杨小然 王 安 郭志杰
牛磺酸作为机体内的重要营养物质,可促进脂溶性物质消化吸收以及蛋白质、矿物元素等代谢,并作为一种抗氧化剂和膜稳定剂在体内发挥着重要作用[1-2]。近年来,国内外关于饲粮中添加牛磺酸应用于雏鸡的报道[3-5]较多,也有应用于肉雏鸭的报道[6],但在蛋雏鸭上还未见相关报道。本文拟在玉米 -豆粕型饲粮中添加牛磺酸,以探讨牛磺酸对蛋雏鸭生长性能、抗氧化功能及免疫器官发育的影响,确定牛磺酸的适宜添加量,为蛋鸭饲粮的配制提供理论依据,从而更好的指导生产,促进养鸭业的发展。
试验用牛磺酸购自北京惠康源生物科技有限公司,纯度 >96.8%。
选用 1日龄健康、体重相近的金定蛋鸭 240只,初始体重经方差分析无显著差异(P>0.05)。蛋鸭基础饲粮配制选用常规饲料原料,参照 NRC(1998)和台湾畜牧学会标准中产蛋鸭营养需要配制玉米 -豆粕型基础饲粮,其组成及营养水平见表1。
试验采用单因子试验设计,将 240只 1日龄金定蛋雏鸭随机分为 5个组,每个组 6个重复,每个重复 8只鸭。Ⅰ组为对照组,饲喂玉米 -豆粕型基础饲粮;Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ、Ⅴ组为试验组,饲喂在基础饲粮的基础上分别添加 0.05%、0.10%、0.15%、0.20%牛磺酸的试验饲粮。试验鸭饲养于 3层重叠式鸭笼中,要保证鸭舍有良好的通风和光照,自由采食和饮水,按时记录室温、死亡数,每周统计耗料重。试验期4周。
表1 基础饲粮组成及营养水平(风干基础)Table 1 Composition and nutrient levels of basal diet(air-dry basis) %
试验结束时从每个重复中选取健康、接近平均体重的试鸭 1只进行颈静脉采血,3 500 r/min离心 15 min,分离血清分装于 EP管中,-20℃保存备用。采血后将鸭完全放血处死,摘取肝脏(不包括胆囊),保存在 -20℃冰柜中待用;摘取免疫器官(脾脏、胸腺、法氏囊),去除结缔组织和脂肪,称重。
1.5.1 生长性能指标
试验开始时称鸭初重,试验结束前 1天 20:00停料,于第 2天 08:00空腹称重,统计耗料量,计算平均日增重(ADG)、平均日采食量(ADFI)和料重比(F/G)。
1.5.2 血清生化指标
测定血清及肝脏组织中谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)、超氧化物歧化酶(SOD)活性,总抗氧化能力(T-AOC)和丙二醛(MDA)含量,采用考马斯亮蓝法测定组织中蛋白质的含量。以上指标在UV-2401紫外分光光度计上进行测定,方法参照南京建成生物工程研究所的试剂盒说明书进行。
1.5.3 免疫器官指数
免疫器官(胸腺、脾脏、法氏囊)指数(%)=100×免疫器官重量/屠体重。
试验数据采用 SAS 8.1统计软件的一般线性模型(GLM)进行方差分析,并进行 Duncan氏多重比较,统计结果以平均值 ±标准差表示。
由表 2可知,Ⅲ、Ⅳ组的平均日增重显著高于Ⅰ组(对照组)(P<0.05),分别比Ⅰ组提高了37.24%、25.71%,但Ⅲ、Ⅳ组间差异不显著(P>0.05),其余各组与Ⅰ组差异均不显著(P>0.05)。平均日采食量以Ⅰ组最高,但各组间均差异不显著(P>0.05)。Ⅲ组的料重比与Ⅰ、Ⅴ组差异显著(P<0.05),分别比 Ⅰ、Ⅴ组降低了25.50%、13.77%,但与其他各组差异不显著(P>0.05)。
2.2.1 牛磺酸对笼养蛋雏鸭血清和肝脏中GSH-Px、SOD活性的影响
