桑皮素的降血糖作用实验研究

金晓明 魏 云

(1.湖南中医药大学,湖南 长沙 410208;

2.湖南医药工业研究所,湖南 长沙 410014)

桑皮素为湖南普生制药有限公司开发的中药新药,用于糖尿病的治疗,现对其主要药效学进行研究,探讨其对正常动物及II型糖尿病模型动物的影响。

1 试验材料

1.1 动物

昆明种小鼠,由鲁抗医药集团动物中心提供,合格证号：鲁动质字200008001;Wistar大鼠,山东大学动物中心提供,合格证号：鲁动质字20001003。NOD小鼠,雌性,7月龄,北京大学医学部实验动物科学部提供,许可证编号：SCXK(京)2002-0001。实验动物环境设施合格证号：鲁动环字200001012号。

1.2 药品和试剂

桑皮素,由湖南普生制药有限公司提供;拜唐苹,由拜耳医药保健有限公司生产,生产批号：102241;格列齐特片,批号：021204,山东省医药工业研究所制药厂生产;血糖试剂盒,中生北控生物科技股份有限公司生产,生产批号：240181;氯化钠注射液,济南三九益民制药有限责任公司生产,生产批号：2002021007-01-01;链脲霉素(streptoxicin),Sigma公司,日本制药株式公社分装。

1.3 仪器

离心沉淀机,LXJ-Ⅱ型,上海第二分析仪器厂产;lab-star全自动生化分析仪,南京桃源医疗器械开发公司产。

1.4 药物配制

所用药物均用氯化钠注射液配成所需浓度。

1.5 饲料

基础饲料,由山东大学实验动物中心提供;高热量饲料由基础鼠料加蔗糖、炼猪油和鸡蛋充分混匀后,用搅肉机成形、烤熟后用。

2 试验方法与结果

2.1 桑皮素对正常小鼠血糖的影响

选取体重19～22g的健康昆明种小鼠60只,雌雄各半,按体重随机分成6组：对照组,格列齐特组(80mg/kg),拜唐苹组(25mg/kg),桑皮素 50.0、25.0、12.5m g/kg组,每组10只。格列齐特组动物在测血糖前2d开始给药,每日1次,共3次。其他组分别灌胃给予N.S、拜唐苹和桑皮素连续14d。各组动物给药容积均为0.2m l/10g。末次药后1h由小鼠眼球取血,测空腹血糖值,试验结果见表1。

表1 桑皮素对正常小鼠血糖(mmo1/L)的影响(±s)

注：**：与生理盐水对照组比较,P＜0.01。

组别 剂量(mg/kg)动物数 空腹血糖值对照组 / 10 6.48±1.02 50.0 10 6.14±0.73 25.0 10 6.56±0.98 12.5 10 6.59±0.73拜唐苹 25.0 10 6.42±0.84格列齐特 80.0 10 4.73±0.72**桑皮素

由表1可见桑皮素12.5、25.0、50.0mg/kg连续灌胃给药14d,小鼠血糖有一定的降低趋势,但与对照组比较无显著性差异。阳性对照药拜唐苹对正常小鼠血糖也无明显影响。格列齐特80.0mg/kg给药后,可见小鼠血糖明显下降,与对照组比较有极显著性差异。

2.2 桑皮素对NOD小鼠的治疗作用

取NOD雌性小鼠50只,按体重随机分为5组,每组10只,分别为模型对照组、桑皮素高、中、低剂量组及阳性药组(拜唐苹)。分别灌胃给予N.S,拜唐苹 25mg/kg,桑皮素50.0 、25.0、12.5mg/kg,给药容积为0.2m l/10g,连续14d后由眼球取血,测小鼠的空腹血糖值,结果见表2。

表2 桑皮素对NOD小鼠血糖(mm ol/L)和胰岛素的影响±s)

表2 桑皮素对NOD小鼠血糖(mm ol/L)和胰岛素的影响±s)

注：*：与生理盐水对照组比较,P＜0.05;**：与生理盐水对照组比较,P＜0.01;胰岛素测试动物数中剂量为7,拜唐苹组为9。

组别剂量(mg/kg) 动物数 空腹血糖值 胰岛素(mμ/L)对照组 9 18.88±4.65 4.48±2.13桑皮素50.0 10 11.46±3.04**9.14±3.09**25.0 8 11.43±2.75**10.04±3.21**12.5 9 14.11±3.59* 5.54±2.94拜唐苹 25.0 10 13.47±3.24**6.39±1.85*

