苦参药材质量标准研究

李 毅， 王 飞， 吴 民

(新疆克拉玛依市中心医院，新疆克拉玛依市834000)

药用苦参为豆科植物苦参Sophora flavescens Ait.的干燥根，具有清热燥湿、祛风杀虫、利尿等功效。经药理实验和临床观察证明，其中主要含生物碱成分，同时还含黄酮、醌类等成分。其中苦参碱(matrine)为其有主要有效成分之一，具有抗肿瘤，平喘和抑菌作用;氧化苦参碱具有抗肿瘤，平喘等作用。黄酮类成分具有抗心律失常及抗真菌作用。本试验采用HPLC法对中药苦参进行了高效液相色谱法的测定研究。

1 药材与设备

1.1 药材及材料 苦参药材由沈阳药科大学孙启时教授鉴定为豆科植物苦参Sophora flavescens Ait.的干燥根。苦参碱对照品(供含量测定用)购于中国药品生物制品检定所，批号110805－200306。氧化苦参碱对照品(供含量测定用)购于中国药品生物制品检定所，批号0780－200004。

1.2 色谱条件 色谱柱:Waters XTerraTMRP18(250 mm×4.6 mm，5 μm);流动相:0.02 mol/mL 乙酸-乙腈 (60 ∶40);检测波长:220 nm;流速:1.0 mL/min;柱温:25℃;进样量:20 μL。

1.3 仪器 岛津-2010CHT高效液相色谱仪(日本岛津公司);Lc-solution工作站(日本岛津公司提供);Mettle AE 163电子天平(梅特勒-托利多仪器有限公司)。

1.4 检测波长的选择 参考2005版中国药典中药材“苦参”含量测定项下色谱条件与系统适用性试验:检测波长为220 nm，故选择检测波长为220 nm。

2 样品的制备

2.1 对照品溶液的制备

取苦参碱对照品、氧化苦参碱对照品适量，精密称定，加0.02 mol/mL乙酸-乙腈 (60∶40)溶解，制成每1 mL含0.1 mg的苦参碱溶液，氧化苦参碱1 mg的溶液。

2.2 供试品溶液的制备

取苦参药材，研细，精密称取，置于100 mL量瓶中，加浓氨水2 mL浸润，加二氯甲烷60 mL，超声处理30 min，放冷，滤过，滤液蒸干，残渣加乙醇0.5 mL使溶解，作为供试品溶液。

3 方法学考察

3.1 线性范围的考察

标准曲线的绘制:精密量取苦参碱溶液0.25、1.25、2.50、5.00、7.50 mL 至 10 mL 量瓶加0.02 mol/mL 乙酸-乙腈 (60:40)定容至 10 mL，得浓度 0.002 5、0.012 5、0.025、0.050、0.075 mg/mL浓度的对照品溶液。

精密量取氧化苦参碱溶液0.50、1.25、2.50、5.00 mL至10 mL量瓶加0.02 mol/mL乙酸-乙腈 (60∶40)定容至10 mL，得浓度0.050、0.125、0.250、0.500 mg/mL 浓度的对照品溶液。

结果表明苦参碱在2.5～75 μg/mL范围内，进样量与峰面积呈良好的线性关系 y=1.35e－7x+1.84e－4，r=0.999 9。氧化苦参碱在50～1 000 μg/mL范围内，进样量与峰面积呈良好的线性关系，y=1.43e－7x+1.64e－3，r=0.999 9。

3.2 回收率试验 精密称取已知含量样品9份，分别精密加入适量氧化苦参碱对照品，按供试品溶液制备方法处理，依次测定，计算回收率，苦参碱平均回收率99.1%，RSD为4.7%，氧化苦参碱平均回收率99.9%，RSD为2.1%。

3.3 精密度试验 取粉末适量，按供试品溶液的制备方法制得供试溶液1份，在同样色谱条件下，连续进样5针，进样量为20 μL，依次测定，记录峰面积，得苦参碱 RSD为0.65%;氧化苦参碱RSD为0.70%。显示精密度良好。

3.4 重复性试验 取粉末，按供试品溶液的制备方法制得供试溶液6份，在同样色谱条件下进样，进样量为20 μL，依次测定，得苦参碱平均含量为1.455 6 mg/g，RSD为2.80%;氧化苦参碱平均含量为12.235 5 mg/g，RSD为1.33%。

3.5 稳定性试验 取适量，按供试品溶液的制备方法制得供试溶液 1 份，室温下放置，每隔 0、1、2、4、8、16 h;分别进样20 μL，依次测定峰面积，计算相对标准偏差，苦参碱与氧化苦参碱含量总和RSD为1.03%。

4 薄层色谱

苦参药材粉碎，取1 g粉末，加浓氨水2 mL浸润，加二氯甲烷60 mL，超声处理30 min，放冷，滤过，滤液蒸干，残渣加乙醇0.5 mL使溶解，作为供试品溶液。另取槐定碱、苦参碱、氧化苦参碱对照品，分别加乙醇制成每1 mL各含1 mg的溶液作为对照品溶液。照薄层色谱法(中国药典2005版附录ⅥB)试验，吸取上述制备溶液各4 μL，分别点于同一用2%氢氧化钠溶液制备的硅胶G薄层板上，以三氯甲烷-甲醇-水(7∶2∶1)为展开剂，展开，取出，晾干，喷以稀碘化铋钾试液。供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点。

5 结论

该方法简便易行，结果准确可靠，可适用苦参药材的质量控制。

［1］中国药典［S］.一部.2005.

［2］苗明山，李振国.现代实用中药质量控制技术［M］.北京:人民卫生出版社，2000.

［3］孟宪纡.中成药分析［M］.2版.北京:人民卫生出版社，1998.

［4］李建业.中成药薄层色谱分析［M］.天津:天津科学技术出版社，1991.

［5］董方言.现代实用中药新剂型新技术［M］.北京:人民卫生出版社，2001.