.手工分离浓缩血小板制备方法的质量分析[J].中国输血杂志,2010,23（3）:213-214.