嘧菌酯残留量的气相色谱-质谱联用法测定研究

陈 涛 刘永波 崔 磊

（青岛市排水管理处，山东 青岛 266071）

嘧菌酯又名腈嘧菌酯，原药为棕色固体，M.P.114 116℃。纯品为白色结晶固体，M.P.116℃。相对密度 1.34，蒸汽压 1.1 ×10-7mPa（20℃）。水中溶解度 6mg/L（20℃），微溶于己烷、正辛醇，溶于甲醇、甲苯、丙酮，易溶于乙酸乙酯、乙腈、二氯甲烷。水溶液中光解半衰期为2 周，对水解稳定。嘧菌酯是一种甲氧基丙烯酸酯类杀菌剂，高效、广谱，对几乎所有的真菌纲害如白粉病、锈病、颖枯病等均有良好的活性。可用于茎叶喷雾、种子处理，也可进行土壤处理，主要用于谷物、水稻、花生、葡萄、马铃薯、果树、蔬菜、咖啡、草坪等。中国进出口检验检疫标准SN/T1976-2007 规定了用气相色谱法检测嘧菌酯残留。文献报道对嘧菌酯残留量的检验主要有气相色谱法、气质联用法、液相色谱法、液-质联用法，但气相色谱法测定易受基质干扰，造成假阳性；液相色谱法前处理过程复杂，成本较高，亦存在像气相色谱法类似的问题。国内尚未见用气质联用检测蔬菜、水果中嘧菌酯残留的文献报道。本文研究建立了气相色谱-质谱联用法测定蔬菜、水果中嘧菌酯残留量的分析方法，操作简便，定性准确，回收率高，重现性好。

1 试验部分

1.1 仪器与试剂

气-质联机Agilent 6890GC/5973MSD；均质器 IKA T18 basic；固相萃取柱：Cleanert Pesticarb-SPE 1000mg 6mL，Cleanert Florisil-SPE 1000mg 6mL；氮吹仪；六孔水浴锅；离心机TDL-40B-W 型；超声清洗器 SBS5200；食品加工器；电子天平；滤膜：0.22μm，有机相；

乙腈、丙酮、二氯甲烷、正己烷烷均为色谱纯试剂（德国Merck 公司）；

无水硫酸镁（AR），550℃～600℃烘4 h，存放于干燥器中；氯化钠（AR），350℃烘 6 h，存放于干燥器中。

嘧菌酯标准物质购自Sigma-Aldrich 公司（纯度99.3%）。

1.2 仪器分析条件

1.2.1 GC条件

?

色谱柱：DB-35ms 毛细管色谱柱（30.0m ×0.25mm i.d.× 0.25μm）；载气：He（99.999%）；流速：1.0 mL ·min-1；进样口温度：280℃；进样方式：脉冲不分流进样，20 psi，1.0 min；柱温：200℃ 25℃·min-1290℃ （hold 20.00 min）,Post run：295℃，5.4 min；Total：29.0 min；进样量：1.0μL；嘧菌酯保留时间：19.44 min。

1.2.2 MS条件

离子源：EI(70eV)；离子源温度：230℃；四极杆温度：150℃；接口温度：295℃；EM 电压：1812 V；采集方式：SIM；溶剂延迟：5.0 min；调谐方式：自动调谐。

1.3 样品处理

准确称取15.00 g 在食品加工器中加工好的样品于100 mL 聚四氟乙烯离心管中（事先加入3 g～4.5 g 氯化钠），加入30.0 mL 乙腈，在均质器中高速均质2.0 min。将均质好的样品罐放入离心机中，4000r/min 离心10min，离心完毕后，吸取乙腈相过一铺有滤纸的玻璃漏斗(滤纸上放3g～5g 无水硫酸镁)。准确量取10 mL 乙腈相溶液，放入25 mL 烧杯中，80℃水浴上用蒸汽加热，杯内缓缓通入氮气流吹动，蒸发近干，加入2.0 mL 二氯甲烷。将Florisil 固相萃取柱和Pesticarb 固相萃取柱串联，将二氯甲烷溶解的样品加到已条件化的固相萃取柱上，过柱净化，收集洗脱液放在氮吹仪上（水浴温度60℃），缓缓蒸发至近干，用二氯甲烷准确定容至2.0 mL，过0.22μm 滤膜，样品进GC-MS 分析。

2 结果与讨论

2.1 固相萃取柱使用的优点

固相萃取柱的使用克服了液-液萃取及一般柱层洗的缺点，使萃取、净化一步完成，而将Florisil 固相萃取柱和Pesticarb 固相萃取柱串联使用，则有效地消除了基质干扰和色素带来假阳性的影响，而且节省有机溶剂，最大限度地减少大量使用有机溶剂对环境造成的二次污染。

2.2 定性及定量离子的选择

定量及定性离子的选择应考虑以下几点：特征性高、质量数高、对称性高且重现性好、与柱流失碎片离子不同。鉴于以上条件，本方法选择 m/z344、m/z345、m/z372、m/z403 作为嘧菌酯的SIM 离子。其中m/z344 为定量离子，其余三个为定性离子。

2.3 检出限（LOD）的确定

检出限是衡量仪器或方法灵敏度的指标。它应低于目标化合物的最大残留限量（MRL）值，最好低一个数量级。最低检出限（LOD）是在色谱图上可清楚确认的分析目的物色谱峰的下限。通常为噪音的3 倍（S/N=3）。本方法中嘧菌酯的最低检出限为：0.0016mg ·kg-1。

2.4 标准曲线的绘制

准确称取嘧菌酯标准品50.00mg，转入10mL 容量瓶，用二氯甲烷定容至刻度线作为母液，于冰箱内保存。将母液用二氯甲烷稀释配成0.1，0.5，1.0，2.0，5.0μg ·mL-1 系列浓度的标准溶液。取系列浓度的嘧菌酯标准溶液1.0μL 进样测定。以峰面积为纵坐标，进样浓度为横坐标绘制标准曲线。嘧菌酯的标准回归方程为：Y（Response）=2.68 ×105X(Amt)－1.45 ×103,r=0.9999。

2.5 精密度和准确度

向不同基质样品如香葱、油菜、草莓、苹果中分别添加 0.1μg ·mL-1～1.0μg ·mL-1的嘧菌酯标准溶液，六次平行测定，平均回收率为88.0%～105.0%之间，相对标准偏差(RSD)<5.0%，符合农残分析要求。表1为香葱中添加嘧菌酯标样的回收率及相对标准偏差。

3 结论

该方法已成功运用到本实验室中多种蔬菜、水果样品的测定，与传统的气相色谱法和高效液相色谱法相比，具有快速方便，回收率和灵敏度高等优点，采用选择离子方式（SIM）有效地消除了基质干扰带来的假阳性，适用于接收样品的常规实验室分析。

[1]农业部农药检定所.农药残留量实用检测方法手册.第三卷[M].北京：中国农业科技出版社，2005.

[2]SN/T1976-2007 进出口水果和蔬菜中嘧菌酯残留量的检测方法-气相色谱法 [S].北京：中国标准出版社，2007.

[3]JAP-076 腈嘧菌酯检测方法[S].