于志彬,马玉青,迟建,田益玲
(河北农业大学食品科技学院,河北 保定 071001)
燕麦中多酚类物质提取条件的研究
于志彬,马玉青,迟建,田益玲*
(河北农业大学食品科技学院,河北 保定 071001)
以燕麦为原料,采用酒石酸铁比色法测定多酚含量,研究燕麦多酚的提取条件。通过试验对影响燕麦中多酚提取效果的各因素进行研究,结果表明:提取效果最好的试剂为甲醇,燕麦总多酚提取的最佳工艺条件为:甲醇浓度为85%(体积分数),提取温度80℃,提取时间15 min,料液比1∶7(g/mL)。
燕麦;多酚;提取
酚类化合物广泛存在于植物食品中,植物多酚(Plant Polyphenol)又名植物单宁(Vegetable Tannin),为植物体内的复杂酚类次生代谢物。国内外研究表明,燕麦中含有多种天然抗氧化物,如各种酚类化合物(包括阿魏酸、香草酸、芥子酸和香豆酸等酚酸的衍生物)、燕麦生物碱、黄酮类、植酸类化合物及甾醇都对人体具有一定的保健作用[1],多酚可用在保健食品中,通过清除人体内过多的氧自由基而起到强身健体的功效;也可用于普通食品中,作为抗氧化剂延长食品的货架期[2]。本试验对燕麦中多酚提取条件的研究,确定最佳提取工艺条件,以期为燕麦天然抗氧化剂的开发提供理论参考。
燕麦:河北康希燕麦食品有限公司;甲醇、乙醇、丙酮、正己烷、四氢呋喃、磷酸二氢钾、磷酸氢二钠、亚硫酸铁、酒石酸钾钠:天津化学试剂公司,均为分析纯;没食子酸对照品:科翔生物有限公司。
UV1100分光光度计:上海天美科学仪器有限公司;TGL-18B-C高速台式离心机:上海安亭;小型高速中药粉碎机:浙江温岭市铭大药材机械设备有限公司。
1.3.1 样品预处理
将燕麦米中的坏粒、杂物等挑选后,在中药粉碎机中粉碎后过200目筛。
1.3.2 标准曲线的绘制
准确称取没食子酸0.500 g,加蒸馏水溶解并移入100 mL容量瓶中,配制成5.0 g/L没食子酸原液。分别移取 5.0 g/L 没食子酸原液 0、1、2、3、5、10 mL,加蒸馏水定容至 100 mL,分别配制成浓度为 0、50、100、150、250、500 mg/L工作曲线标准液。各吸取1 mL试液于25mL容量瓶中,加蒸馏水4mL和酒石酸亚铁溶液5mL(酒石酸亚铁配制),充分混合,再加pH值7.5磷酸盐缓冲液(缓冲液配制)至刻度,以试剂空白溶液作参比,在波长540 nm处测吸光度A[3]。
1.3.3 正交试验确定最佳提取参数
本研究采用正交试验确定燕麦多酚最佳提取参数。正交试验因素水平见表1。
表1 燕麦多酚提取因素水平表L9(34)Table1 FactorsandvaluesofexploitationofpolyphenolinoatL9(34)
利用1.3.2中配制的工作曲线标准液,绘制燕麦多酚类物质的标准曲线,其线性回归方程为Y=0.04+0.1551X(式中:X为燕麦多酚浓度,(g/L);Y为吸光度),回归系数R=0.9994。
2.2.1 溶剂种类的影响
根据资料,在对多酚类物质提取中常用的有机溶剂有四氢呋喃(极性参数 4.2)、甲醇(极性参数 6.6)、乙醇(极性参数 5.2)、丙醇(极性参数 3.9)和丙酮(极性参数5.4)。本试验将上述有机溶剂分别采用体积分数为50%的对燕麦多酚类物质进行提取,结果如图1所示。
由图1可以看出,在相同提取条件下随着有机溶剂极性参数的增加,对燕麦中的多酚类提取率越高。因此,在燕麦多酚提取中选择甲醇为有机提取溶剂。
2.2.2 甲醇浓度对燕麦多酚提取的影响
甲醇作为燕麦最佳有机提取剂,本研究考察了60%、70%、80%和90%的甲醇溶液对燕麦中的多酚进行提取,结果如图2所示。
由图2可知,随着甲醇浓度的提高,燕麦多酚的提取量明显增加,但是当甲醇浓度达到90%后提取增加率明显减缓,考虑到提取成本问题,提取燕麦多酚类物质甲醇的浓度以90%为宜。
2.2.3 温度对燕麦多酚提取的影响
在不同温度下,采用体积分数为90%的甲醇对燕麦中的多酚类物质进行提取,结果见图3。
由图3可知,随着提取温度的升高,燕麦多酚的提取量逐渐增加,而当温度达到80℃达到了最高点。这是因为高温可以提高溶质中多酚的扩散速率,分子运动速度加快,键更容易断裂,多酚的渗透、溶解、扩散速度也加快,而酚类物质更容易从原料中浸出[2];但是当温度继续升高,多酚的氧化速度增加,这样使提取出的多酚类物质被氧化而表现出明显的降低,故选择80℃为浸提温度。
