肿瘤标志物在卵巢癌早期诊断中的应用进展

王丹丹 综述 李燕华 审校

卵巢癌(ovarian carcinoma)是女性生殖道常见的恶性肿瘤之一，尽管其发病率在女性生殖系统肿瘤中居第3位，死亡率却居第1位［1］。不同期别卵巢癌预后差异很大，早期卵巢癌患者通过手术和化疗其5年生存率可在90%以上，但目前能在早期获得诊断的患者不足25%。因此，早期诊断对提高卵巢癌患者生存率尤为重要。CA125是目前公认的卵巢癌术前诊断、疗效观察、术后复发和预后评估最具价值的观测指标，但CA125的合成受许多因素影响，如子宫内膜异位症，盆腔炎症等均可见CA125不同程度地升高，有研究发现40% ～50%的Ⅰ～Ⅱ期卵巢癌患者的血清CA125检测值并不升高［2］，所以将CA125作为卵巢癌早期诊断唯一的指标仍有一定的局限性。近年来随着对卵巢癌发病机制的深入研究，多种过度表达的蛋白及其受体在卵巢癌发生发展中的作用受到重视，并作为用于卵巢癌诊断的肿瘤标志物。本文就目前最新的如人附睾蛋白-4(HE4)等标志物在卵巢癌中的诊断应用进展作一综述。

1 HE4与卵巢癌

人附睾蛋白4(HE4，又名WFDC2)基因的cDNA最早由Kirchhoff等［3］首先从附睾的上皮远端分离出来，是1种可能与精子成熟度有关的蛋白酶抑制剂，但至今未能证实它具有蛋白抑制功能。目前已有大量实验表明HE4在卵巢癌早期诊断中的价值明显优于CA125。Drapkin等［4］用免疫组织化学方法描述了HE4在不同组织类型卵巢癌中的表达，发现HE4在93%的卵巢浆液性癌、50%的卵巢透明细胞癌及100%卵巢子宫内膜样癌中高表达，而在卵巢黏液性癌及正常卵巢组织中不表达。Moore等［5］研究表明，就单一标志物而言，HE4用于诊断卵巢癌的敏感性高达72.9%、特异性达95%，而CA125的敏感性为27% ～66%，特异性为75.2%。就联合检测物而言，CA125联合HE4的检测敏感性达76.4%、特异性95%，明显高于单项检测HE4或CA125的敏感度。在此基础上进一步研究了CA125再联合其他标志物检测，其敏感性并无明显变化。对于Ⅰ期病变，HE4为最佳的单一标志物，联合检测CA125或其他标志物不能增加其敏感性。Montaqnana等［6］研究显示卵巢癌患者血清CA125和HE4水平明显高于正常人、卵巢良性肿块、宫颈癌及子宫内膜肿瘤患者，且血清HE4的敏感性和特异性高于CA125。Huhtinen等［7］研究显示联合检测 HE4和 CA125血清浓度可增加卵巢癌的诊断准确率，并可从卵巢子宫内膜异位囊肿中鉴别卵巢癌。Abdel-Azeez等［8］研究显示血清HE4为单独检测早期卵巢癌最敏感的肿瘤标记物(早期检出率为76.9%)。Kim等研究显示［9］联合检测附件肿块患者血清HE4和CA125水平可成功地将可能发展为卵巢癌的高风险组和低风险组患者区分开(敏感性 87.5%，特异性 93.8%)。然而 Montagnana等［10］研究显示HE4联合CA125对于评估盆腔肿块发展为卵巢癌的风险并不优于单独检测血清HE4。还有研究显示［11］，在复发的卵巢癌患者中，CA125检测的敏感度为96%，HE4的敏感度为100%，其中52%(14/27)的患者血清HE4水平上升比血清CA125的上升提前6～69周出现。Lamy等［12］研究也表明，在复发的卵巢癌患者中血清HE4比血清CA125提前5～8个月出现异常表达，HE4可作为很好的预测卵巢癌复发的指标。综上所述，HE4作为新的卵巢癌早期诊断标志物具有较高的敏感性和特异性。