由表2可见,桑皮素连续灌胃给药14d,对NOD小鼠血糖有明显的降低作用,25.0、50.0mg/kg组与对照组比较有极显著性差异,12.5mg/kg组与对照组比较有显著性差异。同时,对NOD小鼠的低胰岛素状态有一定的改善作用,25.0、50.0mg/kg组胰岛素水平明显升高,与对照组比较有极显著性差异。

2.3 桑皮素对II型糖尿病大鼠的治疗作用

取健康 W istar大鼠,雌雄各半,体重 250～300g,取10只作为正常对照组;其余动物禁食12h(不禁水),腹腔内注射链脲霉素30mg/kg(0.1m ol/L柠檬酸pH 4.2配制成1%溶液,注射时冰浴),连续3d,末次注射14d后将大鼠禁食12h(不禁水),剪尾采血测定血糖,取血糖值高于11.1mmo l/L的大鼠,饲以高热量饲料,正常组动物给予基础饲料。给予链脲霉素和高热量饲料后,糖尿病造模组动物血糖、胰岛素和糖化血红蛋白均显著增高,形成了II型糖尿病模型。

8周后造模动物剪尾取血,按血糖值平均分为以下5组：模型对照组,桑皮素高、中、低剂量组及阳性药组(拜唐苹),每组10只。分组后,全部给予正常饲料并给药,连续4周。正常组及模型组灌胃给予N.S,桑皮素高、中、低剂量分别灌胃给予 30.0、15.0、7.5m g/kg,拜唐苹组剂量为15.0mg/kg,各组给药容量均为10m l/kg,每日1次。

给予桑皮素前,各剂量组血糖值和模型组比较无显著性差异。连续给药4周,桑皮素各剂量组血糖浓度明显降低,15.0、30.0mg/kg组与模型组比较有极显著性差异,7.5mg/kg组与对照组比较有显著性差异。拜唐苹15.0mg/kg ig给药有降低血糖浓度的作用,与对照组比较有极显著性差异。桑皮素给药后对高胰岛素血症有抑制作用,30.0mg/kg胰岛素浓度与对照组比较有显著性差异。桑皮素对糖化血红蛋白的升高也有明显的拮抗作用,15.0、30.0 m g/kg组与对照组比较有显著性差异。拜唐苹15.0 m g/kg ig给药有一定的降低胰岛素水平的趋势,但与对照组比较无显著性差异,对糖化血红蛋白的升高有明显的抑制作用,与对照组比较有极显著性差异。结果见表3。

表3 桑皮素对糖尿病大鼠血糖、胰岛素及糖化血红蛋白的影响(±s)

表3 桑皮素对糖尿病大鼠血糖、胰岛素及糖化血红蛋白的影响(±s)

注：△△：与生理盐水对照组比较,P＜0.01;**：与模型组比较 P＜0.01;30.0mg/kg组胰岛素数据为9。

组别 剂量(mg/kg)动物数血糖(mmol/L)药前值 药后值胰岛素(mμ/L) 糖化血红蛋白(%)对照组 / 10 6.26±0.84 6.30±1.10 26.81±13.43 3.12±0.91模型组 / 9 16.84±4.41△△ 19.32±4.04△△ 74.43±13.13△△ 8.44±0.53△△桑皮素30.0 10 16.51±3.92△△ 10.58±2.36**△△ 59.04±15.71*△△ 6.55±0.53**△△15.0 10 16.47±3.44△△ 12.03±1.98**△△ 66.44±10.88△△ 6.46±0.45**△△7.5 9 16.83±4.74△△ 15.42±2.30*△△ 72.24±9.59△△ 7.90±0.45△△拜唐苹 15.0 10 16.35±5.84△△ 12.26±2.75**△△ 62.53±16.25△△ 6.48±0.71**△△

3 试验小结

本试验观察了桑皮素对正常小鼠血糖、NOD小鼠血糖和胰岛素,II型糖尿病模型大鼠血糖、胰岛素、糖化血红蛋白和糖耐量的影响。试验结果表明：(1)桑皮素 50.0、25.0、12.5mg/kg连续灌胃给药14d,对正常小鼠血糖无明显影响。(2)桑皮素12.5、25.0、50.0mg/kg连续灌胃给药 14d,对 NOD小鼠血糖有明显的降低作用,同时可显著升高动物胰岛素水平。(3)桑皮素30.0、15.0、7.5m g/kg连续灌胃给药14d,对链脲霉素加高热饲料导致的II糖尿病大鼠有明显的治疗作用,15.0、30mg/kg组动物血糖浓度、胰岛素和糖化血红蛋白均降低,与模型组比有显著性或极显著性差异。同时,桑皮素 30.0、15.0、7.5mg/kg可明显改善糖尿病动物的糖耐量。

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