犬／流／感

孙莎莎，张素荣，马婧姣，游程皓，李泽盛，王贵强，庞海东，刘金华，林德贵

（1.中国农业大学动物医学院，北京 海淀 100193；2.北京市顺义区仁和兽医卫生防疫站，北京 顺义 101300）

早在20世纪70年代，Nikitin A等人通过动物试验证明犬可以感染人H3N2流感病毒，并且在犬血清内检测到相应的抗体［1］。之后Romvary J Kilbourne E D Onta T等人也证明了犬可以感染流感病毒，但是一直未从自然发病犬体内分离到流感病毒，或者发现流感病毒在犬群中大量流行［2-7］。近10年，关于甲型流感病毒（influenza A virus）感染犬猫的报道频繁出现，包括H3N8、H5N1、H3N2和H1N1共4种亚型流感病毒。

1 H3N8亚型犬流感病毒

2004年1月，美国福罗里达州的22只灰猎犬（Greyhound）暴发了呼吸道疾病。其中14只表现为中度发烧和咳嗽的呼吸道综合征，而另外8只表现为严重的出血性气管炎、支气管肺炎、胸膜炎和高热伴发脉管炎的症状，其中1只死亡。从死亡病例的肺组织匀浆中分离到了甲型H3N8流感病毒［8］。通过免疫组化方法，在这些犬的肺组织内监测到H3亚型流感病毒的抗体［8］。康复犬血清内可以监测到相应H3N8流感病毒的抗体。接触过患犬的亚临床症状犬中，约有50%的犬体内可以检测到相应的抗体。将分离到的病毒接种健康的犬，可以引起有效的呼吸道感染，在其体内可以分离到病毒，并且在血清中可以检测到相应的抗体，但是犬并没有表现出临床症状。上述论据符合科赫氏法则，证明了H3N8流感病毒能有效的感染犬［8-10］。

在此之后的2004年夏天、2005年上半年和2006年，美国共有17个州报道了赛犬群发呼吸道疾病的情况［9］。美国大范围的血清流行病学调查显示，H3N8流感病毒不仅在赛犬群中流行，而且已经感染到了宠物犬群中。直至2009年6月，美国已经有个30州报道了宠物犬感染H3N8流感病毒的病例［9，11］。

对分离出的H3N8流感病毒的HA基因的进化分析表明，这些病毒非常相似，并且它们都同1990年间弗罗里达州流行的马流感最接近。这种同源性暗示了最初的情况可能是由于接触共同的竞赛场导致的马流感跨越种间屏障感染狗的个例。对分离出的H3N8病毒的8个基因片段进行分析表明，所有的片段均来源于马。对储存的血清进行回顾性研究表明，最早的传播应该发生在1998年至2003年间。对犬H3N8病毒的HA片段和NA片段进行分析表明，HA片段上至少有5处发生了特征性、适应性突变，其中3处宿主特异性功能蛋白在加工处理时发生了变异，这造成该病毒在犬之间的广泛传播。虽然少数分离出的H3N8病毒的HA编码氨基酸序列发生了一些突变，但是没有发现明显的抗原漂移［8，10］。

英国Daly等人，通过血清学、免疫组化和有限的分子学证据证明了H3N8流感病毒在英国犬群中存在，但是并没有像美国那样广泛传播［12］。2002年秋季，英国一个猎狐犬犬舍发生了严重的呼吸道疾病，当时并没有分离到病毒。之后对康复犬的血清进行研究，发现其体内存在马H3N8流感病毒的抗体。有趣的是，这些犬在得病前1周食入生的马肉和马内脏。与美国的情况不同，H3N8病毒在英国并未表现出传播态势，虽然同年另一群猎狐犬的血清抗体检测为阳性，但是并没有发现两者之间有任何联系［12］。

澳大利亚也报道了相似的情况。2007年澳大利亚马流感暴发期间，人们注意到同感染马接触的犬也出现了流感症状，并且在其体内分离到了H3N8流感病毒。对病毒的核酸序列分析表明与马流感相一致。但是并没有发现犬之间的传播或者该病毒持续在犬群中存在［13］。

Deshpande等人的动物试验表明，单独的H3N8流感病毒感染，即可引起严重的呼吸道症状，包括咳嗽、打喷嚏、流鼻涕，但主要的症状还是咳嗽［14］。24只接种病毒的犬，接种1d后即有表现出呼吸道症状的，2d后即有33%的犬出现临床症状，4d内96%的犬表现出症状。接种10～11d时，临床症状达到高峰期，12d后症状开始消失。在接种病毒的第1天，共2只犬出现发烧的症状（≥39.6℃），但只持续了1d，之后一直未发现接种犬出现发烧的症状。接种犬第2～5天在其鼻腔分泌物中可以检测到排毒高峰，但直至10d仍可检测到病毒［14］。

