2006至2010年铜绿假单胞菌分布及耐药性分析

陈建安，周 静，张丽华，张 丽

(中山大学附属东华医院检验科，广东东莞 523110)

2006至2010年铜绿假单胞菌分布及耐药性分析

陈建安，周 静，张丽华，张 丽

(中山大学附属东华医院检验科，广东东莞 523110)

目的分析2006至2010年中山大学附属东华医院临床分离的646株铜绿假单胞菌的耐药情况。方法采用全自动微生物分析仪VITEK32进行细菌鉴定，用Kirty-Bauer法进行药敏试验。并用WHONET5.5对其耐药性进行分析。结果5年共分离铜绿假单胞菌646株，以呼吸道标本分离株为主，占65.9%。分离菌对抗菌药物耐药率最高的是左氧氟沙星(18.5%)，其次为庆大(18.1%)，亚胺培南(18.0%)。对美罗培南的耐药率为13.7%。敏感率最高的是妥布霉素(88.2%)，其次为哌拉西林/他唑巴坦(88.1%)，头孢他啶(87.0%)。结论连续5年回顾性分析，铜绿假单胞菌是我院医院感染的主要病原菌，其耐药率较高,并呈不断上升。

铜绿假单胞菌；耐药性；感染

铜绿假单胞菌(Pseudomonas aeruginasa)属于非发酵菌，广泛分布于自然界、土壤、水、空气中，人体的皮肤、肠道、呼吸道均有存在，当人体免疫力低下时极易成为条件致病菌，是医院感染的主要病原菌。我国铜绿假单胞菌的耐药性仍处于较高水平，不同医院抗菌药物的耐药性相差较大，应加强监测，指导临床合理使用抗菌药物并控制医院耐药菌感染的流行[1]。为此我们对我院2006至2010年临床分离的铜绿假单胞菌细菌耐药性进行回顾性分析。

1 材料与方法

1.1 材料

1.1.1 菌株来源 均为2006至2010年东莞东华医院临床分离的铜绿假单胞菌，剔除相同部位的重复菌株，共646株。

1.1.2 质控菌株铜绿假单胞菌ATCC27853购于卫生部临床检验中心。

1.1.3 抗生素药敏纸片和培养基哌拉西林、哌拉西林/他唑巴坦、头孢他啶、头孢吡肟、氨曲南、亚安培南、美罗培南、阿米卡星、庆大霉素、妥布霉素、环丙沙星、左氧氟沙星12种抗菌药纸片均购自英国OXOID公司。Mueller-Hinton(MH)培养基为广州市迪景公司产品。

1.2 方法

1.2.1 细菌鉴定按《全国临床检验操作规程》第3版进行分离培养，采用法国生物梅里埃公司全自动微生物分析仪VITEK32，及GNI＋细菌鉴定卡鉴定到种。

1.2.2 药敏试验采用纸片扩散法(K-B)，结果采用对应每年的CLSI推荐的标准执行，总耐药率采用2010年的CLSI推荐的标准计算。

1.2.3 统计方法用WHONET 5.5软件进行分析。

2 结果

2.1 铜绿假单胞菌的标本分布

2006 至2010 年我院共分离铜绿假单胞菌646株，逐年分离的铜绿假单胞菌分别为95株、116株、131株、152株和152株。标本主要来自下呼吸道(痰标本)，共427株 (66.1%)；其次伤口分泌物98株(15.2%)；尿标本 48 株(7.4%)；血标本 17 株(2.6%)，其他标本(深静脉导管、胸腹水、脑脊液等)占8.7%。

2.2 铜绿假单胞菌科室分布

呼吸内科检出194株(30.0%)，ICU检出111株(17.2%)，神经外科检出54株(8.4%)，神经内科检出48株(7.4%)，血液内科检出33株(5.1%)，肿瘤内科检出30株(4.6%)，门诊检出27株(4.2%)，肾内科检出23株(3.6%)，其他科室检出126株(19.5%)。

表1 2006至2010年铜绿假单胞菌对12种抗菌药物的耐药率(%)

2.3 铜绿假单胞菌对常用抗生素的耐药性分析

铜绿假单胞菌对12种抗菌药物的耐药率见表1。2006年至2010年5年中我院分离的铜绿假单胞菌对常用抗菌药物的总耐药率最高的是左氧氟沙星(18.5%)，其次为庆大(18.1%)，亚胺培南(18.0%)。敏感率最高的是妥布霉素(88.2%)，其次为哌拉西林/他唑巴坦(88.1%)，头孢他啶(87.0%)。5年中除亚安培南外 (亚安培南2010年的CLSI推荐的标准有较大改动)耐药率上升较快的有哌拉西林(8.4%～21.1%)，哌拉西林/他唑巴坦 (7.4%～15.1%)，头孢他啶 (7.4%～14.5%)， 氨曲南 (9.5%～17.9%)，美罗培南 (3.0%～17.9%)，环丙沙星(9.5%～18.4%)，左氧氟沙星(16.7%～21.1%，P＜0.01)。对亚安培南的耐药率从2006到2008年有所增加，2009年有所回落，2010年按新的CLSI推荐的标准又增高到21.7%。

