盐酸左氧氟沙星在健康人体内的药代动力学研究

孙曼春，方世平，王智勇，吴建元，袁娴芬

（武汉大学中南医院，湖北 武汉 430071）

盐酸左氧氟沙星为氧氟沙星的左旋活性体，是第3代喹诺酮类抗菌药物，通过抑制细菌DNA回旋酶、破坏细菌DNA代谢而发挥作用。盐酸左氧氟沙星具有抗菌谱广、抗菌作用强的特点，临床广泛用于治疗呼吸道、泌尿道、肠道及皮肤软组织等多种系统感染[1]。笔者采用高效液相色谱（HPLC）法对盐酸左氧氟沙星在健康受试者体内的药代动力学进行了研究[2-6]，现报道如下。

1 仪器与试药

LC-90A型液相色谱仪（日本岛津），包括SPD-10A型紫外检测器、LC-10AD泵、千谱HW信号处理系统；XK-96A型旋涡混合器；Beckman GS-15R型高速冷冻离心机；AP-9901型真空泵；BF-2000型氮气吹干仪；FA2004型电子分析天平（上海恒平科学仪器有限公司）。盐酸左氧氟沙星对照品（含量为97.2%，中国药品生物制品检定所，批号为30455-200202）；盐酸左氧氟沙星片（商品名彼妥，广东彼迪药业有限公司，规格为每片100 mg，批号为20030512）；乙腈、二氯甲烷为色谱纯，磷酸、三乙胺、异丙醇为分析纯。

2 方法与结果

2.1 色谱条件

色谱柱：Diamonsil C18柱（250 mm ×4.6 mm，5 μm）；流动相：乙腈 -0.04 mol/L 磷酸 -三乙胺（2 ∶8 ∶0.02）；流速：1.0 mL/min；柱温：30℃；检测波长：298 nm。

2.2 受试者选择

选择无心、肝、肾、代谢异常等病史，无吸烟、饮酒等不良嗜好，无药物过敏史，试验前接受全面体格检查，且血常规、尿常规、肝功能、肾功能、心率、血压、心电图等均正常的健康男性志愿者20例，平均年龄（21.6±1.8）岁，平均身高（171.00±3.17）cm，平均体重（62.25±4.04）kg。试验方案与知情同意书经武汉大学医学院医学伦理委员会审核批准，受试者均签署知情同意书。

2.3 给药及样本采集方法

本研究为单剂量给药试验，受试者试验前1个月至试验期间不使用任何药物，于试验前1 d晚餐后开始禁食，试验当天晨间空腹口服试验药盐酸左氧氟沙星片200 mg，用200 mL温开水送服。服药2 h后方可饮水，4 h后统一进标准低脂饮食。试验期间忌烟、酒，禁饮含咖啡因类成分的饮料，避免剧烈活动和长时间卧床。服药前（0 h）及服药后 0.25，0.5，1，1.5，2，3，4，6，8，12，24 h 时采集上肢静脉血5 mL至肝素抗凝试管中，离心分离血浆，置-30℃避光冷冻贮存待分析。

2.4 血浆样品处理

取血浆0.5 mL，加pH为6.8的磷酸盐缓冲液0.2 mL，混匀，加入二氯甲烷-异丙醇（9∶1）5 mL，旋涡混匀，3000 r/min离心20 min，吸取有机相4 mL置清洁试管中，50℃水浴氮气流下吹干，用 100 μL 流动相溶解残渣，20 μL 进样。

2.5 血药浓度测定方法评价

在上述色谱条件下，色谱峰与血浆杂质峰分离良好，无干扰峰出现，盐酸左氧氟沙星保留时间约为5.7 min。取加入标准品的空白血浆 0.051，0.101，0.202，0.505，1.011，1.516，2.022，4.044 μg/mL，按上述血浆样品处理法处理，依法测定，得标准曲线方程 A=63.9257 C-1.18496，r=0.9993（ n=8）。结果表明盐酸左氧氟沙星血浆质量浓度在0.051～4.044 μg/mL范围内与峰面积线性关系良好。取盐酸左氧氟沙星低、中、高3个质量浓度（分别为0.051，0.505，2.022 μg/mL）的溶液进行回收率和日内、日间精密度考察，结果见表1。

表1 盐酸左氧氟沙星回收率及精密度试验结果

2.6 药代动力学参数

用DAS 1.0程序分别计算各受试者的有关药代动力学参数，受试药药 -时曲线下面积（AUCT）按梯形面积法计算，峰浓度（Cmax）和达峰时间（Tmax）均为实测值。20例健康受试者口服盐酸左氧氟沙星片后的血药浓度分别经DAS 1.0程序处理后，各主要药代动力学参数见表2。

表2 主要药代动力学参数（）

表2 主要药代动力学参数（）

参数吸收相半衰期（t1/2ka，h）消除相半衰期（t1/2β，h）分布相半衰期（t1/2α，h）表观分布容积（V d，L）0 ～24 h 药-时曲线下面积[AUC0→24，mg/（L·h）]0 ～ ∞ 药 - 时曲线下面积[AUC0→∞，mg/（L·h）]数值0.233±0.0609.628±5.2131.188±0.7261.795±0.91824.385±3.22229.866±3.892

2.7 血药浓度-时间曲线

20例健康受试者单剂量口服盐酸左氧氟沙星片200 mg后的平均血药浓度-时间曲线见图1。

图1 20例健康受试者平均血药浓度-时间曲线图

3 讨论

本试验采用HPLC法测定盐酸左氧氟沙星浓度，方法专属性高，线性范围包括了所有体内血药浓度实测数据点，高、中、低3个质量浓度水平的回收率均大于80%，日内及日间变异均小于10%，达到了生物样品测定的要求。

在确定色谱分离条件时，经系统比较，选用乙腈-0.04 mol/L磷酸-三乙胺（2∶8∶0.02，V/V）作流动相，盐酸左氧氟沙星与其他杂质峰分离良好。在样品预处理时，加入pH为6.8的磷酸盐缓冲液混匀后再加入二氯甲烷-异丙醇（9∶1）提取，选用的方法提取效果好，简便、准确，重现性好。

试验全过程在医生、护士的监护下进行，受试者均未见明显不良反应。

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