气相色谱法测定羟丙甲纤维素中甲氧基和羟丙氧基含量

李赐恩，叶 芳，张敏怡，梁凤坤，岑剑晖

（1.广州中医药大学第一附属医院，广东 广州 510405； 2.中山大学第一附属医院，广东 广州 510080）

气相色谱法测定羟丙甲纤维素中甲氧基和羟丙氧基含量

李赐恩1，叶 芳2，张敏怡2，梁凤坤1，岑剑晖1

（1.广州中医药大学第一附属医院，广东 广州 510405； 2.中山大学第一附属医院，广东 广州 510080）

目的 建立测定羟丙甲纤维素中甲氧基和羟丙氧基含量的气相色谱法。方法 将羟丙甲纤维素和氢碘酸共同加热反应，产生挥发性的碘甲烷和2-碘丙烷，注入气相色谱仪进样，采用Agilent DB-624柱（30 m×0.53 mm，1.0!m），火焰离子化检测器（FID），通过测得碘甲烷和2-碘丙烷的量折算得到甲氧基和羟丙氧基的含量。结果 所建立的气相色谱法有良好的分离度，在所考察的浓度范围内各溶剂的峰面积与浓度线性关系良好。结论 气相色谱法较药典方法更灵敏、更准确，可用于羟丙甲纤维素中甲氧基和羟丙氧基的含量测定。

羟丙甲纤维素；甲氧基；羟丙氧基；气相色谱法

Abstract：Objective To establish a method to determine the methoxy and hydroxyproxy in hydroxypropyl methylcellulose by gas chromatography.Methods Hydroxypropyl methylcellulose and hydriodic acid were heated together.The reaction products，methyl iodide and 2-propyliodide，were assayed by gas chromatography.Agilent DB-624 capillary column and FID were used.Results The peaks of methyl iodide and 2-propyliodide were separated well.The good linear correlations were obtained during the detection.Conclusion The method is proved to be sensitive and accurate.It can be used for the determination of methoxy and hydroxyproxy in hydroxypropyl methylcellulose.

Key words：hydroxypropyl methylcellulose；methoxy；hydroxyproxy；gas chromatography

羟丙甲纤维素（hydroxypropyl methylcellulose，HPMC）是一种优良的药用辅料，具有其他许多辅料所不具备的特性，如优异的冷水水溶性、较强的抗敏性和代谢惰性等，可作为薄膜包衣材料，也可作为黏合剂、崩解剂，还可作为固体制剂促溶出和缓释、控释的材料，是目前国内外用量最大的辅料之一[1-2]。HPMC因甲氧基和羟丙氧基两种取代基含量不同而有多种型号的产品，一般通过测定甲氧基和羟丙氧基含量以控制其质量。笔者将HPMC和氢碘酸共同加热反应，采用气相色谱法测定衍生出的碘甲烷和2-碘丙烷，从而折算出HPMC中甲氧基和羟丙氧基的含量，现报道如下。

1 仪器与试药

Agilent GC-6890N型气相色谱仪（检测器为FID）。羟丙甲纤维素（湖州展望药业有限公司，批号分别为200603037，200603038，200603039）；碘甲烷（中国海川化学品有限公司，含量为99.8%，批号为 051120）；2-碘丙烷（含量为 99.5%，批号为 A0253547）、氢碘酸（批号为A0249573）均为Acros Organics BVBA产品；正辛烷（天津华真特种化学试剂厂）；己二酸（国药集团化学试剂有限公司）。

2 方法与结果

2.1 色谱条件

色谱柱：Agilent DB-624柱（30 m ×0.53 mm，1.0!m），Varian CP-624柱（30 m×0.53 mm，3.0!m）；柱温：150℃；进样口温度：200 ℃ ；检测器温度：260 ℃；流速：3.0 mL/min；分流比：5 ∶1；载气：氮气；进样量：1!L。

2.2 溶液制备

取正辛烷0.5 g，置100 mL量瓶中，加邻二甲苯溶解并稀释至刻度，摇匀，即得内标溶液。取70 mg己二酸，置10 mL顶空瓶中，分别精密加入内标溶液和氢碘酸溶液各2.0 mL，密封，精密称定；用注射器加入碘甲烷38!L，精密称定，即为加入碘甲烷的质量；再同法加入2-碘丙烷8!L，精密称定，即为加入2-碘丙烷的质量；振摇，静置，取上层液体即得对照品溶液。取干燥供试品约60 mg，精密称定，置反应瓶中，加入70 mg己二酸，并分别精密加入内标溶液和氢碘酸溶液各2.0 mL，密封，135℃反应30 min，振摇2 min，135℃继续反应30 min后，静置，冷却至室温，取上层液体作为供试品溶液。

2.3 方法学考察

系统适用性试验：取制备的对照品溶液1.0!L，注入气相色谱仪，各峰分离度符合规定，结果见图1 A。

专属性试验：按对照品溶液制备方法，分别制备不加对照品的阴性对照品溶液和内标、对照品都不加的空白溶液，取1.0!L注入气相色谱仪，记录色谱图，结果显示空白无干扰（图1 B）。

