中药复方柴花颗粒剂的制备工艺优化

冯文杰 陆 晓

(南京市玄武区中医院，江苏 南京 210018）

中药复方柴花颗粒剂的制备工艺优化

冯文杰 陆 晓

(南京市玄武区中医院，江苏 南京 210018）

目的优化中药复方柴花颗粒剂的制备工艺参数。方法考察中药复方柴花颗粒剂工艺各步骤（提取、浓缩、干燥过程中）绿原酸含量变化，对主要工艺参数进行优化选择，采用高效液相色谱法分析测定样品含量。结果采用优化后的提取制备工艺制得中药柴花颗粒，测得其中绿原酸含量高于1.60 mg•g-1，比工艺优化之前含量提高约50%。结论中药复方柴花颗粒的制备工艺优化有效提高了其指标成分的含量，制剂质量得到加强。

柴花颗粒剂；绿原酸；制备工艺优化

中药复方柴花颗粒剂是由临床有效方研制的现代中药复方医院制剂，由柴胡金银花连翘等八味中药组成。该颗粒的主要功效是清热解毒，用于外感发热、咽红肿痛、咳嗽等病症。绿原酸是复方中药材金银花中的主要活性成分，是由咖啡酸与奎尼酸组成的缩酚酸，属于苯丙素类化合物，其具有广泛的生物活性[1,2]，如抗菌、抗病毒、消炎解热、利胆保肝、抗脂质过氧化，因此常作为生药和一些中药成方制剂质量控制的指标性成分。由于其分子结构不稳定，提取时不能高温、强光及长时间加热[3]。本研究在充分结合绿原酸理化性质的基础上，经试验考察中药柴花颗粒的提取制备工艺，确定保证含量合理的关键步骤，通过制备工艺的优化以提高指标成分的含量，保证该颗粒的质量。

1 材 料

Agilent 1200高效液相色谱仪，包括在线脱气机、四元泵、自动进样器、DAD检测器（Agilent公司）；AL204分析天平（METTLER TOLEDO公司）；KQ-250DE数控超声波清洗器（昆山市超声仪器有限公司）；R-210旋转蒸发仪（BUCHI公司）；TGL-16G离心机（上海安亭科学仪器厂）；绿原酸对照品（批号0753-9910，中国药品生物制品检定所）；乙腈，磷酸为色谱纯；水为纯化水；其余试剂均为分析纯；处方组成中八味中药（南京市药材公司）。

2 方法与结果

2.1 制备工艺考察

2.1.1 色谱条件[4-6]

色谱柱：Alltima C18（250 mm×4.6 mm，5μm）；流动相：乙腈-0.4%磷酸水溶液（12∶88）；检测波长：327 nm；流速：1.0mL/min；柱温：30 ℃；进样量：10μL。理论塔板数按绿原酸峰计算不低于5000。

2.1.2 对照品溶液配制

精密称取绿原酸对照品适量，置棕色量瓶中，用50%甲醇超声溶解并定容，配成质量浓度为0.0482mg/mL的溶液，即得。

2.1.3 标准曲线的制备

分别精密吸取绿原酸对照品溶液1.0、2.0、3.0、4.0、5.0、6.0mL于10mL棕色量瓶中，用50%甲醇定容至刻度，摇匀，分别进样10μL，记录峰面积。以峰面积和进样浓度求得回归方程：A=24.364X+3.2786，r=0.999 8。在4.82～28.92 μg•mL-1的范围内，其浓度与色谱峰面积呈良好的线性关系。

2.1.4 精密度试验

精密吸取同一供试品溶液10µL，按上述色谱条件进样，平行测定6次，记录峰面积。其相对标准偏差RSD为0.40%，说明仪器精密度良好。

2.1.5 供试品溶液制备

按照中药复方柴花颗粒剂的制法工艺制备成颗粒成品，分别于水煎提取后（煎煮液）、浓缩后（浸膏）、干燥后（颗粒成品）取样[分别为5mL，5g，5g]，用50%甲醇溶解定容，制得供试品溶液。

2.1.6 供试液含量测定

精密吸取上述对照品及供试品溶液各10μL，注入液相色谱仪，测定。计算结果见表1，损失比例指后一步测得量相比前一步骤绿原酸的下降比例。

表1 各工序中绿原酸的含量

2.1.7 工艺考察结果

上述试验表明，工艺过程中浓缩、烘干步骤均导致绿原酸含量的损失和下降。其中，浓缩步骤对绿原酸含量的影响最大，损失比例在50%以上，干燥步骤含量下降的幅度稍轻。此外，笔者在相同色谱条件下测定了金银花药材中绿原酸含量，经与煎煮提取液中绿原酸含量比较表明，提取率在45%～60%之间，反映原工艺提取率偏低也是导致成品中绿原酸含量低的重要原因之一。

2.2 制备工艺优化

[7]并结合上述工艺考察结果，在充分尊重实际生产条件、不改变基本工艺过程的前提下，我们对提取用溶剂量（用水量）、提取时间、浓缩温度三个因素进行优化研究，筛选出合理且具有可操作性的最佳工艺参数。

