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(吉林农业大学中药材学院,吉林 长春 130118)
人参(RadixetRhizomaGinseng)、西洋参(RadixPanacisQuinquefolii)和三七(RadixetRhizomaNotoginseng)为五加科人参属植物人参、西洋参和三七的干燥根或根茎。其活性成分虽相似,但确有着不同的性味和功能主治。中医认为人参性微温,西洋参性凉,二者多被用作扶正固本的“气分药”,其次才是“血分药”,而三七性温,多用作“血分药”,有散瘀止血和消肿定痛的功效[1]。
有研究表明,人参总皂苷表现出较强的抑制血小板活性,三七次之,西洋参最差,抗血栓活性顺序为三七、人参和西洋参。并且人参皂苷Rg1表现出强烈的抗血小板活性,甚至超过传统抗血小板药物阿司匹林[2]。三七中含有大量的人参皂苷Rg1,西洋参含量最少。并且Rg2等多种皂苷也表现出了一定的抗血小板活性[3]。人参、西洋参和三七的Rg1和Rg2含量[4]如表1所示。
表1 人参、西洋参和三七的Rg1和Rg2含量
血小板参与了全血的凝血过程和血栓的形成,血浆内的各种凝血因子也参与了整个过程[5]。因此,本实验测定了人参、西洋参和三七水总提物和人参皂苷Rg1和Rg2对血浆APTT、PT和TT的影响。
1.1 材料 实验用药材人参、西洋参和三七由吉林农业大学中药材学院提供,经李长田副教授鉴定。全血和0.109 mol/L的枸橼酸钠按9∶1的比例混匀,3 000 r/min离心处理10 min,上清即为乏血小板血浆(PPP)。凝血指标检测单位为吉林大学中日联谊医院血液室,凝血仪型号为BECKMAN ACL 9000。
1.2 方法
1.2.1 人参、西洋参和三七水提物的制备 分别取10 g人参、西洋参和三七粉末,加入10倍蒸馏水煎煮30 min,离心取上清液,药渣重复煎煮2次,合并提取液并将其浓缩至浸膏。按1、0.5 mg/mL分别配置上述提取物的水溶液。
1.2.2 人参皂苷Rg1和Rg2的制备 人参皂苷Rg1和Rg2由本实验室制备,并经检测纯度超过98%。按1、0.5 mg/mL分别配置Rg1和Rg2的DMSO溶液。
1.2.3 人参、西洋参和三七水总提物及人参皂苷Rg1和Rg2抗凝血活性的测定 样品组共分5组:1 mg/mL人参、西洋参和三七水提物溶液;0.5 mg/mL人参、西洋参和三七水提物溶液;1 mg/mL Rg1和Rg2 DMSO溶液;0.5 mg/mL Rg1和Rg2 DMSO溶液;水和DMSO。健康志愿者25例,分为5组,每组分别测定含有上述组别组分的抗凝血活性。每人取全血3 mL,制备成乏血小板血浆。0.45 mL血浆和0.05 mL相应提取物溶液混匀,30 min内测定含有提取物血浆APTT、PT、TT值[6]。
含人参、西洋参和三七水总提物有提取物血浆的APTT、PT、TT值如表1所示。含有不同浓度人参、西洋参和三七水总提物血浆的APTT、PT值均为人参水提物>三七水提物>西洋参水提物,且含量0.05 mg/mL值高于0.1 mg/mL,0.1 mg/mL的APTT值低于空白对照。提取物浓度0.05 mg/mL时,含提取物血浆的TT值为人参水提物>三七水提物≈西洋参水提物;提取物浓度0.1 mg/mL时,含提取物血浆的TT值为人参水提物<三七水提物≈西洋参水提物。含0.1 mg/mL人参水提物血浆的TT值低于0.05 mg/mL的值,西洋参和三七相反。
含人参皂苷Rg1和Rg2血浆的APTT、PT、TT值如表2所示。含有不同浓度人参皂苷Rg1和Rg2血浆的APTT、PT值均为Rg2>Rg1,且含量0.05 mg/mL的值高于0.1 mg/mL。浓度为0.05 mg/mL时,含人参皂苷Rg1和Rg2血浆的TT值为Rg2>Rg1;浓度0.1 mg/mL时,Rg2 表2 人参、西洋参和三七水提物抗凝血活性 表3 人参皂苷Rg1和Rg2抗凝血活性 人参、三七均表现出较强的抗血小板活性和抗血栓活性,西洋参最弱,并且在3项凝血指标的测定中发现,除提取物终浓度为0.1 mg/mL血浆的TT值西洋参最大外,其它含同浓度提取物血浆的APTT、PT和TT均为西洋参最短。另外,人参皂苷Rg1和Rg23项指标中均表现出较强的抗凝血活性。三七在3项凝血指标的测定中,表现出较强的抗凝血活性,虽然多项指标次于人参,但三七中2种单体皂苷特别是Rg1的含量最高,加之Rg1表现出强烈的抗血小板和抗血栓活性,甚至超过了阿司匹林,因此通常被用于“血分药”。西洋参表现出的抗凝血活性最弱,Rg1的含量也最少。人参2种皂苷的含量远不及三七,但在抗血小板和3项凝血指标测试中,人参多表现出了最强的活性[8-9]。因此,虽然人参和西洋参同被用作扶正固本的“气分药”,但在用药方式和适用范围上也不完全相同,西洋参比人参更宽泛,且较少出现不良反应[10]。 在3项凝血指标的测试中含人参、西洋参和三七水总提物和人参皂苷Rg1和Rg2血浆的APTT和PT值均为终浓度0.05 mg/mL高于0.1 mg/mL,而含人参水提物和Rg2血浆的TT值为终浓度0.05 mg/mL低于0.1 mg/mL。这是由于3种药材中人参的Rg2含量是最低的,因此,Rg2的这种性质对人参TT值影响更小。 由于本实验为体外实验,笔者认为,仅通过体外实验判定某种物质的药理活性是不全面的。关于人参、西洋参和三七的体内抗凝血活性还有待进一步研究。 [1]李萍.生药学[M].北京:中国医药科技出版社,2005:296. [2]武源,郭宏宝,王铁军,等.几种中药组分对家兔体外血小板聚集作用的比较[J].中国临床药理学与治疗学,2007,12(9):1047-1051. [3]田建明,宋丽晶,李浩,等.人参皂苷Rg2对大鼠体内血栓形成及血小板聚集的影响[J].上海中医药杂志,2009,43(11):79-81. [4]张崇喜.人参、西洋参和三七化学成分的研究[D].吉林农业大学博士论文,2004:40-109. [5]王鸿利.出血、凝血与止血(1)——正常止血、凝血和纤溶机制[J].外科理论与实践,2000,5(1):1-7. [6]吴俊玲,宋小莉.中药单味药及有效成分对血液系统药理学实验研究[J].长春中医药大学学报,2010,26(3):443-444. [7]白篧,徐华建,李胜发,等.凝血3项生物参考区间验证的实验探讨[J].重庆医学,2009,38(19):2426-2427. [8]龙奉玺,蒋力生.喻嘉言《寓意草》辨证应用人参之探讨[J].吉林中医药,2008,28(10):773-774. [9]何红晖.人参虽补也需慎用[J].长春中医药大学学报,2009,25(1):33. [10]庄文选,孙莉华,蒋晓琴.人参与西洋参的临床应用比较[J].时珍国医国药,2003,14(8):486-487.3 讨论