由表 3可知,Ⅳ组血清中 GSH-Px活性与其他各组差异显著(P<0.05),分别比Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅴ组提高了 73.38%、54.96%、38.21%、51.17%,但Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅴ组间差异不显著(P>0.05)。Ⅲ、Ⅳ组肝脏中 GSH-Px的活性显著高于Ⅰ组,分别比Ⅰ组提高了 20.63%、19.60%,但Ⅲ、Ⅳ组间差异不显著(P>0.05)。血清中 SOD活性各组间均差异不显著(P>0.05)。Ⅲ组肝脏中 SOD活性与Ⅰ、Ⅱ、Ⅳ、Ⅴ组间差异显著(P<0.05),分别较Ⅰ、Ⅱ、Ⅳ、Ⅴ组提高了 30.30%、39.28%、21.13%、29.39%。
表2 牛磺酸对笼养蛋雏鸭生长性能的影响Table 2 Effects of taurine on growth performance of caged egg-type ducklings
表3 牛磺酸对笼养蛋雏鸭血清和肝脏中GSH-Px、SOD活性的影响Table 3 Effects of taurine on activities of GSH-Px and SOD in serum and liver of caged egg-type ducklings
2.2.2 牛磺酸对笼养蛋雏鸭血清和肝脏中T-AOC、MDA含量的影响
由表 4可知,血清中 T-AOC以Ⅳ组最高,且与Ⅴ组差异显著(P<0.05),与其他各组均差异不显著(P>0.05);肝脏中 T-AOC以Ⅲ组最高,且与Ⅰ、Ⅱ、Ⅴ组差异显著(P<0.05),分别比Ⅰ、Ⅱ、Ⅴ组提高了 24.25%、16.08%、14.15%。血清中MDA含量以Ⅲ组最低,Ⅰ组最高,但各组间均差异不显著(P>0.05);肝脏中 MDA的含量以Ⅲ组最低,Ⅰ组最高,且Ⅲ组比Ⅰ组降低了 57.85%,差异显著(P<0.05),其余各组间无显著差异(P>0.05)。
表4 牛磺酸对笼养蛋雏鸭血清和肝脏中T-AOC、MDA含量的影响Table 4 Effects of taurine on T-AOC and MDA content in serum and liver of caged egg-type ducklings
由表 5可知,Ⅳ组的胸腺指数与Ⅴ组差异显著(P<0.05),与其他各组均差异不显著(P>0.05)。Ⅲ组的法氏囊指数与Ⅰ、Ⅴ组差异显著(P<0.05),比 Ⅰ、Ⅴ组分别提高了 39.27%、46.53%,但Ⅰ、Ⅴ组间差异不显著(P>0.05)。Ⅲ组的脾脏指数与Ⅰ组差异显著(P<0.05),比Ⅰ组提高了 43.86%,与其他各组均差异不显著(P>0.05)。
表5 牛磺酸对笼养蛋雏鸭免疫器官指数的影响Table 5 Effects of taurine on immune organ indices of caged egg-type ducklings
本试验结果可知,添加牛磺酸组的平均日增重均高于对照组,其中添加 0.10%、0.15%牛磺酸组达到了显著水平,但过高添加反而有降低平均日增重的趋势;添加牛磺酸组的料重比均低于对照组,添加 0.10%牛磺酸组的料重比与对照组差异显著。由此可见,添加适宜水平的牛磺酸可显著提高笼养蛋雏鸭的生长性能,添加量过高、过低均未能显著提高笼养蛋雏鸭的生长性能。牛磺酸提高雏鸭的生长性能的可能原因是:1)牛磺酸以牛磺胆酸的形式促进了动物体内脂肪的消化吸收,提高了其对饲料的利用率,从而促进机体的生长发育;2)外源性牛磺酸的加入使体内牛磺酸合成减少,更多的牛磺酸参与蛋白质合成,间接促进了动物机体的生长发育;3)牛磺酸促进了机体内Fe、Cu、Zn等微量元素的吸收,这些微量元素是体内许多消化酶的重要组成成分或活化因子,间接促进了机体的物质代谢,加快了机体的生长发育。