耐用性试验：分别考察己二酸加入量、反应温度和反应时间对HPMC中甲氧基和羟丙氧基测定结果的影响。按供试品溶液制备方法，己二酸的加入量分别为0，50，70，90 mg（每种浓度各3份），取所得上层液体1.0!L注入气相色谱仪，记录色谱图，结果显示不加己二酸的测定结果偏低，加入50～90 mg己二酸的测定结果较一致。按供试品溶液制备方法，分别反应50，60，70 min，静置冷却至室温后，取所得上层液体1.0!L注入气相色谱仪，记录色谱图，结果显示反应时间在50～70 min范围内测定结果一致。按供试品溶液制备方法，分别在120，135，150℃反应，静置冷却至室温后，取所得上层液体1.0!L注入气相色谱仪，记录色谱图，结果显示120℃时的测定结果偏低，而135℃和150℃时的测定结果一致。

线性关系考察：按对照品溶液制备方法，用注射器分别加入碘甲烷 30，34，38，42，46!L，同法分别对应加入 2- 碘丙烷 4，6，8，10，12!L，取上层液体1.0!L注入气相色谱仪，记录色谱图，结果甲氧基质量浓度范围为7.632～11.703 g/L，回归方程为 Y=0.062 9X+0.003 9，r=0.999 2；羟丙氧基质量浓度范围为1.321～3.963g/L，回归方程为 Y=0.0537X+0.0051，r=0.9996。

回收率试验：取干燥供试品约30 mg，精密称定，置反应瓶中，加入己二酸70 mg，再精密加入内标溶液和氢碘酸溶液各2.0 mL，用注射器分别加入3种不同量的碘甲烷和相应的2-碘丙烷（每种浓度各2份），加热反应1 h后，静置至室温，取上层液体1.0!L注入气相色谱仪，记录色谱图，结果见表1。

图1 气相色谱图

表1 回收率试验结果（n=6）

精密度试验：按对照品溶液制备方法，用注射器加入碘甲烷38!L和2-碘丙烷8!L，取上层液体1.0!L连续进样6次，计算各组分峰面积的 RSD，结果碘甲烷的 RSD为0.9%，2-碘丙烷的 RSD为 0.6%（n=6）。

稳定性试验：取批号为200603037的供试品溶液，分别在0，3，6，12，24 h进样测定，考察溶液稳定性。因碘甲烷和2-碘丙烷的挥发性均较大，6 h后测定结果开始偏低，所以制备的供试品溶液应及时进样。

定量限检测：精密量取适量对照品溶液，用邻二甲苯溶液稀释，进样，以各组分峰达信噪比的3倍和10倍时的量为最低检测限和最低定量限，结果甲氧基的最低检测限为0.718!g/mL，最低定量限为2.152!g/mL，羟丙氧基的最低检测限为1.210!g/mL，最低定量限为3.628!g/mL。

2.4 样品含量测定

按本测定方法和2005年版《中国药典（二部）》收载的方法[3]同时测定 3批（批号分别为 200603037，200603038，200603039）供试品，结果表明用本方法测定的效果更好。两种测定方法的测定结果见表2。

表2 3批供试品的含量测定结果（%）

3 讨论

HPMC质量标准广泛收载于各国药典中，《欧洲药典》和《英国药典》的HPMC质量标准中无甲氧基和羟丙氧基的含量测定项，2005年版《中国药典》[3]采用容量法测定羟丙氧基和甲氧基，先蒸馏再滴定，操作过程烦琐，准确度不高。笔者参照《美国药典》的有关规定，将原方法的填充柱改为毛细管柱。试验中所用的氢碘酸将甲氧基和羟丙氧基分别转变为碘甲烷和2-碘丙烷，浓度应不低于570 g/L，己二酸的作用是将HPMC中的羟基保护起来，使反应向生成碘甲烷和2-碘丙烷的方向定量进行，所用己二酸的量不应太少，否则会使测定结果偏低。与《中国药典》中方法相比，本方法更易于操作，准确度和重现性更高，可推广用于HPMC中甲氧基和羟丙氧基的含量测定。

[1]沈丽琳.羟丙甲纤维素在药物制剂方面的应用与研究[J].中国药业，2007，16（12）：66.

[2]张存彦，王成港，王 杰.新型胶囊囊材——羟丙甲纤维素[J].中国药学杂志，2005，40（12）：891-892.

[3]国家药典委员会.中华人民共和国药典（二部）.北京：化学工业出版社，2005：909.

Determination of Methoxy and Hydroxyproxy in Hydroxypropyl Methylcellulose by Gas Chromatography

Li Cien1，Ye Fang2，Zhang Minyi2，Liang Fengkun1，Cen Jianhui1
(1.First Affiliated Hospital，Guangzhou University of TCM，Guangzhou，Guangdong，China 510405；2.First Affiliated Hospital，Zhongshan University，Guangzhou，Guangdong，China 510080)

R927.2

A

1006－4931(2010）03－0027－02

2009－01－14；

2009－05－09）