不同炮制方法对菟丝子中多糖含量的影响

肖 岚，杨梓懿*，陈 曦

（湖南中医药大学药学院，湖南 长沙 410208）

不同炮制方法对菟丝子中多糖含量的影响

肖 岚，杨梓懿*，陈 曦

（湖南中医药大学药学院，湖南 长沙 410208）

目的 考察不同炮制方法对菟丝子中多糖含量的影响。方法 采用硫酸-苯酚比色法测定菟丝子不同炮制品的多糖含量。结果 菟丝子不同炮制品多糖含量有差异，生菟丝子多糖含量为5.34%，经酒炙后是其生品的1.98倍，是清炒品的1.62倍。结论 菟丝子经炮制后能显著提高多糖的含量。

菟丝子；炮制方法；多糖；苯酚-硫酸法

菟丝子为旋花科植物菟丝子Cuscuta chinensis Lam.的干燥成熟种子，具有补益肝肾、固精缩尿、安胎、明目、止泻；外用消风祛斑等功效[1]。历代菟丝子炮制方法多样，常用的有清炒、盐制、酒制、制饼等[2]。

多糖是菟丝子补益作用重要的物质基础，具有调节免疫、改善内分泌、抗衰老等多种活性[3-4]。近年来，国内对不同菟丝子炮制品有效成分的含量研究多集中在黄酮类成分[5-6]，而对多糖类成分的研究报道较少。本文以多糖含量为考察指标，对菟丝子不同炮制方法进行比较研究，现将结果报告如下。

1 仪器与试药

Item AR1140分析天平和Item AR5120电子天平 （Ohaus Corp.Pine Brook.NJ.USA）；UV-1600 紫外-可见分光光度计（郑州长城科工贸有限公司）；RE-5299旋转蒸发器 (巩义市予华仪器有限责任公司)；DK-S22电热恒温水浴锅 (上海精密实验设备有限公司)；FZ102微型植物粉碎机(天津市泰斯特仪器有限公司)；电子万用炉(天津市泰斯特仪器有限公司)；SHZ-D(Ⅲ)循环水式真空泵(巩义市予华仪器有限责任公司)。

葡萄糖对照品(中国药品生物制品检定所，批号100080—200606)；黄酒(湖南湘窖酒业有限公司，批号：XK16-0300934)；加碘精制盐(市售)；试剂均为分析纯。菟丝子（湖南海川医药有限公司）经湖南中医药大学鉴定教研室周日宝教授鉴定为旋花科植物菟丝子Cuscuta chinensis Lam.的干燥成熟种子。

6%苯酚溶液：苯酚100 g，加铝片0.1 g和碳酸氢钠0.105 g，蒸馏，收集182℃馏分。取次馏分6 mL，加95 mL水，置棕色瓶中，即得。

2 方法与结果

2.1 菟丝子炮制品的制备

2.1.1 生菟丝子 取原药材，除去杂质，淘洗干净，干燥，密闭保存，备用。

2.1.2 清炒菟丝子 取净菟丝子，置炒制容器内，用文火加热，炒至微黄色，有爆裂声，取出放凉，密闭备用。

2.1.3 盐制菟丝子 取净菟丝子，加盐水拌匀，闷润，待盐水被吸尽后，置炒制容器内，用文火加热，炒至略鼓起，微有爆裂声，并有香气溢出时，取出放凉，密闭备用。每100 g菟丝子用食盐2 g。

2.1.4 酒菟丝子饼 取净菟丝子，加适量水煮至开裂，不断搅拌，待水被吸尽后，全部呈黏丝稠粥状时，加入黄酒和白面拌匀，取出，压成饼，切成小方块，干燥，密闭备用。每100 g菟丝子加黄酒15 g，白面粉15 g。

2.2 供试品溶液制备

称取上述菟丝子不同炮制品适量，用粉碎机粉碎，精密称定不同炮制品粉末各5 g，分别加10倍量80%乙醇回流2 h，趁热滤过，弃去滤液。药渣加10倍量水于80℃水浴中回流提取2次，每次2 h，趁热过滤，合并2次提取的滤液，减压浓缩至约20 mL，加4倍量无水乙醇沉淀，离心（4 000 r/min，10 min），沉淀物以无水乙醇、丙酮依次洗涤3次,每次5 mL，合并滤液，得到粗制的菟丝子总多糖组分，于60℃烘干称重。加水配制浓度为10 mg/mL的供试品溶液，备用。

2.3 对照品溶液制备

精密称取105℃干燥至恒质量的无水葡萄糖20.0 mg，加水溶解，并定容于100 mL容量瓶，摇匀，即得浓度为0.200 mg/mL的葡萄糖对照品溶液。

2.4 方法学考察

2.4.1 波长选择 精密吸取对照品溶液、供试品溶液、水各2 mL置10 mL具塞试管，分别加入6%苯酚溶液1 mL，再垂直快速加入浓硫酸5 mL，振摇。100℃水浴20 min，然后放入冰水中冷却至室温。在400～800 nm进行全波长扫描，结果表明，对照品溶液和供试品溶液均在490 nm处有最大吸收，且二者光谱形状相似，因此确定检测波长为490 nm。

