慢性荨麻疹患者血清二胺氧化酶活性和总IgE检测及意义

张 敏 李桂珍 宋蒙蒙 张理涛

慢性荨麻疹（chronic urticaria，CU）是皮肤科的常见病，患者几乎每天均出现风团和瘙痒，病程超过6周。CU病因复杂，发病机制尚不明确，通常认为IgE介导的Ⅰ型变态反应和组胺的释放是其发生的重要原因。血清IgE是一种亲细胞性反应素型抗体，正常人血清中含量比较少且稳定，但在Ⅰ型变态反应中其血清IgE含量明显增高。二胺氧化酶（di⁃amine oxidase，DAO）是一种催化组胺、腐胺等二胺类氧化生成醛的细胞内酶，是组胺等多胺物质的分解代谢酶，在哺乳动物组胺代谢中起着重要作用。本文通过研究慢性荨麻疹患者血清中二胺氧化酶活性的变化及其与病情程度和评分的关系，探讨二胺氧化酶活性改变及血清总IgE水平在慢性荨麻疹中的意义。

1 对象与方法

1.1 研究对象 选取2010年4月—11月于我院皮肤变态反应科的CU患者68例，男36例，女32例，年龄18～60岁，平均（36.82±11.94）岁，病程2个月～10年。纳入标准：（1）病程超过6周。（2）反复起风团，持续时间≤24 h。（3）非异位性体质者。（4）年龄18～60岁。排除标准：（1）有食物、药物等明确过敏原者。（2）有肝、肾等重要器官疾患，有精神神经病史及精神病家族史者。（3）物理性荨麻疹和人工荨麻疹者。（4）干预3 d内使用抗组织胺类、类固醇激素及免疫抑制药物者。另选同期于我院健康体检者54例为健康对照组，男30例，女24例，年龄23～67岁，平均（39.45±9.83）岁，均无慢性过敏性疾病史、精神神经疾病及精神病家族史。2组性别（χ2=0.602）、年龄（t=0.741）差异均无统计学意义（均P＞0.05）。

1.2 二胺氧化酶的测定 参照参考文献[3]，2组受试者均常规取外周静脉血3 mL，离心收集血清500 μL，-70℃保存。血清DAO活性应用分光光度法测定，波长436 nm处分别测定在1、1.5、3 h的DAO活性。DAO标准品、辣根过氧化物酶、邻联茴香胺及戊二胺均购自美国Sigma公司。

1.3 血清总IgE测定 采用酶联免疫吸附法，取所需用量的反应微孔条标记后，加入25 μL的IgE标准品、质控血清和待测标本，加入100 μL磷酸盐缓冲液，充分混匀，室温孵育15 min，用蒸馏水1∶10稀释洗液后，流水冲洗，加入100 μL含抗人IgE单克隆抗体与辣根过氧化酶的结合物，混匀，室温孵育20 min，冲洗，干燥，加入含过氧化氢和色素基质的显色液，避光放置15 min，终止反应30 min内，在450 nm波长读取吸光度（OD）值。

1.4 荨麻疹分级及其活动评分 根据Tedeschi等[1]报道方法，依据其风团大小对慢性荨麻疹进行分级。同时依据2009年EAACI等组织制定的荨麻疹治疗指南，对慢性荨麻疹患者的风团和瘙痒2个主要症状进行荨麻疹活动评分（urticaria activity score，UAS），总分值为0～6分[2]。0分为无团，无瘙痒；一级（1分）1～10个小风团（轻度，直径＜3 cm），瘙痒轻度，不烦躁；二级（2分）10～50个小风团或1～10个大风团（中度，直径≥3 cm），瘙痒中度，尚能忍受；三级（3分）＞50个小风团或＞10个大风团，重度，瘙痒重度，不能忍受。

1.5 统计学方法 采用SPSS 17.0统计软件进行分析。计量资料以±s表示，组间比较采用重复测量资料方差分析或t检验，计数资料组间比较用卡方检验，采用Spearman和Pear⁃son相关性分析，P＜0.05为差异有统计学意义。

2 结果

2.12 组不同时点血清DAO活性的比较 慢性荨麻疹组血清DAO的活性在3个不同的时点均低于健康对照组，且其活性在1、1.5及3 h逐渐升高。2组患者血清DAO活性时间与组间效应差异均有统计学意义（P＜0.01），且分组与时间有交互作用（均P＜0.01），见表1。

