秦香止泻方对小鼠小肠推进功能及镇痛作用的机制研究

朱 克 ，彭芝配 ，张金慧 ，李文龙 ，肖瑞飞 ，田志刚 ，江壮岚 ，滕久祥

（1.湖南中医药大学2008级硕士研究生班，湖南 长沙 410007；2.湖南中医药大学，湖南 长沙 410007；3.韶关医学院药学系药学教研室，广东 韶关 512026；4.湖南中医药大学2008级博士研究生班，湖南 长沙 410007）

秦香止泻方对小鼠小肠推进功能及镇痛作用的机制研究

朱 克1，彭芝配2*，张金慧3，李文龙4，肖瑞飞2，田志刚3，江壮岚1，滕久祥2*

（1.湖南中医药大学2008级硕士研究生班，湖南 长沙 410007；2.湖南中医药大学，湖南 长沙 410007；3.韶关医学院药学系药学教研室，广东 韶关 512026；4.湖南中医药大学2008级博士研究生班，湖南 长沙 410007）

目的 探讨秦香止泻方对正常小鼠小肠推进功能及冰醋酸致痛的镇痛作用。方法（1）将40只SPF级昆明小鼠随机分为空白对照组、秦香止泻方低、中、高剂量组，分别给药后灌服碳末，处死动物观察小肠碳末推进率：（2）将50只SPF级昆明小鼠分组给药方法同（1），给药后腹腔注射2 mL冰醋酸，观察第1次扭体时间和30 min内各组小鼠扭体次数。结果（1）秦香止泻方低、中、高剂量组与空白对照组组比较，小肠推进率基本相同，差异无统计学意义（P>0.05）；（2）秦香止泻方低、中、高剂量组、肠康片组与空白对照组比较，疼痛潜伏时间均较空白对照组延长，差异具有统计学意义（P<0.05）；扭体次数相比差异具有统计学意义（P<0.01）；秦香止泻方中、高剂量组与肠康片组比较,疼痛潜伏时间延长，扭体次数亦减少，差异具有统计学意义（P<0.05）。结论 秦香止泻方对正常小鼠小肠推进功能无明显抑制及推进作用;秦香止泻方低、中、高剂量组与肠康片组比较,扭体次数明显减少，提示秦香止泻方具有较好的镇痛作用。

秦香止泻方；小肠碳末推进；抗炎镇痛;小鼠；秦皮；木香

秦香止泻方是湖南中医药大学滕久祥教授在临床运用多年的经验方，拟用此方治疗湿热腹泻取得较好的临床疗效。该方由秦皮、木香、白头翁等药物组成，具有清热燥湿、涩肠止泻、理气止痛之功，本文对该方进行小肠碳末推进及冰醋酸所致扭体镇痛实验，探讨其作用机制，现将实验方法及结果报道如下。

1 材料和方法

1.1 材料

1.1.1 动物 90只SPF级昆明小鼠，体质量（18±2）g，雌雄各半。动物由上海西普尔-必凯实验动物有限公司提供（许可证编号：SCXK(沪)2008-0002）。

1.1.2 药物 秦香止泻方药材购于湖南中医药大学第一附属医院；肠康片由张家界元尔药业有限公司生产，批号：20100802，规格 0.05 g/片×24 片。

1.1.3 仪器 电子称：ESP－3001型，长沙湘平科技发展有限公司；TF－1000型电子天平，湘仪天平仪器厂；软尺、柳叶刀等。

1.1.4 试剂 冰醋酸：AR级，汕头市西陇化工厂生产，批号：090414-2。 生理盐水：500 mL/瓶，上海德胜科技集团 （安庆）制药有限公司生产，批号：09103201。

1.1.5 药物制备 秦香止泻方（秦皮、木香、白头翁等药）药材购自湖南中医药大学第一附属医院，取生药材120 g，水煎煮2次，合并滤液，浓缩至120 mL，即每毫升水煎液含1 g生药，置4℃保存备用。

1.2 方法

1.2.1 动物分组 ①小肠碳末推进实验动物分组：将 40 只 SPF 级昆明小鼠，体质量（18±2）g，雌雄各半,按性别分层后编号，按随机数字表法随机分为4组，即：空白对照组，秦香止泻方低、中、高剂量组，每组小鼠10只，观察其碳末推进率。②扭体实验动物分组：将 50 只 SPF 级昆明小鼠，体质量（18±2）g，雌雄各半,按性别分层后编号，按随机数字表法随机分为5组，即：空白对照组，秦香止泻方低、中、高剂量组及肠康片组，每组小鼠10只，观察记录扭体次数。