2 OPN与卵巢癌

骨桥蛋白(Osteopontin，OPN)是1种磷酸化糖蛋白，基因定位于人染色体4q21-25，由7个外显子和6个内含子构成，分子量为41～75 KD，OPN参与细胞外基质的形成，是1种可分泌细胞因子［13，14］。OPN蛋白有8个α螺旋和6个β折叠的二级结构，其中含有特异性的精氨酸-甘氨酸-天冬氨酸序列(简称RGD序列)。近年来，较多的研究发现OPN与卵巢癌侵袭、转移密切相关。Kim等［15］利用ELISA法对107例健康妇女、46例良性卵巢疾病、47例其他妇科癌症患者以及51例上皮性卵巢癌患者进行血清OPN检测，发现51例卵巢癌患者术前血清OPN水平显著高于其他3组患者。同时还发现，在浆液性、黏液性、透明细胞性和内膜样卵巢癌患者血清中OPN的表达无显著性差异。Meinhold Heerlein等［16］用酶联免疫吸附试验(ELISA)发现卵巢癌患者血清中OPN的表达明显增强，并可作为卵巢癌早期诊断及病情监测及评价预后的生物标志物之一。尚有研究指出，血浆OPN升高可提示卵巢癌复发［17］。Ye等［18］发现早期卵巢癌患者尿液中OPN片段增加，与修饰型嗜酸细胞源性神经毒素结合后具有93%的检出率和72%的敏感性，可用于早期卵巢癌的非侵袭性筛查。Visintin等［19］通过ELISA分析评估362例健康妇女、156例新诊断的卵巢癌患者血清中蛋白表达水平，结果发现OPN与CA125联合应用对卵巢癌的检测敏感性达95.3%，特异性达99.4%，而单独应用 CA125时敏感性仅为84.4%。Bao等［20］应用免疫组化法检测了40例三期卵巢癌患者肿瘤原发灶和转移灶的OPN水平，结果显示其中32例患者卵巢癌转移灶中OPN显著增加，且这些患者预后极差。Matsuura等［21］研究显示卵巢透明细胞癌的癌细胞侵袭能力与OPN的上升或下降有关，因此OPN处于正常水平对卵巢透明细胞癌的治疗至关重要。Zhang等［22］研究显示OPN在卵巢癌中的表达显著高于卵巢交界性肿瘤和良性肿瘤(P＜0.05)，OPN在低分化卵巢癌中的阳性率明显高于中、高度分化的卵巢癌(P＜0.05)，OPN的阳性率与淋巴结转移率高(P＜0.05)有关，但与年龄和病理类型无关。Tilli等［23］研究表明，骨桥蛋白-C的剪接异构体有助于卵巢癌恶化，因此选择性地下调OPN-C可能有助于改变卵巢肿瘤的进展，成为新的治疗卵巢癌的方法。OPN作为卵巢癌转移机制的重要参与者，可能成为与CA125互补的、有前景的、新的卵巢癌生物学标志物。

