HPLC法测定复方瓜子金合剂中靛玉红的含量

黄伟 郭洁

(1.陕西国际商贸学院 陕西 咸阳 712046; 2.陕西中医学院 陕西 咸阳 712046)

复方瓜子金合剂是由瓜子金,大青叶,海金沙,白花蛇舌草,野菊花,紫花地丁六味药制成的中药复方制剂,由复方瓜子金颗粒改剂型而成[1～2]。具有利咽清热,散结止痛,祛痰止咳的功效。现代药理研究证明大青叶中含靛蓝、靛玉红等活性成分,具有明显的抗炎、解热作用。本试验参照有关文献[3],采用高效液相色谱法对制剂中的大青叶所含的靛玉红进行了定量控制,测定快捷、准确、可靠。

1 仪器和试药

仪器:SSI高效液相色谱仪(美国SSI公司)。Phenomenex ODS(5μm,250mm×4.6mm ID色谱柱;SSI P4000泵;SSI 500UV/Vis检测器;5mL定量环。HW-2000色谱工作站(千谱软件有限公司)。塞多利斯BP211D电子天平。

试剂:甲醇为色谱纯试剂(美国TEDIA公司);水为二次蒸馏水;其余试剂为分析纯(西安化学试剂厂)。

试药:靛玉红对照品购自中国药品生物制品检定所(批号0717-200003;供含量测定用)。

2 方法与结果

2.1 供试品溶液的制备

萃取次数的考察:精密量取本品30mL,置100mL烧瓶中,加氯仿30mL,加热回流3次,每次30min,分取第1、2、3次的氯仿层,分别用氯仿饱和的水洗2次,每次20mL,氯仿层再用适量无水硫酸钠脱水后,蒸干,残渣加甲醇使溶解,定容至25mL量瓶中,0.45μm微孔滤膜滤过,进样,测定峰面积,结果表明回流萃取2次,靛玉红可提取完全。

2.2 靛玉红线性关系

取靛玉红对照品溶液(0.0307mg/mL)适量,用甲醇分别配制成浓度为0.00307、0.00614、0.00921、0.0123、0.0154mg/mL对照品溶液,进样,记录色谱图,测定峰面积,结果。并以峰面积对进样量进行回归,得标准曲线方程y=5E+06x+8235.3,r=0.9997。结果表明,靛玉红在0.0154～0.0770μg范围内,峰面积值与进样量有良好的线性关系。

2.3 精密度试验

取配制好的供试品溶液(批号100801),按拟定的色谱条件测定,重复进样5次,结果供试品峰面积平均值为184041,RSD%=0.93。表明本测定方法精密度良好。

2.4 溶液的稳定性试验

取供试液(批号100801)分别在不同间隔时间(0、2、4、6、8h)进样,结果供试品峰面积平均值为183770,RSD%=1.02。表明供试品溶液在8小时内基本稳定。

表1 中试样品中靛玉红含量测定结

2.5 回收率试验

取靛玉红对照品(浓度为0.0307mg/mL)3mL、3mL、5mL、5mL、7mL、7mL,分别置100mL烧瓶中,挥干,再分别加入已知含量的样品(批号100801)15mL,按上述样品制备方法和色谱条件制备加样回收供试品溶液,并注入高效液相色谱仪,计算回收率,试验结果表明,平均回收率为99.80%,RSD%为2.03%(n=6),符合定量测定要求。

2.6 样品测定

取5批中试样品,按上述方法测定其靛玉红的含量,测定结果见表1。

3 结论

采用高效液相色谱法测定复方瓜子金合剂中靛玉红的含量,方法可靠、简便、准确、灵敏、重现性好,回收率等均符合要求,可作为该制剂的质量控制方法。

[1]复方瓜子金颗粒质量标准WS3-B-2749-97,国家药品标准中药成方制剂第14册,国家食品药品监督管理局.

[2]中华人民共和国药典,2010年版一部,国家药典委员会,北京:化学工业出版社.

[3]苗明三,李振国主编.《现代实用中药质量控制技术》·北京:人民卫生出版社,2000.