抗肿瘤新星蟾蜍毒素的临床应用及其机制的研究进展

吴纪霞

（安徽省蚌埠市第一人民医院，安徽 蚌埠 233000）

肿瘤一直被誉为不治之症，长期以来，人们谈瘤色变，恶性肿瘤严重威胁人类健康，除传统的化、放疗、手术治疗方法。目前，中药抗肿瘤越来越受到人们的关注。蟾蜍毒素就是其中之一。很多研究发现其具有抗肿瘤功效，早已被广泛应用于临床。近来随着药理作用和临床应用的深入研究，发现蟾蜍毒素抗肿瘤作用显著，并且对抗肿瘤的机制也有了初步的了解，现已有多种蟾蜍毒素抗肿瘤制剂如华蟾素、蟾蜍灵，现对蟾蜍毒素抗肿瘤的作用和最新研究进展作一综述。

1 蟾蜍毒素的抗肿瘤作用的临床研究

近几年来，很多关于蟾蜍毒素治疗中晚期患者出现奇效的报道，随之临床研究也越来越多。临床观察，含有蟾蜍毒素成分的中药复合制剂可以治疗肝癌、肺癌、食管癌、直肠癌及白血病等。大量临床和实验研究证明，蟾蜍毒素具有临床抗肿瘤作用，不良反应少，效果明显，可改变患者一般状况，提高生活质量；与化疗合用，可减轻患者症状，并且可减轻化疗后不良反应；与放疗合用可增加放疗敏感性，减轻放疗的副作用。陈静[1]等最新研究报道华蟾素治疗老年性恶性肿瘤观察可明显提高患者生活质量，延长生存期。苏劲[2]等报道华蟾素有抗膀胱肿瘤的作用。肖家全[3]等也报道了华蟾素抗膀胱肿瘤的作用。朱琳[4]等研究华蟾素治疗中晚期肺癌肺癌与化疗比较可提高患者生活质量，延长生存期，副作用小等优点。周道安[5]等研究发现放射治疗联合华蟾素治疗食道癌效果优于纯放疗组，减少副作用。孙中杰[6]等报道华蟾素配合TACE治疗肝癌能提高疗效，改善机体免疫力。卢香兰[7]等研究蟾蜍毒素混合物对白血病K5 62敏感株和耐柔红霉素株细胞的杀伤作用。赵明芳等[8]研究高、中剂量的蟾蜍毒素可以明显延长艾氏腹水癌小鼠的生存时间。此外，还有华蟾素治疗老年性皮肤原位癌、喉癌、乳腺癌、子宫癌等报道。华蟾素的研究越来越深入，应用越来越广泛。

2 蟾蜍毒素抗肿瘤作用的机制

蟾蜍毒素多种途径抑制肿瘤细胞的增值和生长，主要包括以下几个方面：

2.1 直接作用于肿瘤细胞的DNA和RNA的合成

DNA是主要的遗传物质，RNA是遗传物质的载体，在RNA病毒中，RNA是遗传物质，正常机体含量稳定，当二者含量增多，异常表达时，导致细胞恶化。很多肿瘤化疗药物的作用靶点是作用于DNA化学结构、影响DNA转录或抑制DNA依赖RNA聚合酶而抑制RNA合成、或影响核酸合成。蟾蜍毒素的研究过程中，学者们发现蟾蜍毒素可抑制肿瘤细胞DNA 和RNA的合成而抑制肿瘤。陈华等[9]研究发现华蟾素注射液可下调TOPOⅠmRNA表达，表现浓度依赖效应。关均等[10]用华蟾素注射液给H22腹水型肝癌细胞小鼠注射研究发现华蟾素能明显抑制其DNA和RNA的生物合成。田普训等[11]研究发现，随蟾酥脂质体治疗剂量的增高，使DNA 合成减少。

2.2 诱导肿瘤细胞凋亡机制

细胞调亡是由体内外某些因素触发细胞内预存的死亡程序而导致的细胞主动性死亡过程。该过程的正常与紊乱与机体进行新陈代谢、保持自身相对稳定以及肿瘤发生等密切相关，而很多肿瘤细胞正是因为凋亡机制被抑制才是肿瘤细胞生长旺盛，失去控制，很多肿瘤药物是通过促细胞凋亡达到抑制肿瘤的作用。近年来很多的研究结果表明诱导细胞凋亡是蟾蜍毒素抗肿瘤的主要机制，而且是目前研究蟾蜍制剂抗肿瘤的热点课题。据研究，蟾蜍毒素能诱导多种肿瘤细胞凋亡。王锴[12]等最新研究表明蟾蜍毒素可通过依赖caspasc-3诱导胃癌细胞凋亡。苏劲等[2]研究华蟾素对原位膀胱癌和肖家全等[3]研究华蟾素对膀胱癌治疗的机制是一致的，都是诱导肿瘤细胞的凋亡而发挥抗肿瘤的作用。丁海玲等[13]研究发现蟾蜍混合物可以诱导肝癌细胞SMMC7721细胞凋亡。。周晓红等[14]研究显示华蟾素能通过诱导HEC-1-B细胞凋亡，从而抑制HEC-1-B细胞生长，并且降低细胞的侵袭能力。王玲玲[15]等研究也得出相同的结论。韩鸿彬[16]等研究显示华蟾素对胃癌细胞具有诱导细胞凋亡的作用，细胞凋亡发生率呈剂量和时间依赖性。王焰等[17]研究华蟾素能抑制NB4生长并诱导凋亡。赵明芳等[8]也研究蟾酥可以诱导HL60、K562、NB4、OVCAR3细胞的凋亡。除此之外，还有很多关于蟾蜍毒素诱导不同肿瘤细胞凋亡的报道，可见诱导肿瘤细胞凋亡是蟾蜍毒素抗肿瘤最主要的机制。