3 YKL-40与卵巢癌

甲壳质酶蛋白40(YKL-40)是哺乳类动物甲壳酶蛋白家族的一员，最早在非泌乳期牛的乳汁分泌物中发现，YKL-40含383个氨基酸，编码的蛋白序列与糖基水解酶相似［24］，位于染色体1q32，它的结构类似甲壳质酶蛋白，被称为甲壳质酶蛋白40，亦称人软骨糖蛋白-39(HCgp-39)，其生物功能目前还不十分清楚。Johansen等［25］研究证实，YKL-40在肿瘤细胞的增生、分化、生长、侵袭和转移、血管发生、炎症反应以及肿瘤周围细胞外基质的重塑中起重要作用。Dupont等［26］对卵巢癌中YKL-40的研究发现卵巢癌Ⅰ期和Ⅱ期患者中65%血清YKL-40升高，Ⅲ和Ⅳ期患者中74% ～91%血清YKL-40升高，首次复发卵巢癌患者中55%血清YKL-40升高。血清YKL-40水平与肿瘤分期和肿瘤负荷有关，且血清YKL-40≥80 U者预后差，肿瘤复发率为71%，血清YKL-40对于早期卵巢癌诊断的敏感性高于CA125和CA15-3，因此认为血清YKL-40水平可作为检测早期卵巢癌的标志物，并且血清中YKL-40水平升高与早期卵巢癌患者的复发和生存期短相关。Gronlund等［27］研究发现血清YKL-40水平升高增加了卵巢癌二线化疗药物耐药性的风险，从生物学角度说明YKL-40表达增高可能与卵巢癌细胞的增殖和抗凋亡有关。有研究发现，65%的Ⅰ、Ⅱ期卵巢癌患者，74% ～91%的Ⅲ、Ⅳ期卵巢癌患者及55%的首次复发的卵巢癌患者术前血清 YKL-40 水平明显升高［28，29］。彭春杰等［30］研究卵巢上皮性肿瘤组织中YKL-40和CA125的表达时发现YKL-40和CA125表达水平随卵巢浆液性肿瘤恶性程度的增加而表达增高。Yang等［31］应用免疫组化法检测86例卵巢上皮性癌和20例正常卵巢组织标本的YKL-40表达，结果显示YKL-40在正常卵巢组织中呈阴性或低水平表达，在卵巢癌组织中高表达，并且YKL-40的过度表达与卵巢上皮性癌的临床阶段有关，且YKL-40过度表达患者的总生存时间明显低于YKL-40正常表达者。Hogdall等［32］应用免疫组化法检测了181例卵巢交界性肿瘤和473例卵巢上皮性癌患者组织中的YKL-40水平，并用ELISA法检测了19例卵巢交界性肿瘤和76例卵巢上皮性癌患者血清中的YKL-40水平，结果显示卵巢上皮性癌患者组织和血清中YKL-40均高表达，但只有血清中YKL-40可作为卵巢上皮性癌患者的预后指标。Zou等［33］用ELISA法检测了49例卵巢癌患者的YKL-40及CA125水平，结果显示对于卵巢癌的诊断YKL-40的敏感性为92.9%，特异性为94.4%，YKL-40联合 CA125检测时其敏感性提高至98.2%，但特异性下降至81.3%。YKL-40可能不是个独立的卵巢癌预后因素。鉴于血清YKL-40在检测卵巢癌、监测病情、评价手术疗效及评估预后方面的作用，血清YKL-40水平有可能成为早期诊断卵巢癌的1个很好的标志物。

综上所述，肿瘤标志物存在于血液、细胞、组织或体液中，在肿瘤细胞异常表达，是反映肿瘤存在和生长的一类物质(包括蛋白质、激素、酶和多胺等)。在正常组织或良性疾病中不表达或者仅轻微表达，但可在肿瘤患者的血清、组织或体液及排泄物中检测到。肿瘤标志物在肿瘤诊断方面的作用有:①早期检测恶性肿瘤;②用于良、恶性肿瘤的鉴别诊断;③对于治疗后随诊的恶性肿瘤患者，可作为判断肿瘤预后和随诊的指标;④可用于化疗患者的疗效观察。检测HE4，OPN，YKL-40可能是鉴别卵巢良、恶性肿瘤的1种更有效的指标，并且其在早期卵巢癌的诊断中敏感度明显高于CA125，虽然其在晚期卵巢癌诊断中的敏感度与CA125相当，但特异度明显高于后者，弥补了CA125的不足。尽管目前HE4，OPN，YKL-40在卵巢癌中发病机制的研究尚处于早期阶段，但随着更多的研究及临床诊疗的实践，必将进一步证实和拓宽其应用。HE4，OPN，YKL-40都可能成为卵巢癌肿瘤标志物新的方向，在卵巢癌的鉴别、早期诊断、治疗、预后及监测等方面发挥较好的作用。

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