Trem－1在炎症反应中的作用机理研究

周 丹

(广东省深圳市第二人民医院，广东 深圳 518035)

Trem－1又称髓样细胞触发受体，于2000年被Bonchon等人发现。髓样细胞触发受体位于人6号染色体，属免疫球蛋白超家族成员。髓样细胞触发受体对炎症反应有一定影响作用，成为近年来医学科研的研究课题。本文根据临床分析，研究了髓样细胞受体在炎症反应中的作用机理。

1 资料与方法

1.1 一般资料:以10例足月自然分娩胎儿作为对照组，抽取其脐带血进行研究。对照组男4例，女6例。另外选取13例患有全身炎症反应综合症的新生儿作为实验组。抽取其外周血5mL进行研究。实验组男7例，女6例。两组患儿在性别方面无显著差异(P＞0.05)，具有可比性。实验试剂采用Trizol试剂(Takara)、鼠抗人 Trem －1抗体(Santa Cruz)、RT－PCR两步法试剂盒、生物素标记山羊抗鼠IgG(Santa Cruz)、ECL发光剂(Pierce)、鼠抗人生物素标记GAPDH抗体(Santa Cruz)等。

1.2 方法:对血液样本进行以下操作，为实验准备材料:分离单核细胞后置于－196℃下保存备用;提取收集细胞总RNA;采用三去污法提取细胞总蛋白并对浓度进行测定，置于－20℃冰箱中保存备用。RT－PCR按照试剂盒中附带的操作步骤进行;PCR反应条件如下:94℃变性3min后，开始循环过程。94℃30s，56℃退火30s，72℃延伸1min。35个循环后，最后72℃延伸10min。内参照PCR扩增反应体系与上述过程一致。在紫外光环境下，将电泳结果利用激光扫描进行电脑存储，根据Trem－1mRNA与β－actinmRNA吸光度比值进行半定量分析。采用鼠抗人Trem－1抗体、鼠抗人生物素标记GAPDH抗体、ECL发光剂、生物素标记山羊抗鼠IgG等试剂进行Trem－1蛋白水平的表达，将结果进行记录分析。

1.3 统计学处理:所有数据进行计算机输入，采用SPSS18.0软件建立数据库，以均数±标准差表示，采用T检验进行统计学分析，以P＜0.05为用统计学意义。

2 结果

实验组与对照组中单核细胞RT－PCR显示Trem－1基因产物为一条约560bp长度的条带，预期长度为564bp，基本一致。实验组中Trem－1蛋白和Trem－1RNA表达均高于对照组(详细情况见表1)。经SPSS18.0软件统计分析，两组间差异有统计学意义。

表1 两组Trem－1mRNA表达对比

3 讨论

中性粒细胞和单核细胞可受Trem－1诱导分泌TNF－α、IL－1β、干扰素γ等促炎细胞因子，中性粒细胞还可释放髓过氧化酶。Trem－1在细胞内部可诱发钙离子转移，使细胞表面信号相关激酶和磷脂酶C络氨酸磷酸化，增强或放大炎性反应，使其发生过度炎性反应［1］。Bouchon等人研究发现，存在某些病菌感染的腹腔灌洗液、感染处组织样本、病原体培养液中均能检测到sTrem－1有不同程度的上调。其研究的样本包括金黄色葡萄球菌、铜绿假单胞菌、曲霉等［2］。我国专家对部分胸腔积液患者采用荧光标记法以及酶联免疫吸附测定法对细胞表面的Trem－1水平进行研究后发现，肺炎患者的胸腔积液中，Trem－1的表达水平要比结核性胸膜炎、肺癌高，其研究结果认为Trem－1可作为对胸腔积液病因的辅助指标［3］。

国外一些研究资料表明，在单核细胞Trem－1的激活参与了反应微生物攻击、宿主防御的早期诱导和适应性免疫反应［4］。Trem－1的表达无法加强其自身免疫性疾病，但可以对炎性因子的合成过程进行激发。在炎症发生发展的过程中，促炎细胞因子和抗炎细胞因子之间发生相互作用，对感染转归的结果形成影响［5］。本组案例中，实验组的 Trem －1mRNA，Trem －1蛋白表达均高于对照组，且蛋白表达有一定的规律性。说明Trem－1参与了炎症发生发展的所有过程，并对其产生了重要作用。有研究结果显示，阻断内毒素激活经由Trem－1的通路，不能完全阻断NF－kb激活的炎症介质释放［6］。所以在早期要对Trem－1进行调控，防止促炎因子过度释放导致不良临床现象的发生。

［1］辛维政.新生儿全身炎症反应综合征时TREM－1表达的实验研究［J］.中国优生与遗传杂志 ，2009，17(08):13－14.

［2］罗凌.人工合成TREM－1多肽对脓胸大鼠炎症反应的干预效应［J］.广西医科大学 ，2009.

［3］闵安杰，杨兴华，张自功，等.TREM－1在脆弱类杆菌脂多糖诱导单核细胞炎症反应中的作用［J］.中华外科杂志，2007，01(09):18－19.

［4］L Richeldi，M Mariani，M Losi.Triggering receptor expressed on myeloid cells:role in the diagnosis of lung infections［J］.Eur Respir，2004，24:247 －250.

［5］梁志海，唐国都.髓样细胞触发受体1在炎性反应中的作用［J］.医学综述，2009，15(18):2747－2748.

［6］刘娜，龙尧.髓样细胞触发受体－1在疾病中的作用［J］.中国医药导报，2010，01(01):34－35.