苦参素对肝炎后肝硬化患者外周血T细胞亚群和肝纤维化指标的影响

钱文杰

(浙江省乐清市第二人民医院消化科，浙江 乐清 325608）

肝炎后肝硬化患者存在外周血T淋巴细胞功能失调，表现为CD3+和 CD4+细胞减少，CD8+细胞增加，CD4+/CD8+比值降低[1]。苦参素是从中药苦豆子中提取的一种生物碱，具有抗炎、免疫调控、抗纤维化、降酶、退黄等药理作用和临床功能，对乙型肝炎后肝硬化治疗效果肯定[2-3]，但国内外关于其对乙型肝炎后肝硬化患者外周血T细胞亚群的调节作用报道较少。笔者以乙型肝炎后肝硬化患者为研究对象，观察苦参素对其外周血T细胞亚群CD4+和CD8+及肝纤维化指标的影响，现报道如下。

1 资料与方法

1.1 一般资料

选择2007年1月至2008年10月在我院治疗的乙型肝炎后肝硬化患者40例作为治疗组，均符合2000年9月西安全国传染病与寄生虫病学术会议制订的《肝硬化诊断标准》[4]，其中男28例，女 12例；年龄 21～68岁，平均（41.5±9.7）岁；抗 HAV-IgM、抗HCV、抗HEV和抗HGV均阴性；排除自身免疫性肝炎、药物性肝炎和脂肪肝。另选择正常健康体检者30例作为对照组，其中男20例，女 10例；年龄 19～61岁，平均（39.2±8.9）岁。

1.2 治疗方法

治疗组在保肝、利尿、补充电解质等一般性治疗基础上加用苦参素(氧化苦参碱胶囊，宁夏药物研究所)300 mg口服，3次/d，疗程3个月。在治疗前和治疗3月后检测患者外周血T细胞亚群CD4+和CD8+及肝纤维化指标。对照组上述指标只测定1次。

1.3 观察指标及方法

T细胞亚群：采用碱性磷酸酶法检测患者外周血T细胞亚群CD4+和CD8+及CD4+/CD8+比值，试剂购自北京军事科学院，具体步骤按试剂说明书进行操作。肝纤维化指标：采用放射免疫分析法检测透明质酸(HA)、!型前胶原(PC!)、"型胶原(".C)、层粘蛋白(LN)，试剂由海军医学研究所提供。

1.4 统计学方法

结果用均数±标准差(X±s)表示，以SPSS 10.0软件包进行统计分析，采用 t检验。

2 结果

2.1 外周血T细胞亚群变化

结果见表1。与对照组比较，治疗组治疗前外周血CD4+明显减少，CD8+明显增加，CD4+/CD8+比值下降；治疗后外周血CD4+明显增加，CD8+明显减少，CD4+/CD8+比值明显增加。

2.2 肝纤维化指标变化

结果见表2。与治疗前比较，治疗组治疗后肝纤维化指标均明显下降(P＜0.05或 P＜0.01)。

表1 对照组与治疗组治疗前后外周血T细胞亚群的变化(X±s)

表2 治疗组治疗前后肝纤维化指标的变化(X±s)

3 讨论

乙型肝炎后肝硬化是乙型肝炎病毒（HBV）引起肝损伤，导致肝纤维化并逐渐加重的结果，如早期进行干预性治疗可阻止或延缓肝硬化的发生。苦参素注射液中98%以上为氧化苦参碱。动物研究发现，氧化苦参碱有抗HBV作用，可降低HBV转基因鼠肝脏内乙型肝炎病毒表面抗原和e抗原（HBsAg和HBeAg）的含量，使Th1型细胞因子水平明显升高，Th2型细胞因子水平明显降低[5]。

