不同方法在纤维支气管镜刷检肺小细胞癌中的诊断价值

江 涛 朱立强 朱玉秋 叶 涛 方先勇

纤维支气管镜刷检及活检因其简便、快捷、经济、实用且准确性高而作为临床上常用的肺部肿瘤检查方法之一。本文通过比较纤维支气管镜刷检传统涂片法、液基细胞法及钳取活检法在诊断肺小细胞癌方面的优劣，探讨提高术前肺小细胞癌的阳性检出率的方法，为临床提供科学可靠的诊断依据。

1 资料和方法

1.1 一般资料

收集2009年1 月～2010 年6 月在本院就诊，经纤维支气管镜刷检传统涂片法、液基细胞法和钳取活检法诊断为重度异型细胞或癌并有组织病理学、影像学等证实的原发性肺小细胞癌208例，其中男性165 例，女性43 例，年龄42～80岁，平均年龄56岁。

1.2 方法

纤维支气管镜检查取活检组织后，在病变部位用细胞刷进行擦拭，如病变位于较小的支气管或因狭窄而致支气管镜无法进入时，采用超视野刷检，即将尼龙刷伸入病变深处刷检，将刷取物轻弹在载玻片上，单方向涂匀，涂片3 张，自然干燥固定后，行台湾Baso刘氏染色；将剩余的刷取物放于液基细胞学保存液中，采用自动制片仪制备液基薄片2～4张，固定于95%乙醇中15～30 min后，行H-E(苏木精-伊红)染色。活检组织标本经福尔马林液固定，石蜡包埋，切片H-E 染色，中性树胶封片，在光学显微镜下进行定性及分型诊断。细胞学诊断与组织学诊断均盲法进行。细胞学诊断分为未见恶性肿瘤细胞、轻度异型细胞、中度异型细胞、重度异型细胞和癌5个级别，以细胞学诊断大于、等于重度异型细胞作为细胞学诊断的阳性阈值。

1.3 统计学方法

采用SPSS 11.0软件进行统计学处理，率的比较采用χ2检验，检验水准α=0.05。

2 结果

传统涂片上，细胞退化明显，只呈现模糊的核的轮廓，钳取活检组织切片上细胞挤压明显，影响正常观察，液基细胞法可完整保留细胞的形态，细胞结构清晰。传统涂片法、液基细胞法、钳取活检法对208例原发性肺小细胞癌检测结果分别为56.7%(118/208)、75.5%(157/208)、72.1%(150/208)，联合液基细胞法和钳取活检法的阳性率为89.4%(186/208)。液基细胞法、钳取活检法的阳性检出率较传统涂片法高(P<0.01)，联合液基细胞法和钳取活检法的阳性检出率明显高于单一方法(P<0.01)。

3 讨论

肺癌在世界范围内的发病率与死亡率仍居首位，其总的5年生存率为13%～15%。临床所见肺癌患者中15%～20%为小细胞肺癌[1]。小细胞肺癌肿瘤细胞倍增时间短，进展快，恶性程度高，以中老年男性多见，中位发病年龄为60 岁。本组病例肺小细胞癌患者中男性165例，占79.32 %，与文献报道基本一致。平均年龄56 岁，略低于文献报道，可能与本病发生年轻化有关。肺小细胞癌多发生于大支气管，常表现为中央型肺癌。纤支镜刷片细胞学具有较高的敏感性，在肺癌的诊断中有重要的应用价值，且优于其他细胞学检查方法[2，3]。它不仅能进行良、恶性的鉴别，更能进一步明确肺癌的类型。文献报道在区分小细胞癌和非小细胞癌上准确性可达98%[4]。

传统涂片细胞法、液基细胞法及钳取活检法检查是在诊断肺小细胞癌中各有一定的优势和劣势。传统涂片细胞法具有操作简单，需用设备少，耗时短等优点。但肺小细胞癌的细胞在风干的玻片上极容易肿胀变形、胞膜破坏、胞质缺失、只呈现出模糊不清的核的轮廓，给明确诊断造成极大的困难，阳性检出率较低。在肺小细胞癌的钳取组织诊断中，细胞大小及核的结构特点是诊断的主要依据，但由于肺小细胞癌在钳取的过程中极易受挤压，因而钳取的活检标本一般都有不同程度的损伤。对于挤压较轻者，根据其镜下特点容易做出诊断；对于挤压严重、细胞结构不清的标本，则需要仔细观察切片，寻找可能残存的少量未受挤压的癌细胞，同时借助免疫组化染色上皮标记(CKpan、EMA) 及神经内分泌标记(CgA、Syn、NSE、CD56) 等进行辅助诊断。液基细胞法检查是近些年来逐渐兴起的细胞学检查方法，其最大的特点就是薄片上的癌细胞均匀平铺分布，一般不会出现挤压重叠的现象，且细胞形态保存完好。癌细胞往往表现为疏松成群，细胞之间的黏合力很低，常随着黏液丝排列成细胞饼状、葡萄串状或条索状，并有较多散在的癌细胞并存，以至于液基细胞法在诊断肺小细胞癌的优势优于其他2种方法。我们通过多年的观察总结出肺小细胞癌在液基薄片上的诊断要点：癌细胞部分成团平铺镶嵌排列，且背景中必定存在单个散在的癌细胞；癌细胞体积较小，仅略大于淋巴细胞；胞质少，或呈裸核样；核形不规则，呈圆形、椭圆形等；核上有“椒盐样”颗粒分布，有时可见核仁。以上的细胞形态学特点以及液基细胞学固有的优势很大地提高了其对肺小细胞癌的阳性检出率。而如果将液基细胞法与组织学相结合，则恰恰能取长补短，互为补充，使阳性检出率得到更大的提升。本组联合取材阳性检出率明显高于单一取材。由此可见，联合液基细胞法和活检组织学方法，可显著提高肺小细胞癌的阳性检出率。

总之，纤支镜刷检液基细胞法在诊断肺小细胞癌中具有一定的优势，若联合活检组织学检查则可提高肺癌的阳性检出率。而对于一些条件比较差的基层医院，直接涂片细胞法仍是重要的检查方法之一，如能及时固定染色，也可为临床提供重要的诊断依据。

[1]Singh S,Parulekar W,Murray N,et al.Influence of sex on toxicity and treatment outcome in small-cell lung cancer〔J〕.J Clin Oncol,2005,23 (4):850.

[2]常正义，卢 冬，罗维贵，等.三种不同细胞学检查方法在肺癌诊断中的临床意义〔J〕.中国现代医学杂志，2007，17(2)：244.

[3]郭会芹，张智慧，曹 箭，等.痰和纤维支气管镜刷片细胞学检查在肺癌诊断中的意义〔J〕.实用癌症杂志，2009，24(1)：57.

[4]李 博.细胞病理学在肺癌诊断中的意义〔J〕.中国肺癌杂志，2009，12( 6):602.