2.2 DAO活性与荨麻疹分级及其活动评分的相关性 DAO活性与慢性荨麻疹的轻、中、重度呈正相关（rs=0.254，P＜0.05），与UAS评分无相关性（rs= 0.196，P＞0.05），见表2。

2.3 血清总IgE的测定结果 血清总IgE＜175 IU/mL水平上，慢性荨麻疹组32例（47.06%）和健康对照组的45例（83.33%）差异有统计学意义（χ2=14.933，P＜0.01）。

表1 2组不同时间点血清二胺氧化酶活性的比较（U/mL，±s）

表1 2组不同时间点血清二胺氧化酶活性的比较（U/mL，±s）

F时间=69.715，F组间=30.679，F交互=43.547，均P＜0.01

组别慢性荨麻疹组健康对照组n 68 54 1 h 3.02±2.17 3.14±1.96 1.5 h 3.36±1.94 6.30±2.34 3 h 3.37±1.70 5.54±1.82

表2 68例慢性荨麻疹分级、活动评分与DAO范围

2.4 血清总IgE与荨麻疹分级 血清总IgE＜175 IU/mL时，其与慢性荨麻疹的轻、中、重度分级无相关性（rs=0.125，P＞0.05），血清总IgE≥175 mIU/L时，其与病情分级呈正相关（rs=0.539，P＜0.05），见表3。

表3 68例慢性荨麻疹分级与血清总IgE水平（IU/mL，±s）

表3 68例慢性荨麻疹分级与血清总IgE水平（IU/mL，±s）

荨麻疹分级轻度中度重度n 15 36 17总IgE＜175 IU/mL 159.32±34.87 155.61±27.30 160.12±18.21总IgE≥175 IU/mL 199.23±23.03 230.47±30.39 302.15±29.86

2.5 血清总IgE与DAO的相关性 血清总IgE（201.63±35.09）IU/mL与DAO活性（3.46±1.84）U/ mL无相关性（r=0.183，P＞0.05）。

3 讨论

有研究认为，慢性荨麻疹速发相反应与组胺释放密切相关[4]。哺乳动物体内组胺的分解代谢主要有2种途径，一是可以在DAO的作用下氧化脱氨基，二是被组胺-N-甲基转氧酶（HNMT）甲基化，而组胺的定位则决定了其分解的方式[5]。DAO亦称组胺酶，是组胺在体内分解代谢的主要酶，也是具有高度活性的细胞内酶。正常状态下其存在于哺乳动物小肠黏膜绒毛上层，肾和胎盘组织高度表达，而在大多数组织中DAO的活性仅仅达到检测极限[6]。近年来，有研究认为组胺不耐受，产生的原因是由于组胺累积和组胺降解能力的不平衡所引起，最终导致组胺在体内过量，引起腹泻、哮喘、荨麻疹等临床症状[7]。

本研究表明患者的血清DAO活性在1、1.5及3 h均低于健康对照组，且2组在时间与组间比较均有统计学意义，表明在患者体内DAO活性与健康人存在差异，这与Lessof等[8]研究相近。考虑原因为其活性较低，导致体内的组胺不能有效地分解代谢，在体内蓄积，从而产生相应的临床症状，导致了荨麻疹的发生或迁延。进一步分析表明，DAO活性与其病情的轻、中、重度存在一定的相关性，表明DAO在病情的发展阶段可能起到了一定的作用。新近研究亦表明，一些药物和食物可以影响DAO活性，进而影响到组胺的代谢，起到加重或诱发荨麻疹的作用[7]。本项研究未发现UAS与DAO有相关性，可能与笔者采用的是瞬间评分法有关。有研究认为，对于UAS的测定应该为期1周，其值相加为最后的结果[9]，而本研究由于受患者随访所限，没有对其进行加权处理，尚有待进一步研究深化。

血清IgE作为介导Ⅰ型变态反应的主要抗体，在变态反应疾病中起关键作用，患者血清IgE含量的变化与患者体内发生荨麻疹的严重程度和持续时间有关[10]。本研究结果显示，当血清总IgE≥175 IU/ mL时，其与慢性荨麻疹的轻、中、重度成正相关，但血清总IgE与DAO之间未发现存在相关性，表明两者虽对荨麻疹的发生、发展起到一定的作用，但彼此间并无必然的联系。

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