HBV感染后出现不同临床转归的机制目前尚不完全清楚，可能取决于病毒和宿主两方面的因素。国内外研究显示，宿主的细胞免疫功能特别是HBV特异性的CD4+和CD8+T细胞反应对HBV的清除和疾病的转归有重要影响[1，6]。CD4+和CD8+是T淋巴细胞中具有重要功能的两个亚群，可以反映机体基本的细胞免疫状态，CD4+/CD8+比值可在一定程度上反映机体细胞免疫调节功能。针对HBV的CD4+或CD8+T细胞反应是决定HBV感染患者预后的关键因素。对CD4+或CD8+细胞删除黑猩猩HBV感染模型研究发现，通过细胞溶解或非溶解机制是CD8+细胞清除机体感染HBV的主要方式，而CD4+细胞通过分泌Th1细胞因子抑制HBV复制[7]。由本研究结果可知，乙型肝炎后肝硬化患者存在外周血T细胞亚群紊乱，经过苦参素治疗3个月后有明显改善，表明苦参素能通过调节外周血T细胞亚群紊乱，提高细胞免疫反应，有效抑制HBVDNA的复制，从而清除细胞内病毒。这与吴炳权等[8]报道相符。

纤维化是慢性肝病重要的病理特征，也是进一步向肝硬化发展的中间环节。其发生的主要机制是细胞外基质(ECM)的过度增多和异常沉积导致肝脏正常结构的破坏与重构及肝功能的损伤[9]。近年来对肝组织学和血清肝纤维化指标相关性的研究结果表明，血清肝纤维化指标和肝组织纤维化程度有良好的相关性，并与肝组织纤维化发展的阶段性相一致[10]，故检测血清肝纤维化指标ECM产物(HA，LN，PC"，#.C)的含量可客观地推测肝细胞损伤及纤维化程度。本研究结果显示，治疗组患者经过苦参素治疗3个月后，肝纤维化指标较治疗前均明显下降。推测治疗后患者肝内ECM合成、胶原合成被抑制，纤维化程度得以改善，提示苦参素对肝纤维化有一定疗效，与薛桂芹等[3]的报道一致。

综上所述，肝炎后肝硬化患者存在外周血T细胞亚群紊乱，苦参素能通过调节外周血T细胞亚群紊乱，提高细胞免疫反应，有效抑制HBV-DNA病毒的复制，降低患者血清中肝纤维化指标水平，进而达到清除细胞内病毒、防治肝纤维化的目的。

[1]赵彩彦，刘金星，汤慧花.肝硬化和肝癌患者血清IL-2系统、IL-6、T细胞亚群的变化和意义[J].中华消化杂志，1999，19(1):68-69.

[2]喻志标，黄建荣，黄经球，等.苦参素药理毒理与临床应用研究进展[J].药品评价，2005，2(6):455-458.

[3]薛桂芹，马文娜.苦参素注射液治疗乙型肝炎肝硬化62例疗效观察[J].菏泽医专学报，2004，16(3):1-2.

[4]中华医学会传染病与寄生虫病学分会、肝病学分会.病毒性肝炎防治方案[J].中华肝脏病杂志，2000，8(5):324-329.

[5]董宇红，席宏丽，田 枫，等.苦参素对HBsAg转基因小鼠血清Th1和Th2细胞因子水平的影响[J].中华实验和临床病毒学杂志，2004，18(3):277-280.

[6]Alatrakchi N，Koziel MJ.Antiviral T-cell responses and therapy in chronic hepatitis B[J].J Hepatol，2003，39(4):631-634.

[7]Thimme R，Wieland S，Steiger C，et al.CD8(+)T cells mediate viral clearance and disease pathogenesis during acute hepatitis B virus infection[J].J Virol，2003，77(1):68-76.

[8]吴炳权，王娅玲，陈妙天，等.苦参素对肝炎后肝硬化T细胞亚群的影响[J].浙江中西医结合杂志，2006，16(5):270-271.

[9]王吉耀.重视肝纤维化的基础与临床研究[J].中华医学杂志，2005，85(15):1 009-1 010.

[10]薛爱玲，胡益民，高宗玲.病毒性肝炎病人血清纤维化标志检测及其意义[J].中国基层医药，2004，11(4):453-454.