2.4.2 标准曲线的绘制 精密吸取对照品溶液1、2、3、4、5、6 mL，分别置于 10 mL 量瓶中，加水稀释至刻度，摇匀。分别吸取上述不同浓度的对照品溶液，以试剂做空白，在490 nm处测定吸光度。以葡萄糖浓度为横坐标，吸光度为纵坐标绘制标准曲线，回归方程为：

结果表明葡萄糖浓度在20～120μg/mL范围内线性关系良好。

2.4.3 稳定性试验 吸取同一菟丝子供试品 (盐炙品) 溶液 2 mL，在 490 nm 处，分别在 0、10、20、30、60、90、120 min 测定吸光度，结果 RSD=2.12%，可见样品溶液在2 h内稳定，表明在本实验条件下显色稳定性较好。

2.4.4 精密度试验 取同一菟丝子供试品 (盐炙品)溶液，在490 nm处连续6次测定吸光度，结果RSD=0.24%，说明该仪器精密度良好。

2.4.5 重现性试验 取同一菟丝子供试品 (盐炙品)6份，按“2.2”项下方法操作，制备供试品溶液6份，每份2 mL，在490 nm处测定吸光度，计算多糖含量，平均含量为7.99%，RSD=1.4%，可见本方法重复性良好。

2.4.6 加样回收率试验 称取同一菟丝子供试品(盐炙品)粉末 0.25 g 6 份，精密称定，按“2.2”项下方法操作，制备成供试品溶液，每份吸取2 mL，分别加入葡萄糖对照品适量，在490 nm处测定吸光度，计算回收率。结果见表1。

表1 加样回收率实验结果

2.4.7 称取各炮制品约0.25 g，按“2.2”项下方法操作制成供试品溶液，于490 nm 处测定吸光度，实验结果见表2。

表2 菟丝子不同炮制品中多糖含量测定结果（，n=3）

表2 菟丝子不同炮制品中多糖含量测定结果（，n=3）

炮制品名生品清炒品盐炙品酒制饼品多糖含量（%）5.34±0.06 6.53±0.04 7.96±0.07 10.58±0.09

3 讨论

苯酚-硫酸比色法测定多糖含量，操作简单且稳定性良好。从表2中可以看出生菟丝子多糖含量为5.34%，经酒制后多糖含量为生品的1.98倍，是清炒品的1.62倍。其含量高低依次为酒制饼品＞盐制品＞清炒品＞生品。

菟丝子多糖可以清除氧自由基及抗脂质过氧化，具有抗衰老和补阳作用。历代菟丝子炮制方法多样，不同的炮制方法对多糖溶出含量有影响。菟丝子经炮制后易于粉碎，有效成分在提取过程中相对生品易于溶出。在用酒或盐作为辅料浸闷药物的过程中，辅料渗透到药物内部可能对菟丝子中所含的亲脂或亲水性成分有助溶作用，能提高菟丝子所含有效成分的溶出率，但酒制品多糖含量高于盐制品还有待进一步研究。

[1]国家药典委员会.中华人民共和国药典,[S]北京:中国医药科技出版社.2010:290-291.

[2]丁安伟.菟丝子炮制历史沿革,中药炮制学[M]北京:高等教育出版社.2007年12月:264-265.

[3]马鹏生，朱溶月.菟丝子多糖药理作用的实验研究[J],内蒙古中医药,2009,28(15):66-67.

[4]张丽娟,张宜欣.菟丝子多糖提取工艺优化及其对脂质过氧化的影响[J],时珍国医国药，2008,19(3）:691-692.

[5]郭澄,王雅君,张剑萍.菟丝子的化学成分和药理活性研究[J],时珍国医国药,2005,16(10):1 035-1 036.

[6]李继红.HPLC法测定菟丝子炮制前后化学成分含量[J],中兽医医药杂志,2009,10(5):37-38.

（本文编辑 杨 瑛）

Effects of different processes on polysaccharide content in Cuscuta chinens

XIAO Lan,YANG Zi-yi,CHEN Xi
(College of Pharmacy,TCM University of Hunan,Changsha,Hunan 410208,China)

Objective To investigate the effects of different processing methods on the polysaccharide content of Cuscuta chinens.Methods The phenol-sulfuric acid method was used to detect the dodder content in different processed products of the polysaccharide.Results Cuscuta chinens polysaccharide in different processed products were different and Cuscuta chinens polysaccharide content of 5.43%in raw Cuscuta chinens,the polysaccharide content by wine was 1.98 times and salt-broiled product was 1.62 times.Conclusion Cuscuta chinens,after processing,can enhance remarkably polysaccharide content.

China dodder;processing methods;polysaccharide;sulfuric acid-phenol method

R283.1

A

10.3969/j.issn.1674－070X.2011.05.014.044.02

2011－01－07

肖 岚（1983-），女，湖南长沙人，在读硕士，主要从事中药炮制理论及饮片质量控制研究。

〔通迅作者〕* 杨梓懿（1954-），男，教授，E-mail:23938867@qq.com。