2.3 诱导肿瘤细胞的分化

肿瘤组织在形态和功能上可以表现出与某种正常组织相似之处，这种相似性称为肿瘤的分化，分化程度的高低直接影响肿瘤的恶性程度。有些抗肿瘤药就是通过诱导细胞分化发挥抗肿瘤的作用。很多研究发现蟾蜍毒素据有诱导肿瘤细胞分化的作用。赵明芳等[8]研究显示蟾蜍毒素可增强ATRA对NB4及APL原代培养细胞的诱导分化作用。韩仲明等[18]研究华蟾素对喉癌细胞Hep-2细胞具有诱导分化作用。Yamada等[19]发现蟾毒灵在功能上和形态上均能诱导白血病细胞的分化，并与全反式维甲酸有协调作用。Zhang等[20]报道，蟾蛛灵诱导黑素瘤 B16-F10细胞分化刺激其黑色素的合成和释放。

2.4 抑制肿瘤血管的生成

肿瘤有诱导血管生成的能力。肿瘤血管的形成对肿瘤的生长、浸润、转移至关重要。抑制肿瘤血管生成已经成为治疗肿瘤新途径。Lee等[21]用蟾蜍灵处理牛主动脉内皮细胞（BAE），发现可通过抑制内皮细胞增殖使血管生成受到抑制。王南瑶等[22]研究发现，华蟾素对鸡胚尿囊膜新生血管有抑制作用，用药后新生血管完全抑制或明显减少。刘浩等[23]研究发现华蟾素能减少瘤内血管密度、降低瘤内VEGF表达及血管内皮细胞膜上VEGFR-2蛋白表达，从而抑制肿瘤血管的发生。由此可见，蟾蜍毒素也可以通过抑制肿瘤血管抗肿瘤作用。

2.5 影响癌基因的表达

癌基因能引起动物肿瘤或在体外实验中能使细胞发生恶性转化的基因。张莉等[24]报道华蟾素能使白血病U937细胞bcl-2表达及Fas-1 mRNA水平下降，诱导细胞凋亡。王锴等[12]发现蟾蜍毒素可以下调凋亡蛋白抑制因子livin表达从而抑制胃癌细胞MGC803细胞的生长起到治疗胃癌的作用。王焰等[17]研究报道华蟾素能抑制人早幼粒白血病细胞株NB4生长并诱导凋亡.可能是通过下调Bcl-2的表达.增加Fas的表达来实现。段佩浩等[25]研究发现蟾毒灵通过下调Bcl-2基因的表达抑制人胰腺癌BxPC-3细胞的生长.诱导其凋亡。顾伟等[26]研究报道，蟾毒灵对裸鼠人肝癌原位移植模型有明显的抗肿瘤作用，其作用机制可能与上调Bax表达、诱导细胞凋亡有关。除此之外，还有很多更早的研究也都证明了蟾蜍毒素的此作用。

2.6 影响肿瘤细胞周期调控

细胞从一次分裂结束到下一次分裂结束为止的一个过程称为细胞周期细胞周期的进行受许多基因蛋白的调控，当这种调控异常时，就会出现细胞无限制增长，形成肿瘤。很多抗肿瘤药是细胞周期抑制剂，或通过抑制肿瘤细胞的某个时期起到杀伤肿瘤的作用。很多研究报道，蟾蜍毒素通过抑制肿瘤细胞的不同时期起到治疗肿瘤的作用。殷文瑾等[27]最新报到华蟾素通过调控cyclin A1、cyclin D1、cyclin E1和p21的表达而抑制乳腺癌细胞的增殖和侵袭。殷佩浩等[25]研究发现毒灵显著抑制人胰腺癌BxPC-3细胞的生长.诱导其凋亡，阻滞细胞于G2/M期。吕静等[28]研究显示华蟾素可使膀胱癌细胞株T24阻滞在G0/G1期，抑制细胞生长。王玲玲等[15]研究显示华蟾素能有效地抑制Ishikawa细胞的增殖，降低侵袭能力，诱导细胞调亡，并使细胞周期阻滞于G1期，减少S和G2期的细胞。

2.7 逆转肿瘤细胞的多药耐药

肿瘤化疗是肿瘤三大治疗方法之一，但不幸的是肿瘤常常发生耐药性，特别是复发的肿瘤。可同时对多种肿瘤药发生耐药性，从而限制了肿瘤化疗的作用，逆转耐药性或防止耐药现象发生有重要理论及实际意义。孟晓燕等[29]研究发现蟾毒灵对人肝癌多药耐药BEL-7402/5-FU细胞无交叉耐药性，有增殖抑制作用，且呈时间、浓度依赖，其作用可能通过阻滞细胞周期进程和诱导细胞凋亡实现的。

3 展 望

蟾蜍毒素作为一种新型抗肿瘤中药制剂，已被广泛应用于肿瘤临床，有望成为疗效显着，副作用少的抗瘤新星，对中、晚期癌症患者，尤其是失去手术机会，没有放疗条件及不能接受化疗的患者来说，是一种有希望的抗癌药物并且在肿瘤的放、化疗过程中能减少其毒副作用，增加患者对放、化疗的耐受性， 提高肿瘤细胞对放、化疗产生的凋亡诱导作用的敏感性，从而提高疗效或在相同疗效下减轻放、化疗的剂量，逆转多药耐药。目前已经研制的制剂有蟾酥注射液、华蟾素注射液、复方蟾皮胶囊等，都显示出抗肿瘤的良好作用，如果进一步明确药理活性和作用机制及其提取工艺，研制出更纯、更新、更有效的制剂，使其成为新一代高效、低毒的抗癌药物指日可待。

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