郭鹏飞[6]报道,饲粮中添加 0.10%的牛磺酸可提高肉雏鸭的平均日增重,降低料重比。Ohta等[3]报道,饲粮中添加牛磺酸可促进雏鸡卵黄囊的吸收,提高其早期生长速度。何天培等[4]研究报道,饲粮中添加 0.10%、0.15%的牛磺酸可显著提高雏鸡 1、2周龄体重,降低 2、3周龄料重比,但添加0.05%牛磺酸对雏鸡的增重、料重比无显著影响,这与本试验的研究结果一致。Blair等[5]研究表明,添加 0.025%的牛磺酸能够显著降低雏鸡的料重比,添加 0.05%的牛磺酸可降低肉鸡 3~6周龄的猝死率。刘媛等[7]报道,在日本沼虾饲料中添加 0.4%~0.6%的牛磺酸,其增重率显著增加,特定生长率显著提高。研究结果中添加牛磺酸的量不一致,可能与物种、日龄、饲粮的类型、饲养管理条件等有关。至于牛磺酸的适宜添加量、添加时间及在体内的作用机制还有待于进一步研究。
正常情况下,动物体内的抗氧化能力与产生自由基的能力之间保持着动态平衡,机体的抗氧化能力降低,导致过多的自由基攻击机体的生物膜,引起脂质过氧化产物的增加。体内有 SOD、GSH-Px、T-AOC等活性氧清除因子,它们能共同清除体内的过氧化产物,维持机体氧化和抗氧化的动态平衡。MDA作为脂质过氧化产物的分解产物,测试其含量可反映细胞受损伤的程度。本试验中,添加 0.10%牛磺酸可显著提高蛋雏鸭肝脏中 SOD、GSH-Px活性和 T-AOC,显著降低MDA含量。由此说明,适宜的牛磺酸添加水平具有间接和直接的抗氧化损伤功能。其机制可能是:1)牛磺酸分子中的氨基和氧化剂结合,阻止氧化反应,减少了体内 MDA含量;2)牛磺酸具有直接的膜稳定作用。沈芳兰等[8]报道,在小鼠饲粮中添加牛磺酸,小鼠的抗氧化能力和 DNA修复能力高于对照组。杨春波等[9]研究表明,对缺血性休克家兔再灌注过程中添加牛磺酸,试验组 SOD活性显著升高,MDA含量显著降低,说明牛磺酸具有一定的抗氧化能力。李丽娟等[10]研究表明,在艾维茵肉雏鸡饲粮中添加牛磺酸可提高血清及肝脏中 GSH-Px、SOD活性和 T-AOC,降低 MDA含量,且前期以添加 0.10%~0.15%效果显著,后期以添加 0.10%效果显著。Winiarska等[11]研究表明,牛磺酸可提高兔血清及肝脏中 SOD、GSH-Px活性,进而提高机体的抗氧化能力,但随添加水平的进一步升高抗氧化力降低,这与本试验结果一致。本试验结果表明:血清和肝脏中的T-AOC随牛磺酸添加量的增加先升高后降低,MDA含量则先降低后升高。由此说明,添加适宜水平的牛磺酸可提高蛋雏鸭抗氧化功能,进而促进机体的生长发育。
胸腺、法氏囊是中枢免疫器官,对体液免疫功能的发挥起着重要的作用,脾脏是机体的外周免疫器官,可清除机体衰老死亡的红细胞和血液中的大部分抗原,三者的重量可用来衡量机体的免疫状态。本试验结果表明,添加 0.10%的牛磺酸可显著提高雏鸭法氏囊和脾脏指数,胸腺指数也有所提高,但差异不显著。刘玉芝等[12]研究表明,在艾维茵商品代肉仔鸡饲粮中添加 0.10%的牛磺酸可显著促进 3周龄肉仔鸡腔上囊和脾脏的生长发育,对胸腺也有促生长作用,但效果不显著,这与本试验结果一致。何天培等[4]报道,饲粮中添加 0.10%的牛磺酸,3周龄肉仔鸡法氏囊和脾脏重较对照组有所提高。由此可见,添加适宜水平的牛磺酸对雏鸭免疫器官的发育有一定的促进作用。
饲粮中添加 0.10%~0.15%的牛磺酸可显著改善笼养蛋雏鸭的生长性能,提高机体的抗氧化功能,促进免疫器官的发育。
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