浅谈新鲜冰冻血浆融化后不同放置时间的临床应用意义

桂峰

浅谈新鲜冰冻血浆融化后不同放置时间的临床应用意义

桂峰

目的探讨新鲜冰冻血浆融化后24 h内凝血因子的变化，为指导临床治疗提供理论依据。方法 采用SYSMEX CA-1500型自动血凝分析仪，对20份血浆样品分别于融化后0、6、12、24 h测定凝血酶原时间(PT)、活化部分凝血活酶时间(APTT)、纤维蛋白(FIB)、凝血酶时间(TT)、凝血因子Ⅶ、Ⅷ、Ⅸ(FⅦ、FⅧ、FⅨ)活性水平。结果新鲜血浆融化后24 h之内无明显改变的有PT、FIB、TT(P＞0.5);其他指标在不同时间段各有明显的改变，同时显示FⅧ半衰期为12～24 h。结论新鲜冰冻血浆融化后放置会有凝血因子活性衰减，为保证输血质量，应尽可能融化后立即输注。

新鲜冰冻血浆;凝血因子

新鲜冰冻血浆(Fresh frozen plasma，FFP)是自血液采集后6～8 h之内经分离置-50℃中速冻成块，然后在-30℃中保存1年，其几乎含有全部凝血因子，包括不稳定因子FⅤ和FⅧ.FFP是目前临床常用的一种血液成分，在治疗和预防出凝血疾病及大剂量输血所致的凝血功能障碍方面起非常重要的作用。然而，凝血因子的不稳定性及临床时常出现FFP融化后不能及时应用而影响治疗的效果。为了准确了解冰冻血浆的治疗时效性，笔者对新鲜冰冻血浆融化后放置不同时间血浆凝血因子的活性水平进行了测定，现报告如下。

1 资料与方法

1.1 一般资料 20份新鲜冰冻血浆来自信阳市中心血站，经ACD-B抗凝全血分离制备而成，操作严格按照《中国输血技术操作规程》进行制备。

1.2 实验仪器与试剂 采用SYSMEX CA-1500型全自动血凝分析仪。试剂均为DADE BEHRING公司生产，有标准血浆(Lot.No 502578)，凝血酶原时间(PT)试剂(Lot.No 505627B)，活化部分凝血活酶时间(APTT)试剂(Lot.No 527158)，FIB 试剂(Lot.No 537511)，凝血酶时间(TT)试剂(Lot.No 515465)，Coagulation Factors Ⅶ(Lot.No 500780)，FⅧ(Lot.No 503872B)，FⅨ(Lot.No 500881B)，Dade Thrombin Reageednt试剂(Lot.No 500560B)。

1.3 取样方法 随机分批抽取新鲜冰冻血浆(FFP)20例份，37℃水浴融化。融化后立即在超净工作室内严格按无菌技术要求抽取血浆2 ml于试管内，随即进行凝血因子测定为0时值，然后把血浆放入4℃冰箱，在6、12、24 h分别进行测定。

1.4 凝血因子测定方法 严格按照SYSMEX CA-1500型全自动血凝分析仪操作说明和试剂要求，采用凝结光学检测法原理，对不同的检测项目利用不同稀释度标准血浆原理，对不同的检测项目利用不同稀释度标准血浆凝结时间与相应的凝血因子活性率取对数后标绘于对数图上，绘制成标准曲线，然后测定受检者血浆凝结时间与相应因子活性率，所获数据按内插法带入回归方程，计算受检者血浆中凝血因子活性Ⅷ(FⅧ)、FⅨ等的活性。

2 结果

新鲜冰冻血浆融化后24 h内凝血因子变化见。

表1 新鲜冰冻血浆融化后24 h内凝血因子的变化(±s)

表1 新鲜冰冻血浆融化后24 h内凝血因子的变化(±s)

注：*与6 h比较P＜0.05，#与12 h比较P＜0.05，△与24 h比较P＜0.05;INR：PT换算为国际标准比率

时间 PT/s INR APTT/s TT/s FIB/(g/L) FⅦ/% FⅧ/% FⅨ/%0 h 12.11±0.51 1.017±0.08△ 31.26±2.53#△ 18.63±1.34△ 1.945±0.489 97.10±32.88*#△148.32±47.44*#△103.30±13.85#6 h 12.36±0.64 1.059±0.11 32.10±2.92 18.21±0.94 2.005±0.309 81.28±28.37 115.87±33.23 103.44±16.08 12 h 12.71±0.51 1.079±0.74 33.13±3.26 15.89±0.94 1.958±0.329 79.62±26.49 87.26±30.15 87.96±13.63 24 h 12.72±0.62 1.116±0.10 34.42±3.48 17.53±0.93 2.110±2.445 61.45±20.37 84.80±22.67 108.44±15.52

