环保透明脱蜡液替代二甲苯在病理制片中的应用

姜红飞

(九江市第一人民医院病理科,江西九江332000)

二甲苯作为传统的透明脱蜡溶剂,被长期广泛应用于常规石蜡制片中,然而二甲苯是一种毒害性较大的试剂,早已引起环保部门的重视。国家有关部门规定室内空气中二甲苯最高允许浓度为100 mg·m-3[1],而医院病理技术室的二甲苯室内空气含量往往会超标数倍。二甲苯对人体的毒害主要通过呼吸道吸入和皮肤接触进入体内,损害神经系统和血液系统,长期接触引起神经衰弱综合征和植物神经紊乱以及皮肤黏膜刺激症状,还可引起免疫功能低下、贫血、白细胞减少、皮炎、湿疹和皮肤干燥,尿中也可以出现蛋白管型等。2009-2010年九江市第一人民医院使用环保透明脱蜡液对组织进行透明、脱蜡,取得了良好效果,报告如下。

1 材料与方法

1.1 材料

本院送检的病理组织标本,包括胃、肠、肝、脾、肾、淋巴结、乳腺、子宫等组织,选取环保透明脱蜡液和二甲苯制片各1 000张。环保透明脱蜡液:江原@牌,无锡江原实业技贸总公司生产;二甲苯:重庆市天府精细化学品厂生产。

1.2 方法

按照常规操作程序使用全自动脱水机进行固定、脱水、透明、浸蜡。透明采用二甲苯和环保透明脱蜡液各2缸,时间均为20 min·缸-1。将处理好的组织常规包埋,在专用病理组织切片机上切成3～4 μ m,烘片、脱蜡。组织脱蜡分别采用环保透明脱蜡液和二甲苯各2缸,每次15 min。最后通过HE染色用光学显微镜观察。

根据常规石蜡包埋-HE染色质量的基本标准[2]进行效果判定。脱蜡后组织切面完整,透明度好,厚薄均匀:细胞核与细胞质染色对比清晰的切片为优质片,稍差的为良片,不好的定为差片。优良率=(优质片数+良片数)/总制片数×100%。

2 结果

2种制片方式的效果比较见表1。由表1可见,环保透明脱蜡液与二甲苯制片优良率差异无统计学意义(P＞0.05),优良率(均≥90%)达到了常规石蜡包埋-HE染色基本标准。

表1 环保透明脱蜡液与二甲苯制片效果比较张

3 讨论

二甲苯价格低廉,制片效果好,长期以来在病理组织透明和制片中被广泛应用,但它属于芳香族化合物,折光率1.495,沸点144℃,气味难闻,毒性较强,易挥发,在空气中最高浓度为100 g·m-3[3]。长期吸入皮肤会危害健康、污染环境,而且制片过程中二甲苯的透明时间如果掌握不好,易使组织收缩、变硬、变脆[4],影响制片质量。

本科使用的一种新型试剂——环保透明脱蜡液是专门为组织病理学和细胞学样品处理设计的无色无味的有机溶剂,不含芳香族化合物,是一种环保的二甲苯替代物,可用于组织脱水及染色过程中,对仪器无腐蚀性,且无须改变原有程序;安全无毒,无异味符合GB18583-2001《室内装饰装修材料粘剂中有害物质限量》标准,透明效果与二甲苯相同,长时间浸泡组织不会使组织变脆,还能增强浸蜡效果,反而有利于切片;不与水混合,即使在潮湿的环境下使用,也不会因吸收水汽而浓度下降;对于脂肪类组织脱水效果更优于二甲苯,其高纯度、高稳定性可确保实际应用的质量,是二甲苯的理想代替品。

当然,相对于二甲苯低廉的价格来说,环保透明脱蜡液价格偏高,溶解中性树胶速度较慢,有时还需要放在烤箱中加热以加速其溶解;但透明脱蜡液试剂能很好地应用于外检常规制片工作中,同时也适用于冷冻切片、特殊染色、免疫组织化学,并完全能够达到满意的效果,尤其它具有安全性、环保、无毒的优点,为了病理工作人员的健康和保护环境,可以取代毒性较大的二甲苯而应用于临床。

[1] 中华人民共和国卫生部.工业企业卫生标准[M].北京:人民卫生出版社,1979:11-12.

[2] 中华医学会.临床技术操作规范:病理学分册[M].北京:人民军医出版社,2004:3.

[3] 谭常兰,刘付华,贺美华,等.松节油代替二甲苯快速脱蜡在病理切片中的应用[J].怀化医专学报,2003,2(1):91.

[4] 龚志锦,詹镕洲.病理组织制片和染色技术[M].上海:上海科学技术出版社,1994:19.