中药止痛胶囊中芍药苷的HPLC含量测定

肖霞 曹俊凯

中药止痛胶囊中芍药苷的HPLC含量测定

肖霞 曹俊凯

目的 建立止痛胶囊中芍药苷的含量测定。方法 用HPLC法，CLC-ODS柱(15 cm×6 mm)，以甲醇-乙腈-醋酸-水 =(15∶7.5∶2∶75.5)为流动相;检测波长:245 nm;超声波提取，对中药止痛胶囊中主药白芍中芍药苷含量进行测定。结果 其平均回收率为100.72%，相对标准偏差为1.23%。结论 用本法测定该止痛胶囊中芍药苷含量，结果准确、灵敏、方法简便，且有适用性。

HPLC;中药止痛胶囊;芍药苷

白芍系Paeonia lactiflora Pall.多年生草木植物，有平肝止痛、养血调经之功，可用于头痛眩晕、胁痛、腹痛、四肢挛痛等，芍药中芍药苷显示了较强的生理活性。新研制的中药止痛胶囊是以白芍为主要药味及其他中草药经精制而成。芍药苷在止痛胶囊中含量多少对药效至关重要。中药止痛胶囊中芍药苷含量的测定方法尚未见报道。本文采用HPLC法，用超声波萃取，对该止痛胶囊中芍药苷含量进行测定［1，2］，其平均回收率为100.72%;相对标准偏差为 1.23%。表明本法测定该止痛胶囊中芍药苷含量，结果准确、灵敏、方法简便易行。实验部分

1 仪器、试药

1.1 仪器 高效液相色谱仪，超声波发生器，电子分析天平。

1.2 试药 甲醇、乙腈，醋酸，超纯水;对照品:芍药苷;中药止痛胶囊样品。

2 含量测定

2.1 色谱条件［3］色谱柱:岛津 Shimpack CLC-ODS柱(15 cm × 6 mm)，流动相:甲醇-乙腈-醋酸-水 =(15∶7.5∶2∶75.5);检测波长:245 nm;流速:1.4 ml/min;纸速:1 mm/min。

实验表明，在上述选择的色谱条件下，中药止痛胶囊中，其他组分对芍药苷组分的主峰无干扰，分离好，能够满足该止痛胶囊中芍药苷含量测定的要求，结果见图1(A，B，C)。

由色谱图中可见，其他组分对芍药苷主峰的保留时间与对照品(芍药苷)的色谱峰保留时间一致(tR=8.4 min)。

2.2 对照品溶液的制备 精称适量对照品(芍药苷)，于10 ml量瓶中用70%甲醇溶解并稀至刻度，摇匀、备用。浓度为2 mg/m l。

2.3 样品供试液的制备［4］取内容物，混合均匀，精称适量(相当一粒止痛胶囊1/2的量，约0.25 g)于50ml量瓶中，加入适量70%甲醇水，在超声波发生器中提取1 h，取出待室温后，稀释至刻度摇匀，待用。

取上述样品液1 ml置量瓶中，用70%甲醇稀释至刻度，摇匀，取适量于1.5 ml小离心管中，在高速离心机1 2000 r/min中离心2～3 min，滤过，取续滤液为供试品溶液。

图1 样品色谱图A-芍药苷 B-空白 C-止痛胶囊

2.4 系统适用性试验分别精密吸取对照品溶液，止痛胶囊试液，芍药苷的阴性样品供试液各10μl，注入HPLC仪，按上述色谱条件测定。

2.5 线性关系考察［5］精密移取上述标液(2 mg/m l)1，0.5，0.25，0.125 ml，分别置入 10 ml量瓶中，用 70% 甲醇水溶液稀释至刻度摇匀。分别在上述色谱条件下进样20μl，以芍药苷的浓度(c)为横坐标，峰高(h)为纵坐标绘图得一直线，其回归方程为c=0.001 h-0.03，r=0.9999。

由上述实验表明:芍药苷浓度在0.2～0.025 mg范围内呈线性关系。

2.6 精密度试验 精取上述溶液1 ml，于10 m l量瓶中，用70%甲醇水稀料至刻度，摇匀，取1.5 ml于小离心管中，在高速离心机中1 2000 r/min离心2～3min，取出，吸取上清液进样20μl，测得5次记录峰面积，结果峰面积的 RSD为1.22%，结果表明仪器精密度良好。

2.7 重复性试验 精称3份相同量的芍药苷与适量的空白样品，分别置入10 ml量瓶中，加入适量70%甲醇，超声波提取1 h，取出放至室温后，用70%甲醇水稀至刻度、摇匀，待用。分别精取上述液1 ml，于10 ml量瓶中用70%甲醇水稀至刻度、摇匀，取适量于1.5 ml小离心管中，在高速离心机1 2000 r/min下离心2～3 min，取出吸取上清液20μl进样，测得重现性实验结果RSD=0.89%。

试验表明:芍药苷含量测定重复性较好，能够满足止痛胶囊中芍药苷含量测定要求。

2.8 稳定性试验 按重复性试验中的1号样，分别在2、4、6、8、12、24h测定，RSD 为 0.63%，结果表明，本品在 24h 内稳定性良好。

2.9 回收率试验 精称对照品(芍药苷)适量及空白样品适量于10 ml量瓶中，加入适量70%甲醇水，在超声波发生器中提取1 h后，取出放至室温后，用70%甲醇水稀至刻度，摇匀、备用。

分别精取上述溶液1 ml，于10 m l量瓶中，用70%甲醇水稀至刻度，摇匀，取1.5 ml于小离心管中，在高速离心机中1 2000 r/min离心2～3 min，取出，吸取上清液进样20μl，测得4次平均回收率为100.72%。

2.10 样品测定 取内容物，混合均匀，精称适量(相当一粒止痛胶囊1/2的量，约0.25 g)于50 ml量瓶中，加入适量70%甲醇水，在超声波发生器中提取1 h，取出待室温后，稀释至刻度摇匀，待用。取上述样品液1 m l置量瓶中，用70%甲醇稀释至刻度，摇匀，取适量于1.5ml小离心管中，在高速离心机1 2000 r/min中离心2～3 min，取出后，取上清液20μl进样，测得三批样品结果见表1。

表1 止痛胶囊中芍药苷含量(%/粒)

3 结果与讨论

3.1 样品处理方法 本文样品处理采用超声波提取法，该法比文献报道的普通提取处理法简单且样品不易丢失。

3.2 根据对流速的考察，发现当流速为1.4 ml/min的时候，芍药苷分离效果更好，出峰时间更适中。

3.3 由试验表明:本法测定中药止痛胶囊中芍药苷的含量，其方法简便易行、结果准确、灵敏，能够满足该止痛胶囊中含量测定的要求，批量生产时可用于控制质量。

3.4 本文考察了3批不同批次中药止痛胶囊中芍药苷的含量。建立了一种更准确、简单、快速的HPLC测定方法，对于有效评价止痛胶囊的质量提供了更为有效的方法。

［1］李俊.中药止痛胶囊中芍药苷的含量测定.中国药学杂志，2001，26(5):289.

［2］王杰民.HPLC法测定中药止痛胶囊中芍药苷的含量.中成药，2001，13(4):32.

［3］贾欣，高岩，杜斌，等.HPLC法测定中药止痛胶囊中芍药苷的含量.宁夏大学学报(医学版)2006，41(1):156-157.

［4］何怀冰.芍药中芍药甙的高效液相色谱法测定.中成药，2001，13(4):32-33.

［5］赵子剑，赵启鹏.复方石淋通片的质量标准.中医药，2005，25(5):69-70.

463000 驻马店市第一人民医院药剂科