王长江,赵宁红,周晓红
(嘉兴学院医学院附属第二医院药剂科,浙江 嘉兴 314000)
定喘口服液由麻黄、桂枝、半夏等9味中药组成,麻黄为平喘止咳化痰药,效果确切。笔者采用溴甲酚绿分光光度法[1-2]测定麻黄碱含量,较溴麝香草酚兰比色法操作更为简单,避免了水蒸馏时的操作误差,抗干扰效果更好,现报道如下。
756-PC型分光光度计,pH计。盐酸麻黄碱标准对照品(中国药品生物制品检定所),定喘口服液(本院自制,批号分别为080102,080331,080529),磷酸盐缓冲液(pH=5.0),氯仿(分析纯)。
精密称取70℃干燥至恒重的盐酸麻黄碱对照品适量,加水溶解,制成每1 mL含0.050 mg盐酸麻黄碱的溶液,即得对照品溶液。同法制成缺盐酸麻黄碱的阴性对照品溶液。
取定喘口服液和阴性对照品溶液各5 mL,分别置50 mL量瓶中,加水至刻度,摇匀。精密量取上述两种溶液各1 mL和盐酸麻黄碱对照品溶液1 mL,分别置分液漏斗中,加pH为5.0的磷酸盐缓冲液1 mL和0.1%溴甲酚绿溶液5 mL,混匀,静止5 min,分别用氯仿10 mL萃取2次,每次摇匀1 min,放置10 min,合并2次萃取液,置25 mL量瓶内,精密加NaOH-乙醇溶液2 mL,再加氯仿至刻度。用紫外分光光度仪在500~700 nm波长间扫描吸收光谱。结果在625 nm波长处,对照品溶液和定喘口服液有最大吸收,而阴性对照品溶液无吸收(图1)。
标准曲线绘制:精密吸取盐酸麻黄碱对照品溶液0.5,1.0,1.5,2.0,2.5,3.0 mL,按试验方法进行操作,换算成样品的质量浓度,得标准曲线 A=0.570 14 C+0.150 86,r=0.999 4,结果表明线性范围为0.250~1.500 g/L。
精密度试验:取对照品溶液,按试验方法,重复测定5次。结果的RSD为 0.52%(n=5),表明精密度良好。
图1 紫外吸收光谱图
重现性试验:取批号为080102的样品5份,依法测定含量。结果平均含量为0.482 g/L,RSD=1.10%(n=5)。
pH选择:按试验方法操作,分别加入pH为3.5,4.4,4.5,5.0,5.5,5.8的磷酸盐缓冲液。当pH为5.0时,在625 nm波长处阴性对照品溶液几无吸收,而样品溶液有较大吸收,且峰形良好。
稳定性试验:按试验方法进行操作,显色后放置0.5,1.0,2.0,4.0 h,测定其吸光度,结果的 RSD=1.029%(n=4),表明该溶液在显色后4 h内稳定。
加样回收试验:取已知含量的同一批(批号为080102)定喘口服液5 mL,稀释10倍,精密吸取1 mL,分别加入盐酸麻黄碱对照品溶液(质量浓度为0.050 g/L)0.5,1.0,1.5 mL,各制备2份,按照吸收光谱测定法操作,测得回收率,结果见表1。
表1 盐酸麻黄碱加样回收试验结果(n=6)
取不同批号的3批定喘口服液,按吸收光谱测定法进行含量测定,结果批号为080102,080331,080529的3批样品中,麻黄碱含量分别为 0.482,0.519,0.504 g/L(n=5)。
溴甲酚绿染色法较常用于测定莨菪碱类含量[3],笔者以其测定麻黄碱含量,方法操作简单易控,结果准确,适合于定喘口服液的含量测定。但操作过程中应严格控制定喘口服液和盐酸麻黄碱对照品溶液的pH在5.0左右。
[1]柯良江,马辉明.紫外分光光度法测定半夏露中盐酸麻黄碱的含量[J].中成药,1997,19(10):20.
[2]陈叶琴.紫外分光光度法测定咳嗽合剂#中盐酸麻黄碱的含量[J].江苏药学与临床研究,2004,12(2):18.
[3]沈卫华,陈正良,林小文.分光光度法测定颠茄合剂中莨菪碱的含量[J].中国医院药学杂志,2006,26(2):908.