表2 部分凝血因子24 h衰减率情况(%)

3 讨论

本资料凝血因子检测指标有PT试验，是用于快速、敏感检测外源性凝血途径(Ⅱ、Ⅴ、Ⅶ、Ⅹ、Ⅰ)凝血功能紊乱的筛选，INR是PT用国际标准化比值来表示;APTT试验，是用于内源性凝血因子(Ⅷ、Ⅸ、Ⅺ)活性异常的筛选;TT试验，是用于快速评定止血和血栓形成的有效方法，可以定量监测功能性纤维蛋白原水平。

本资料显示：新鲜冰冻血浆中不稳定的凝血因子(如FⅧ)因其在体外半衰期较短，多为8～12 h，而易使其活性丧失，加之血液离体后血浆凝血因子接触异物表面不同程度被激活，凝血酶和FⅩa也能在此继续裂解FⅧa，使之失活［1］。我们的实验结果显示：新鲜冻冻血浆融化后，FⅧ：C随时间的改变而有明显的降低，由即时的(148.32±47.44)%下降到24 h测定值(84.8±22.67)%;在12 h时，其活性为(87.26±30.15)%，衰减了41.17%，与24 h衰减42.82%基本保持恒定，这与文献［2］报道的FⅧ：C在4℃保持12 h、24 h的FⅧ：C水平，与抽血即刻比较差异无统计学意义(P＞0.05)的结论不同，而与文献［3］测定的新鲜冰冻血浆4℃保存12 h FⅧ：C衰减48.78%和24 h衰减66.77%的趋势基本一致，从而证明FⅧ的半衰期为12～24 h。

本资料同时显示：观察的凝血指标中，FFP在融化后，6 h有明显改变的有FⅦ、FⅧ(P＜0.05)，12 h有明显变化的有APTT、TT、FⅦ、FⅧ和 FⅨ(P ＜0.05)，而 24 h有变化的有INT、APTT、FⅦ、FⅧ(P ＜0.05)，6～24 h没有显著变化的有PT、FIB(P＞0.05)。APTT的延长与内源性凝血系统的改变有关，其衰减可能与FⅧ降低有关;而PT时间延长与外源性凝血系统的改变有关，6～24 h没有明显改变，证明外源性凝血因子比较稳定或改变小而没有影响到其改变。纤维蛋白原因其比较稳定测定结果无明显改变。

由表2可知，FFP在融化后，FⅦ活性在6 h衰减16.3%，12 h衰减18.0%，24 h衰减36.7%;而FⅨ在12 h有一过性的降低，24 h又恢复到原水平，其原因有待进一步探讨。从结果可知，FFP融化后，不仅有FⅧ活性的衰减，同时还有FⅦ活性的衰减。提示我们FFP在融化后要立即输注，以保证凝血因子的足够疗效。

我院成分输血率已达100%，了解和掌握成分血液的制备过程和血液成分含量，对指导临床用血，计算血浆用量有一定的现实意义。由于冰冻血浆中几乎包含了所有的凝血因子，因而是其他血液制品不能代替的。为了保证有效成分的含量，在新鲜冰冻血浆从制备到临床应用整个环节中，都应进行严格的监控，尽量缩短在室温的停留时间，以减少不稳定因子的失活，确保临床用血的安全有效。

［1］ 李静旗，张丽，宫本兰.冷链对新鲜冰冻血浆FⅧ活性的影响.临床输血与检验，2003，5(3)：193.

［2］ 胡丽华，曹奎杰，陈汉华，等.库存全血凝血因子Ⅷ改变的研究.临床血液学杂志，2000，13(1)：21-22.

［3］ 张远鹏，罗红林，王丽.凝血因子Ⅷ在FFP过程中受时间和温度的影响.镇江医学院学报，2001，11(1)：82.

The clinical significance of different place time after fresh frozen plasma warmed

GUI Feng.Department of Blood Transfusion，People's Hospital Gushi County Henan 465200，China

ObjectiveTo explore the changes of coagulation factor of warmed fresh Frozen plasma within 24 h，which provides theory basis for clinical transfusion.MethodsWe warmed 20 samples of FFP and detected PT，APTT，FIB，TT，FⅦ，FⅧ，FⅨ at 0、6、12、24 h respectively by SYSMEX CA-1500.ResultsPT，TT and FIB didn’t change obviously within 24 h after warmed(P ＞0.5)，but other indexes changed obviously at different time.It indicated that the half life of FⅧ was 12 ～ 24 h.ConclusionCoagulation factor activity should decrease after FFP is warmed.It has better be transfused immediately after warmed in order to assure quality of transfusion.

Fresh frozen plasma;Coagulation factors;Significance

465200 河南省固始县人民医院供血库