2.2.1 用水量的考察

取相当于中药复方柴花颗粒剂1/20处方量的八味药材，每味药材称取三份，按处方比例均匀混合，编号1、2、3。分别按10+8倍量（第一次10倍，第二次8倍），8+6倍量，7+5倍量加水煎煮两次，每次1.5 h；提取液浓缩至相同水平时（接近7+5倍量所得水提液），分别取样，测定其中绿原酸含量，比较加水量对绿原酸提取率的影响，结果见表2。[加温浓缩过程是绿原酸损失的原因之一]

表2 水量对绿原酸提取率的影响

2.2.2 煎煮提取时间的考察

取相当于中药复方柴花颗粒剂1/20处方量的八味药材，每味药材称取三份，按处方比例均匀混合，编号1、2、3。均分别加入7+5倍量加水煎煮两次；1号每次各煎煮0.5 h，2号每次1.0 h，3号每次1.5 h。合并提取液并称重，分别取样测定其绿原酸含量，结果见表3。

表3 煎煮时间对绿原酸提取率的影响

2.2.3 浓缩温度的考察

将“2.2.2项”下所得三份提取液合并后，平均分成3份，每份580.0 g，分别采用100 ℃常压敞口浓缩、80 ℃和60 ℃减压浓缩至相同水平（65+5g），比较浓缩前后绿原酸含量的变化以确定最佳浓缩温度，结果见表4。

表4 浓缩温度对绿原酸含量的影响

2.2.4 工艺参数确定

由试验结果得中药柴花颗粒剂最佳制备工艺参数为：①用水量：相当于药材总量7+5倍，绿原酸得率最佳；②煎煮时间及次数：煎煮两次，每次0.5h；③最佳浓缩温度为80 ℃，该温度下绿原酸损失最小。

2.2.5 样品制备及含量测定

按优化后的工艺方法制备中药复方柴花颗粒，取本品颗粒，研细，取约0.25g，每批样品各2份，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加入50%甲醇25mL，密塞，称定重量，超声处理30min；放冷，再称定重量，用50%甲醇补足减失的重量，摇匀，滤过，滤液用0.45µm微孔滤膜滤过。分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各10µL，注入液相色谱仪，按上述色谱条件测定，记录峰面积，以外标法计算样品中绿原酸的含量，结果见表5。

表5 不同批次样品的绿原酸含量

3 讨 论

本实验工艺考察结果表明，浓缩工艺使绿原酸含量下降明显，由于两批次在用水量（前者用水量较高）和浓缩温度上有一定差异（后者浓缩温度稍低），故提取总量和含量下降的比例也有一定程度的浮动。工艺优化步骤中相关参数的设置尽可能地贴近实际生产需要，如用水量的设置为（10+8）、（8+6）、（7+5），主要是从避免浓缩时间延长致含量降低和节约能源的角度考虑的。

由含量测定结果可知，采用优化后的工艺所制得的中药复方柴花颗粒，其指标成分绿原酸含量显著提高（≥1.60mg/g），比工艺优化之前含量提高约50%。表明通过制备工艺的优化，提高生药材中绿原酸的提取率，减少绿原酸在受热过程中的损失率，确保了成品中有效成分含量，进而保证了该颗粒的制剂质量。

参考文献

[1]邓良,袁华,喻宗沅.绿原酸的研究进展[J].化学与生物工程,2005,4(7):4-6.

[2]吴卫华,康桢,欧阳冬生,等.绿原酸的药理学研究进展[J].天然产物研究与开发,2006,18(3):691-694.

[3]黄绍重.绿原酸的提取及应用[J].应用化工,2006,35(6):467-469.

[4]杨刚,杜守颖,吴清,等.HPLC法测定忍冬藤中绿原酸及咖啡酸含量[J].中国药品标准,2004,5(4):47-50.

[5]熊茉君,毛兴荣,张敏,等.HPLC测定柔肝解毒胶囊中的绿原酸[J].华西药学杂志,2010,25(6):746-747.

[6]国家药典委员会.中国药典.一部[S].北京:中国医药科技出版社,2010:205.

[7]林丹,赵国玲,刘佳佳.金银花不同提取方法的绿原酸比较研究[J].天然产物研究与开发,2003,15(2):124-126.

Optimization of the Preparation Technology for Chaihua Granules

FENG Wen-jie, LU Xiao
(Nanjing Traditional Chinese Medicine Hospital, Nanjing 210018, China)

ObjectiveTo establish an appropriate preparation technology for Jinchai granules.MethodsTo investigate the content of chlorogenic acid in the process steps (extraction, concentration and drying process) of Jinchai granules and optimize the main process parameters.The chlorogenic acid content of the samples were determined by high performance liquid chromatography.ResultsThe chlorogenic acid content of Jinchai granules in optimized preparation technology was higher than 1.60 mg•g-1 and increased by about 50% than the original process.ConclusionThe optimized preparation technology effectively improved the content of chlorogenic acid and the quality of preparation had been strengthened.

Jinchai granules; Chlorogenic acid;Optimum Preparation

R282.710.2

B

1671-8194（2011）28-0219-02