2.2.4 时间对燕麦多酚提取的影响
用体积分数为90%的甲醇、在温度为80℃的条件下对燕麦多酚进行提取,提取时间分别为10、20、30和40 min,结果如图4所示。由图4可知:提取时间越长,燕麦多酚的提取量越高。但当提取时间增加到20 min后,提取量急剧下降。这可能是在一定范围内,延长浸提时间,有利于燕麦中多酚物质的浸出,但若浸提时间过长,可能会引起多酚物质的缩合,或者被空气中的氧气氧化,造成提取量反而降低[2]。所以,选择浸提的时间为20 min。
2.2.5 料液比对燕麦多酚提取的影响
用体积分数为90%的甲醇,在80℃条件下水浴20 min,对燕麦多酚类物质进行提取,提取的料液比分别是 1∶5、1∶10、1∶15 和 1∶20(g/mL),结果见图 5。
由图5可知,随着料液比的增加,燕麦多酚的提取量呈上升趋势。当料液比1∶5的时候,燕麦多酚的提取量最多。因此,1∶5为燕麦多酚类物质提取的合适料液比。
燕麦多酚提取量受料液比、提取时间、提取温度和试剂浓度4个因素交叉影响,因此在单因素试验的基础上,采用L9(34)正交设计进行正交试验,结果见表2。
表2 L9(34)正交试验极差分析Table2 The experiment results of ultramicro L9(34)and differential analysis
从表2中可知,对燕麦中多酚类物质提取,在确定溶剂的情况下,提取温度>提取时间>料液比>甲醇浓度。根据效应曲线图可知燕麦中多酚的最佳提取条件是甲醇浓度85%,提取温度80℃,提取时间15 min,料液比 1∶7(g/mL)。
通过试验,可以看出:燕麦多酚类物质的提取,甲醇的提取量是最大的;燕麦多酚类物质最佳提取条件是甲醇浓度85%(体积分数),提取温度80℃,提取时间 15 min,料液比 1∶7(g/mL)。
[1]修娇,马涛,韩立宏,等.燕麦保健功能及其应用[J].食品科学,2005,26(增刊):109-111
[2]鲁晓翔,赵晨光,连喜军.板栗壳多酚提取条件及其抗氧化性研究[J].食品研究与开发,2008(3):32-36
[3]朱登祥,尉连玲,侯志敏.葡萄籽中多酚类物质提取工艺研究[J].安徽农业科学,2008,36(17):7068-7070
A Study on the Extraction of Polyphenols in Oat
YU Zhi-bin,MA Yu-qing,CHI Jian,TIAN Yi-ling*
(College of Food Science,Agricultural University of Hebei,Baoding 071001,Hebei,China)
A new extracting technique for polyphenol from oat was conducted using oat as raw material.The content of polyphenol in oat had been measured by tartrate-Fe method.To optimize the conditions for the extraction of polyphenols from oat,extraction was studied by single factor experiment.Thus,the feasible conditions for extraction of oat polyphenol were determined to be methanol concentration 85%at 80℃for 15 min and the ratio of solid to liquid as 1∶7(g/mL).This study provided a good-way for the exploitation and using of the by product of the oat.
oat;polyphenol;extraction process
河北省科技支撑计划项目(07221015)
于志彬(1978—),女(汉),讲师,本科,从事食品安全研究。
*通讯作者:田益玲(1974—),女(汉),副教授,硕士,从事粮油深加工及食品添加剂的开发与研究。
2009-08-03