3 讨论

由于广谱抗菌药物、激素及免疫抑制剂的广泛应用，各种侵入性诊断和治疗手段的不断增加，铜绿假单胞菌在医院感染病原体中占有越来越重要的地位，在2007年我院的细菌耐药性检测中占主要病原菌的第二位，仅次于大肠埃希菌[2]。5年中，铜绿假单胞菌临床分离株数呈逐年上升趋势，标本来源主要为下呼吸道66.1%，伤口分泌物15.2%，尿标本7.4%。这可能与广谱抗生素的应用，气管插管、尿道内插管等侵入性操作有关。科室分布主要在呼吸内科30%和ICU 17.2%。铜绿假单胞菌主要引起下呼吸道感染，也是医院获得性肺炎最常见的病原菌。ICU患者病情危重，免疫力低下，加上大剂量广谱抗生素的使用，易于铜绿假单胞菌的定植，造成院内感染。

铜绿假单胞菌的天然耐药性引人瞩目，获得性耐药性也极常见。通过以上回顾性研究，我院铜绿假单胞菌对β-内酰胺类的耐药性有一定程度的上升，其中哌拉西林的耐药性由2006年的8.4%上升到2010年的21.1%，哌拉西林/他唑巴坦的由7.4%上升到15.1%，头孢他啶由7.4%上升到14.5%，头孢吡肟的耐药性变化不大。其耐药机制主要是获得β-内酰胺酶，调节增强的泵出，以及膜孔蛋白丢失，LPS的改变，青霉素结合蛋白的改变。铜绿假单胞菌对氨基糖苷类药物的耐药性有一定程度下降。其中阿米卡星由2006年的15.8%降到2010年的9.9%，庆大霉素由21.1降到18.5%，妥布霉素的耐药性变化不大。对此类药物最常见的耐药机制为药物的不可渗透性及泵出，酶灭活，呼吸突变等。虽然氨基糖苷类药物的抗菌活性保持的不错，但此类药物对老年及肾病患者有增加肾毒性的危险，应慎用。

喹诺酮类药物对治疗铜绿假单胞菌感染应用广泛，与之相对的耐药率也逐年上升。环丙沙星由2006年的9.5%上升到2010年的18.4%，左氧氟沙星由16.7%上升到21.1%。铜绿假单胞菌对此类药物的耐药主要由于作用靶位亲和力的改变即DNA螺旋酶A亚单位和拓扑异构酶Ⅳ的C亚单位突变引起[3]。碳青霉烯类抗菌药物对革兰阴性杆菌具有强大的抗菌活性，因此被广泛用于重症感染患者，特别是ICU病房，它对铜绿假单胞菌的耐药性也是不断上升。亚安培南的耐药率从2006年的6.4%到2008年的15.4%，2009年有所回落，2010年按新的CLSI推荐的标准又上升到21.7%。美罗培南从2008年开始的3%上升到2010年的17.9%，短短3年时间耐药性上升近6倍，应引起临床医生的重视。有文献报道铜绿假单胞菌对碳青霉烯类抗菌药物的耐药性主要是由于膜孔蛋白OprD2含量减少甚至丢失引起外膜通透性下降所致[3，4]。

我院铜绿假单胞菌这5年的总耐药率在10.4%到18.5%之间，总体来说并不算高，2007年的耐药率在11.2%到21.6%之间，低于2007年中国CHINET铜绿假单胞菌的耐药性监测报道的18.7%到40.1%[1]。2009年的耐药率在4.6%到21.7%之间低于2009中国CHINET铜绿假单胞菌的耐药性监测报道的14.8%到30.9%[5]。这可能与地区差异有关，东莞外来务工人员较多，流动性大，年龄以中青年为主，其他因素有待进一步探讨。

[1]孙景勇,倪语星,汪 复,等.2007年中国CHINET铜绿假单胞菌耐药性监测[J].中国感染与化疗杂志,2009,5(3):192-195.

[2]张丽华,张 丽,李超强,等.东莞东华医院2007年细菌耐药性监测[J].中国感染与化疗杂志,2008,8(5)379-382.

[3]Pai H,Kim JW,Kim J,et al.Carbapenem resistance mechanisms in Pseudomonas aeruginasa clinical islates[J].Antimicrob Agents Chemother,2001,45(2):480-484.

[4]黄支密,单 浩,郭满盈,等.多重耐药铜绿假单胞菌耐药基因及亲缘性分析[J].中华医院感染学杂志,2007,17(4):366-369.

[5]张 博,倪语星,孙景勇,等.2009中国CHINET铜绿假单胞菌细菌耐药性监测[J].中国感染与化疗杂志,2010,10(6):436-440.

Distribution and antibiotic resistance of P.aeruginosa isolates from 2006 to 2010

CHEN Jianan, ZHOU Jing,ZHANG Lihua,et al.Tungwah Hospital of Sun Yat-Sen University,Guangdong Dongguan 523110,China

ObjectiveTo analyze the distribution and drug resistance of P.aeruginosa isoltated in Tungwah Hospital for using antibiotic correctly.MethodsAutomated microbe analyzer(VITEK32)was used to analyze antibiotic susceptibility by means of Kirty-Bauer method.ResultsA total of 646 strains of P.aeruginosa,mainly from respiratory tract(65.9%),were isolated during five years.These strains showed the highest resistance(18.5%)to levofloxacin,followed by gentamicin(18.1%),imipenem(18.0%)and meropenem(13.7%).The sensitivity to tobramycin was the highest(88.2%),followed by piperacillin-tazobactam (88.1%)and ceftazidime(87.0%).ConclusionP.aeruginosa,with rising resistance rate,is the main pathogen of nosocomial infections.

P.aeruginosa；Drug resistance；Infection

R378.99+1,R446.5,Q939.92

B

1674-1129(2011)05-0539-02

10.3969/j.issn.1674-1129.2011.05.028