1.2.2 小肠碳末推进实验 ①小鼠给药：实验前小鼠禁食不禁水24 h，秦香止泻方低、中、高剂量组分别给予临床等效剂量1、3、9倍浓度（浓度分别为1.6、4.8、14.4 g/kg）灌胃，对照药物组肠康片组，以临床等效剂量3倍浓度给药（浓度为：0.94 g/kg）,给药剂量均按照60 kg成人体表面积换算。②观察方法：各药物组均灌胃相应药物剂量2次，给药间隔20 min，空白对照组灌胃同体积生理盐水，第2次给药后15 min，各组小鼠均灌胃10%碳末生理盐水，体积均为0.1 mL/10 g，20 min后处死动物，解剖，测量小肠长度及墨汁前端至幽门距离。③检测指标：测量小肠长度及碳末汁前端至幽门距离，P=小肠炭末推进长度(cm)/小肠全长(cm)×100%。百分率数据进行数据转换，以百分率的平方根的反正弦数值(Arcsin)为统计指标。

1.2.3 冰醋酸扭体实验 ①小鼠给药：各组给药剂量同小肠碳末推进实验，均灌胃给药1次，模型组给予等量蒸馏水，20 min后各组小鼠均腹腔注射0.6%冰醋酸0.2 mL/只。②观察记录：小鼠注射冰醋酸溶液后30 min内扭体反应（腹部收缩内凹、伸展后肢、臀部抬高、蠕行）的次数和时间。③检测指标：扭体次数和疼痛潜伏时间；镇痛率（%）=空白对照组平均扭体次数-给药组平均扭体次数/空白对照组平均扭体次数×100%。

1.3 统计学分析

所有数据均采用SPSS 16.0软件进行处理。计量资料用“”表示。两组间用t检验，多组间用方差分析。

2 结果

2.1 秦香止泻方对正常小鼠小肠推进功能影响

实验结果显示，秦香止泻方低、中、高剂量组与空白对照组比较，小肠推进率基本接近，差异无统计学意义（P>0.05），见表 1。

表1 秦香止泻方对正常小鼠小肠推进功能影响（n=10，）

表1 秦香止泻方对正常小鼠小肠推进功能影响（n=10，）

组 别空白对照组秦香止泻方低剂量组秦香止泻方中剂量组秦香止泻方高剂量组药物剂量(g/kg)-1.6 4.8 14.4小肠推进率（P）74.49±6.16 73.63±5.47 73.79±2.62 74.56±5.16 Arcsin（P1/2）1.00±0.07 1.00±0.06 1.00±0.07 1.01±0.05

2.2 秦香止泻方对冰醋酸所致小鼠扭体疼痛的影响

秦香止泻方低、中、高剂量组、肠康片组与空白对照组比较，疼痛潜伏时间均较空白组延长，差异具有统计学意义（P<0.05）；与空白组比扭体次数明显减少，差异具有统计学意义（P<0.01）；秦香止泻方中、高剂量组与肠康片组比较,疼痛潜伏时间延长，扭体次数亦减少，差异具有统计学意义（P<0.05）。秦香止泻方低、中、高剂量组及肠康片组镇痛率均大于50%，提示具有较好的镇痛作用，见表2。

表2 秦香止泻方对冰醋酸所致小鼠扭体疼痛的影响（n=10，）

表2 秦香止泻方对冰醋酸所致小鼠扭体疼痛的影响（n=10，）

注：与空白对照组比较﹡P﹤0.05，**P﹤0.01；与肠康片组比较▲P﹤0.05。

组 别空白对照组肠康片组秦香止泻方低剂量组秦香止泻方中剂量组秦香止泻方高剂量组疼痛潜伏时间（min）4.38±0.96 7.49±2.01*7.69±2.00*10.68±3.12**▲10.59±2.45**▲扭体次数（次）56.3±7.12 29.0±5.85**29.0±6.24**21.7±5.18**▲19.9±5.11**▲镇痛率（%）-57.54 52.92 60.00 61.22

3 讨论

腹泻是指原来的大便习惯发生变化，每日排便量达200 g以上，次数超过3次，粪便稀薄，水分超过粪便总量的85%，或含脂肪，或带有不消化食物，有时带有黏液或脓血，可伴腹痛、里急、肛周不适、失禁等症状。重者可引起消瘦、电解质紊乱[1]。急性腹泻属中医学“泄泻”之“暴泻”范畴。目前西医对急性腹泻的治疗药物主要有抗生素类，用庆大霉素、氟哌酸、氟嗪酸等药物，其容易产生耐药性，对肝、肾等器官的毒副作用较大并价格昂贵，在临床上不利于广泛应用。

