香加皮有效部位滴丸的质量标准研究*

杨 虹 ，刘 虹 ，王 萌 ，任晓亮 ，朱晓月

（1.天津中医药大学科研处，天津 300193；2.天津中医药大学中医药研究院，教育部方剂学重点实验室，天津 300193）

香加皮有效部位滴丸的质量标准研究*

杨 虹1，刘 虹2，王 萌2，任晓亮2，朱晓月2

（1.天津中医药大学科研处，天津 300193；2.天津中医药大学中医药研究院，教育部方剂学重点实验室，天津 300193）

[目的]建立香加皮有效部位滴丸的质量标准。[方法]建立了高效液相色谱（HPLC）法进行杠柳毒苷含量测定和杠柳毒苷的均匀度检查；对滴丸剂进行了常温下的初步稳定性考察。[结果]香加皮有效部位滴丸含量测定方法学考察的指标均符合有关规定；滴丸均匀度符合要求。[结论]建立了有效部位及滴丸的质量标准，方法简便、可靠。滴丸剂质量基本稳定。

香加皮；有效部位；滴丸；质量标准；杠柳毒苷

香加皮（Cortex Periplocae）是萝藦科植物杠柳（Periploca SepiumBge.）的干燥根皮，其最主要的强心苷成分为杠柳毒苷（periplocin）。本院采用现代工艺对专利技术香加皮提取物[1]进行精制，富集了其中的强心苷成分，使杠柳毒苷含量达到50%以上，制成香加皮抗心衰有效部位[2]，并用大鼠离体心脏灌流法对其抗心衰活性进行了验证。因中药滴丸剂吸收迅速、口服生物利用度高，故将香加皮有效部位制成滴丸，可用于治疗急、慢性心衰。课题组进行了香加皮有效部位滴丸的质量标准研究，包括杠柳毒苷的含量测定及含量均匀度检查；另外对有效部位滴丸常温下的稳定性进行了初步考察。

1 仪器与试药

Waters515高效液相色谱仪。杠柳毒苷对照品（天津中医药大学中医药研究院，纯度98%以上）；香加皮有效部位（天津中医药大学中医药研究院，杠柳毒苷含量53%）；聚乙二醇6 000（分析纯，天津市北方化玻购销中心），液体石蜡（分析纯，天津市北方天医化学试剂厂）；乙腈（色谱纯，天津市康科德科技有限公司），超纯水（Millipore系统），甲醇（色谱纯，天津市康科德科技有限公司）。

2 方法与结果

2.1 香加皮有效部位滴丸的制备 取40 g聚乙二醇6 000加热融化，将260mg香加皮有效部位加入上述基质中，充分搅拌使其分散均匀，倒入滴丸储液器中（外壁通80～85℃循环水），以每分钟30滴的速度滴入冷却柱（柱内装液体石蜡，外壁装凉水加碎冰）。使滴丸完全冷却后，取出擦干，即得。

2.2 含量测定

2.2.1 色谱条件 色谱柱为依利特HypersilODS-2柱（250mm×4.6mm，5μm），乙腈－水（27:73）为流动相，流速1.0mL/min，柱温25℃，检测波长220 nm。

2.2.2 对照品溶液的制备 精密称取杠柳毒苷对照品适量，用甲醇配成浓度为每1mL含杠柳毒苷0.18mg的对照品储备液。

2.2.3 供试品溶液的制备 取样品10粒，研细，精密称取40mg，置10mL量瓶中，加适量甲醇，超声提取10min，放冷，用甲醇稀释至刻度，摇匀，用微孔滤膜（0.45 μm）滤过，取续滤液，即得。

2.2.4 线性关系的考察 精密吸取杠柳毒苷对照品储备液 1、1.5、3、2.5、5mL 分别置 25、25、25、10、10mL量瓶中，加甲醇稀释至刻度，分别取储备液及系列浓度稀释液10μL注入色谱仪，测定峰面积。以进样量（X）为横坐标，峰面积（Y）为纵坐标，绘制标准曲线。得回归方程 Y=1.3×106X-1.8×103，r＝0.999 9，线性范围 0.071 84～1.796μg。

2.2.5 精密度实验 精密吸取供试品溶液，重复进样6次，测得杠柳毒苷峰面积相对均数标准差（RSD）为1.8%，结果见表1。

2.2.6 供试品稳定性实验 取同一供试品溶液，分别于 0、2、4、6、8 h 进样，测定杠柳毒苷峰面积变化，8 h内峰面积RSD为1.5%，表明供试品溶液在8 h内稳定。

表1 精密度实验测定结果Tab.1 The resultsof precision test

2.2.7 重复性实验 取同一样品，按2.2.3分别制备6份供试品溶液，测定杠柳毒苷含量，RSD为2.0%，结果见表2。

表2 重复性实验测定结果Tab.2 The resultsof repeatability test

2.2.8回收率实验 采用加样回收法，精密称取已知含量的有效部位滴丸，分别精密添加一定量的杠柳毒苷对照品，按样品含量测定项下方法操作，测定，平均回收率100.7%，RSD为1.1%，结果见表3。

