王丽彦
(长春市食品药品检验所,吉林 长春 130012)
*王丽彦,E-mail:wgb654321@yahoo.cn
HPLC测定抗骨增生片中淫羊藿苷的含量
王丽彦*
(长春市食品药品检验所,吉林 长春130012)
目的建立高效相液色谱法测定抗骨增生片中淫羊藿苷的含量。方法采用十八烷基键合硅胶为填充剂色谱柱(4.6mm×150mm,5μm),以乙腈-水(25∶75)为流动相,检测波长为270nm。结果淫羊藿苷的回归方程为Y=1490.44X-12.4236(r=1.0000),线性关系良好;平均回收率为99.5%。结论该方法操作简便,结果准确,可用于抗骨增生片中淫羊藿苷的含量测定。
抗骨增生片;淫羊藿苷;高效液相色谱法
抗骨增生片收载于《卫生部药品标准·中药成方制剂》第七册中,由熟地黄、鹿衔草、骨碎补(烫)、鸡血藤、肉苁蓉、淫羊藿、莱菔子7味药组成。具有补肾,活血,止痛的功能。用于肥大性脊椎炎,颈椎病,跟骨刺,增生性关节炎,大骨节病。原标准中无定性、定量分析项目,不能有效控制成药质量。本实验建立高效液相色谱法测定抗骨增生片中淫羊藿苷的含量,结果表明方法专属性较强,能够有效地控制抗骨增生片的质量。
1.1仪器
HP1100高效液相色谱仪(美国安捷伦公司),Agilent-C18色谱柱(4.6mm×150mm,5μm),GR-202电子天平。
1.2试药
淫羊藿苷对照品(中国药品生物制品检定所,批号110737-200312,供含量测定用)。抗骨增生片(吉林省罗邦药业有限公司,批号见表2,含淫羊藿0.67mg/片),乙腈为色谱纯。
2.1色谱条件
流动相:乙腈-水(25∶75);流速:1.0mL·min-1;进样量:10μL;柱温:25℃;检测波长:270nm;理论板数按淫羊藿苷峰计算应不低于1500。
2.2对照品溶液的制备
精密称取淫羊藿苷对照品适量,加甲醇溶解,制成1mL含淫羊藿苷0.04mg的溶液,即得。
2.3供试品溶液的制备
取本品20片,除去糖衣,研细,取约3g,精密称定,置100mL量瓶中,加稀乙醇超声处理1h,放冷至室温加稀乙醇稀释至刻度,滤过,取滤液即得。
2.4阴性对照溶液的制备
取按处方比例制成除去淫羊藿的阴性对照样品,按供试品溶液的制备方法制成阴性对照溶液。
2.5系统适应性试验
分别吸取对照品溶液、供试品溶液、阴性对照溶液各10μL,注入色谱仪,同法测定,结果在淫羊藿苷峰相应位置上,阴性对照无干扰,结果见图1~3。
图1 淫羊藿苷对照品HPLC图
图2 抗骨增生片HPLC图
图3 缺淫羊藿的阴性对照HPLC图
2.6线性关系
精密量取淫羊藿苷对照品溶液2,5,10,15,20,50μL注入色谱仪,记录色谱图,以峰面积Y对进样量X(μg)进行线性回归,得淫羊藿苷回归方程Y=1490.44X-12.4236,r=1.0000,结果表明淫羊藿苷在0.08~2μg线性关系良好。
2.7精密度试验
取同一对照品溶液,连续进样6次,测得淫羊藿苷峰面积的RSD=0.4%,表明精密度良好。
2.8重现性试验
取样品(批号20080607),精密称定6份,按2.3项下方法测定淫羊藿苷含量的RSD=0.7%,表明本方法重复性良好。
2.9稳定性试验
取同一供试品溶液,于0,2,4,6,8,12,24h,分别测得淫羊藿苷峰面积的RSD=1.3%,表明供试品溶液在24h内稳定。
2.10加样回收率试验
精密称取含量已测定的供试品(批号20080607,含淫羊藿苷为0.67mg·片-1),分别置于6个100mL量瓶中,精密加入淫羊藿苷对照品溶液(2.803mg·mL-1)1mL,按2.3项下方法测定淫羊藿苷的含量,计算加样回收率,结果见表1。
2.11样品含量测定
分别吸取对照品溶液、供试品溶液各10μL,注入色谱仪,记录色谱图,测定10批样品的含量,结果见表2。
表1 淫羊藿苷加样回收率试验
注:淫羊藿苷对照品加入量均为2.803 mg
表2 抗骨增生片中淫羊藿苷含量测定 mg/片
[1] 国家药典委员会.中国药典(一部)[S].北京:化学工业出版社,2005:229.
DeterminationofIcariininKangguzengshengTabletsbyHPLC
Wang Liyan
(ChangchunInstituteforFoodandDrugControl,ChangchunJilin130012,China)
Objective: To establish a HPLC method for determination the content of icariin in Kangguzengsheng tablets.MethodsAn Agilent C18column (250mm×4.6mm,5μm) was used, the mobile phase was consisted of acetonituile-water(25∶75) at a flow rate of1.0mL·min-1. UV detection wavelength was270nm.ResultsThe calibration curve of Icariin wasY=1490.44X-12.4236(r=1.0000),and the average recovery was99.5%(n=6).ConclusionThe methed is simple, accurate. It can be used for quality control of Kangguzengsheng tablets.
Kangguzengsheng tablets;Icariin;HPLC
2009-09-02)