2 H3N2亚型犬流感病毒

2007年5～9月，韩国Kyunggi省的3个动物诊所和Jeolla省的1个犬舍的犬群暴发了严重的呼吸道疾病。从最初3个病例的鼻分泌物中，分离到了H3N2型流感病毒，但是并未分离到犬瘟、副流感病毒和支气管败血型博代氏杆菌。序列分析表明，该病毒所有的8个基因片段，均与禽H3N2流感病毒有最大的相似度。对Jeolla省暴发了流感的犬舍进行血清学调查显示，第1次采样时52只犬中有47只犬（90%）的血清中检测出了H3N2流感病毒的抗体，而第2次检测的血清学抗体阳性率为100%［15］。

Daesub Song等人将分离到的病毒接种于10周龄的比格犬进行动物试验，动物在接种后的2～7 d内均表现出流鼻涕、打喷嚏的临床症状［16］。接种病毒的24h后，所有动物出现高烧的症状（平均温度40.14℃），此症状延续了5d。接种第6天，动物体内可以检测到升高的血清抗体。对感染后的犬进行病理学检查，肉眼可见病变只局限于肺脏，表现为多点或融合的粉红色实质性病变。将接种后第3、6天和第9天采集的组织进行组织病理学检查，可见气管和肺部的病变，肺以外的组织未见病变。组织学检查可见病毒引起的严重的上呼吸道和下呼吸道的炎症和坏死［17］。

2006年5月至2007年9月，中国广东也报道了4只犬感染H3N2流感病毒的病例。分离出的病毒同韩国分离的H3N2病毒有很大的相似度［18］。除了这两个报道外，到2010年底，其他地区未发现H3N2流感病毒感染犬的病例。

3 H5N1亚型流感病毒

2006年，泰国Songserm等人报道了1例犬感染高致病性H5N1流感病毒的病例，这只犬在食用感染H5N1流感病毒死鸡肉之后发病死亡［19］。对泰国首都629只犬的血清进行研究表明，约25%的犬体内含有H5特异性抗体，但是这个结果至今未得到其他证明。为了证明H5N1流感病毒在犬之间的传播，尤其是对人传染的可能性，Giese等人用两种不同的高致病性H5N1禽流感接种试验动物，除了结膜炎和2d的体温升高外，没有其他的临床症状［20］。Maas等人在攻毒犬的鼻腔内分离到了较低滴度的病毒［21］，但是Giese等人没有分离到感染性病毒［20］。所有的攻毒犬均发生了血清转化。同居组的犬并未发现被传染。因此，并不认为犬在传播高致病性H5N1流感病毒中起重要作用［22］。

然而中国农业科学院哈尔滨兽医研究所陈化兰等人2010年却证明了犬可能在传播高致病性H5N1流感病毒中起重要作用［23］。陈化兰等人将12只45日龄的比格犬分为两组，分别通过鼻腔和气管对其接种从野生鸟类中分离出的H5N1禽流感病毒。接种病毒1d后，所有犬均表现出食欲不振，之后出现发烧、结膜炎、咳嗽、呼吸困难等症状，其中一只经气管接种病毒的比格犬在接种后第4天死亡。在接种病毒后2～4d，从鼻腔攻毒组的6只犬的鼻拭子和粪拭子中都分离到了流感病毒。在接种病毒后14d，两组各存活的2只犬的血清中，都可以检测到H5N1流感病毒的抗体。鉴于犬对H5N1禽流感病毒的高度易感性，以及犬和人类的亲密性，因此不排除犬成为H5N1流感病毒传播中介的可能性［23］。

4 H1N1亚型流感病毒

2009年，一种人禽猪三源重排的甲型H1N1流感病毒在全球范围的人群内广泛传播。作为人类最亲密的伴侣动物，中国、美国和日本相继报道了宠物犬感染H1N1流感病毒的病例。2009年10～12月，意大利William等人在964份犬血清中检测出29份H1N1流感抗体阳性血清［24］。但至今为止，尚未有关于此次甲流病毒在犬群之间传播或者犬感染甲流与人之间的关系的报道。

过去，人们一直认为犬不是流感病毒的宿主，但现在越来越多的研究证明犬群中已经存在流感病毒感染。这应该引起兽医工作者的关注，当犬群中群发传染性呼吸道疾病时，应考虑到感染流感病毒的可能性，及时的控制其传播，对公共卫生的安全应予以重视，并进行风险评估。

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