表3 滴丸中杠柳毒苷的回收率测定结果Tab.3 The resultsof average recovery of periplocin in drop pills

2.2.9 样品含量测定 取3批香加皮有效部位滴丸，分别按2.2.3制备供试品溶液。精密吸取对照品溶液10μL，供试品溶液15μL，分别注入液相色谱仪，记录峰面积，外标法计算含量，测定结果见表4。色谱图见图1。

表4 三批香加皮有效部位滴丸测定结果（n=3）Tab.4 The determ ination resultsof3 batchsof effective fraction drop pills in Cortex Periplocae

2.3 溶散时限 取香加皮有效部位6粒，按照崩解时限检查法（中国药典2005版一部附录IK）滴丸剂项下检查，结果见表5。

表5 香加皮有效部位滴丸溶散时限考察Tab.5 The dissolve latitudeofeffective fraction drop pills in Cortex Periplocae

结果表明：3批滴丸溶散时限均在30 min以内，符合中国药典2005版一部附录滴丸剂项下的有关规定。

2.4 含量均匀度 取香加皮有效部位滴丸10粒，照含量均匀度检查法（中国药典2005版二部附录XE）检查，结果分别见表6。

表6 香加皮有效部位滴丸含量均匀度考察Tab.6 The contentuniform ity of effective fraction drop pills in Cortex Perip locae

结果表明：按照含量均匀度检查法（中国药典2005版二部附录XE）检查，滴丸的含量均匀度均符合规定。

2.5 常温下滴丸的稳定性初步考察 将香加皮有效部位滴丸于常温避光下密封保存，于不同时间取样，按2.2测定杠柳毒苷的含量，测定结果见表7。按2.3测定溶散时限，按2.4测定均匀度，结果均符合规定。

结果表明，香加皮有效部位滴丸在室温避光下保存6个月，质量基本稳定。

3 讨论

3.1 研究建立了香加皮有效部位滴丸的质量标准。研究建立了该滴丸中杠柳毒苷的含量测定方法，该方法简便、准确、可靠。对该滴丸进行了溶散时限及含量均匀度检查，均符合药典规定。

3.2 《中国药典》（2005版）一部附录IK对中药滴丸剂只要求做重量差异、溶散时限的检查[3]，考虑本滴丸剂主药和基质比例相差较大，而且强心苷类成分有一定毒性，参考中国药典2005版二部附录XE含量均匀度项下的规定[4]：每个标示量小于2mg的滴丸剂应检查含量均匀度，故将本滴丸重量差异检查改为含量均匀度检查更为合理。

表7 香加皮有效部位滴丸稳定性结果Tab.7 The stability ofeffective fraction drop pills in Cortex Perip locae

3.3 中药有效部位中有效成分含量较高，将有效部位制备成滴丸剂，既可满足临床需要，又可减少服用量，增加患者顺应性，实现了中药“三小、三效、三便”的现代化需求[5-6]。

[1]张伯礼，刘 虹，高秀梅，等.香加皮强心作用有效提取物、制备方法及用途[P].中国：专利号：ZL200410019975.5.

[2]刘 虹，高秀梅，张伯礼，等.香加皮强心作用有效部位的制备方法及含它们的药物制剂和医疗用途 [P].中国：专利号：200510013382.2.

[3]国家药典委员会编.中华人民共和国药典(一部)[S].北京:化学工业出版社，2005：附录IK.

[4]国家药典委员会编.中华人民共和国药典(二部)[S].北京:化学工业出版社，2005：附录XE.

[5]刘 虹，杨 虹，王 萌，等.大孔树脂纯化香加皮提取物的工艺考察[J].天津中医药大学学报，2006，25（3）：188-190.

[6]刘 虹，孙 巍，王 萌，等.正交实验优化香加皮药材的提取工艺[J].天津中医药大学学报，2006，25（1）：38-39.

Study on quality standard ofeffective fraction drop pills in Cortex Periplocae

YANGHong,LIUHong,WANGMeng,etal
(1.Managementoffice ofscientific research of Tianjin University of TraditionalChineseMedicine,Tianjin 300193,China；2.Research institute of Tianjin University of TraditionalChineseMedicine,Tianjin 300193,China)

[Objective]To establish quality standard ofeffective fraction drop pills foranti-heart failure in Cortex Periplocae.[Methods]HPLCmethod was adopted for content determination of periplocin and contentuniformity in drop pills.The primary study wasmade on the stability ofdrop pillsunder the room temperature.[Results]Themethodology of contentdetermination for the drop pillsand the uniformity complied with rules.[Conclusion]The quality standard of the effective fraction drop pills foranti-heart failure in Cortex Periplocaewas setup and themethod was convenientand reproducible.The drop pillswere relatively stable.

Cortex Periplocae;effective fraction;drop pills;quality standard;periplocin

R284.2

A

1672-1519(2011)04-0332-03

国家科技支撑计划“重大新药创制”重大专项（2009ZX09103－372）。

杨 虹（1981－），女，研究实习员，研究方向为中药新药研发。

刘 虹。

2011-04-25）