秦香止泻方是导师在治疗湿热腹泻多年临床研究的经验方，且价格低廉、安全、毒副作用小、有利于推广。方中以秦皮清热燥湿、解毒止泻为君。现代药理研究表明秦皮主要成分为香豆素类(秦皮甲素、秦皮乙素、秦皮苷、秦皮素)[2]。秦皮甲素、秦皮乙素、秦皮苷均有明显抗炎镇痛作用[3]。体外实验秦皮对金黄色葡萄球菌、福氏痢疾杆菌、宋内氏痢疾杆菌有显著的抑制作用，对伤寒杆菌，副伤寒杆菌也有一定程度的敏感性，体外实验显示秦皮可降低由伤寒杆菌引起的小鼠急性腹膜感染的死亡率[4]。秦皮还有一定的抑制病毒作用,如抗流感病毒、疱疹病毒等。木香能调节胃肠运动，抗消化性溃疡，抗腹泻和抗炎作用[5]。白头翁醇提物对TNBS诱导大鼠结肠炎肠上皮细胞紧密连接蛋白的调控，起到对肠黏膜屏障的保护作用[6]。且白头翁的抗菌有效成分有原白头翁素、白头翁素，二者对大肠杆菌、金黄色葡萄球菌、痢疾杆菌、结核杆菌、白喉杆菌、链球菌等均有强烈活性，其在MIC 8x10—2x10之间，并与链霉素有协同作用[7]。全方诸药合用，相辅相承，配伍得当，主次分明，共奏清热燥湿、涩肠止泻、行气止痛之功。

正常小鼠的小肠碳末推进作为药效学重要的实验部分，而实验表明秦香止泻方对正常小鼠小肠推进功能无推动及抑制作用，即可能是秦香止泻方对病态小鼠的肠蠕动有抑制作用或者是直接作用于肠道炎症部位而产生止泻效果。扭体实验结果表明秦香止泻方能明显减少冰醋酸所致小鼠腹痛的扭体次数，说明此方具有明显的镇痛作用。

[1]陈其奎，何兴祥，朱兆华，等.消化疾病诊断学［M］北京：人民卫生出版社，2006：389.

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[3]李存红，徐 燕.秦皮的研究进展[J].焦作大学学报，2004,10(4):34-35.

[4]杨天鸣，葛 欣，王晓妮.秦皮抗菌作用研究[J].西北国防医学杂志，2O03，24(5)：387-388.

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[6]张文远,姜伟炜.白头翁醇提物对大鼠结肠炎肠黏膜上皮细胞紧密连接蛋白的保护作用[J].世界华人消化杂志，2009,17(30):3 134-3 139.

[7]韩进庭.白头翁的药理作用及临床应用 [J].现代医药卫生，2007,23（14）：2 123-2 124.

（本文编辑 彭芝配）

Mechanism study of Qinxiang Zhixie decoction on promoting small intestine and analgesic effect in mice

ZHU Ke,PENG Zhi-pei,LI Wen-long,XIAO Rui-fei,TIAN Zhi-gang,JIANG Zhuang-lan,TENG Jiu-xiang
(TCM University of Hunan,Changsha,Hunan 410007,China)

Objective To investigate the effect of Qinxiang Zhixie decoction on promoting small intestine and analgesic effect in mice.Methods(1)40 SPF mice were randomly divided into control groups,and low,medium and high dose of QinXiang Zhixie groups,after feeding medicine and then carbon powder respectively,the mice were killed to observe its propelling of small intestine.(2)50 SPF miceweregrouped and feed like(1),and then injecting 2 mL glacial acetic acid into abdominal cavity,the first writhing time and times of writhing within 30 min.Results(1)compared with the control group,the propelling rates in low,medium and high dose groups were nearly same(P>0.05).(2)Compared with control group and intestine tablet group,the pain latency time in all low,medium and high dose groups was longer(P<0.05),the differencesofthe writhing timeswere significant(P<0.01);compared with the intestine tablet group,the pain latency prolonged and the writhing reduced in medium and high dose group(P<0.05).Conclusion QinXiang Zhixie decoction is not suppressed and is effective to remove pain.

QinXiang Zhixie decoction;carbon propelling in small intestine;anti-inflammatory analgesic;mice;Fraxinus rhynchophylla Hance;Aucklandia lappa Decne

R285.5

A

10.3969/j.issn.1674－070X.2011.05.007.023.03

2011-02-11

长沙市科技局课题（K1009002-31）。

朱 克(1985-),男，河北邯郸人，在读硕士研究生，主要从事中老年病及消化系统疾病临床及实验研究。

*彭芝配，女，研究员，硕士研究生导师，E-mail：pengzhipei805@126.com；*滕久祥，男，教授，博士研究生导师，国家食品药品评审专家。