银杏叶提取物对肉鸡免疫功能的试验

童金水

（福建龙岩农业学校，福建 龙岩 364000）

银杏叶提取物(Extracts Ginkgo bilobal，EGB)化学成分复杂，含有黄酮类、萜类、酚类、等多种活性成分。EGB对脑循环及血脑屏障、中枢神经系统、心血管系统，呼吸系统都有影响，并且具抑菌抗病毒、提高机体免疫功能等多种功效。本试验旨在研究EGB（银杏叶提取物）对肉鸡免疫功能的影响，为EGB作为畜禽免疫增强剂提供参考依据。

1 材料与方法

1.1 试验设计与试验材料

选1日龄健康AA肉仔鸡360只，全部为母雏。随机分成5组，每组设6个重复，每个重复12只，饲喂42天。第1组为对照组，基础日粮中不添加抗生素和EGB；第2组为抗生素组，基础日粮中只添加金霉素（90mg/kg饲料）；其余3组为试验组，分别在基础日粮中添加0.15%、0.2%、0.25%的银杏叶提取物（EGB），EGB呈黄棕色粉状物，含银杏萜内酯≥6%及黄酮成分≥24%。

1.2 饲养管理

基础日粮为玉米-小麦型，参照NRC（1994）肉鸡营养需要配合而成的粉料。试验期6周，在7、21日龄接种新城疫-传染性支气管炎二联苗。

1.3 检测项目和方法

1.3.1 血液样品的采集与处理 分别于试鸡21、28、42日龄，每组随机选取12只试鸡（每个重复2只），每只鸡心脏采血（5mL/只），静置 2h，3000r/min离心20min，无菌分离血清，经56℃水浴30min灭活后，用0.22μm微孔滤膜过滤除菌，置-20℃冰箱保存备用。

1.3.2 免疫器官相对重量的测定 各阶段试验结束，每组随机选取12只试鸡（每个重复2只），空腹称重，按常规方法屠宰，记录有关数据。

计算公式为：免疫器官相对重量(g/kg)=免疫器官重量(g)÷鸡活体重(kg)

1.3.3 血清免疫球蛋白的测定 采用ELISAD法测定。

1.3.4 外周血、脾脏淋巴细胞转化率的测定 采用MTT法检测。

1.4 数据处理与统计分析

试验数据使用SPSS16.0统计软件进行方差分析，多重比较用S-N-K法，数据用±SD表示。

2 试验结果与分析

2.1 试验组对肉鸡免疫器官相对重量的影响

由表1可见，21日龄时，试验各处理组间的脾脏指数差异不显著。28日龄、42日龄时，添加0.2%、0.25%EGB组的脾脏指数明显高于对照组。添加0.2%、0.25%EGB组28日龄的脾脏指数较对照组分别提高了 29.9%（p＜0.05） 和 24.8%（p＜0.05），42日龄的脾脏指数较对照组分别提高了15.2%（p＜0.05）、10.4%（p＜0.05）。

21日龄、28日龄、42日龄时，添加EGB组的胸腺指数明显高于对照组（p＜0.05）。各EGB组21日龄的胸腺指数较对照组分别提高了8.5%（p＜0.05）、11.5%（p＜0.05） 和 10.1%（p＜0.05），28 日龄的胸腺指数分别提高了 9.3%（p＜0.05）、13.4%（p＜0.05）和10.0%（p＜0.05），42 日龄的胸腺指数分别提高了6.6%（p＜0.05）、9.2%（p＜0.05）和 7.1%（p＜0.05）。

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21日龄时，试验各处理组间的法氏囊指数差异不显著。28日龄时，添加EGB组的法氏囊指数明显高于对照组，分别提高了 12.8%（p＜0.05）、15.4%（p＜0.05）和 13.2%（p＜0.05）。42日龄时，添加 0.2%、0.25%EGB组的法氏囊指数明显高于对照组，分别提高了 14.4%（p＜0.05）和 11.0%（p＜0.05）。

2.2 试验组对肉鸡体液免疫功能的影响

2.2.1 各处理组对肉鸡血清IgG的影响

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由表2可见，21日龄、28日龄、42日龄添加EGB组的肉鸡血清IgG含量显著高于对照组（P＜0.05）。21日龄，添加EGB组的血清IgG含量较对照组分别提高了 53.0%（P＜0.05）、68.0%（P＜0.05）和 56.5%（P＜0.05）；28日龄时，EGB组的 IgG含量较对照组分别提高了 58.3%（P＜0.05）、78.9%（P＜0.05） 和 66.4%（P＜0.05）；42 日龄时，EGB组的IgG 含量分 别 提高 了 86.9%（P＜0.05）、95.5%（P＜0.05）和 85.4%（P＜0.05）。

2.2.2 各处理组对肉鸡血清IgA的影响

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由表3可见，21日龄、28日龄，试验各处理组的肉鸡血清IgA差异不显著。42日龄，添加0.2%、0.25%EGB组的肉鸡血清IgA含量显著高于对照组（P＜0.05），分别提高了 24.5%（P＜0.05） 和 23.9%（P＜0.05）

2.2.3 试验组对肉鸡外周血淋巴细胞转化率的影响

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由表4可见，21日龄、28日龄，添加EGB组的外周血淋巴细胞转化率明显高于对照组（P＜0.05）。21日龄，添加EGB组的外周血淋巴细胞转化率较对照组分别提高了 3.3%（P＜0.05）、4.5%（P＜0.05）和4.2%（P＜0.05）；28日龄，EGB组的外周血淋巴细胞转化率分别提高了 5.5%（P＜0.05）、6.9%（P＜0.05）和6.4%（P＜0.05）。42日龄，添加 EGB组的外周血淋巴细胞转化率明显高于对照组（P＜0.05），分别提高14.3%（P＜0.05）、18.3%（P＜0.05）和 15.8%（P＜0.05）。2.2.4各处理组对肉鸡脾脏淋巴细胞转化率的影响

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由表5可见，21日龄、28日龄、42日龄，添加EGB组的脾脏淋巴细胞转化率明显高于对照组（P＜0.05）。21日龄，添加EGB组的脾脏淋巴细胞转化率较对照组分别提高了 11.3%（P＜0.05）、19.0%（P＜0.05）和 15.0%（P＜0.05）；28日龄，转化率分别提高了 7.8%（P＜0.05）、13.8%（P＜0.05） 和 10.0%（P＜0.05）；42日龄，转化率分别提高 22.0%（P＜0.05）、25.6%（P＜0.05）和 23.8%（P＜0.05）。

3 讨论与小结

3.1 日粮中添加EGB对肉鸡免疫器官相对重量的影响

本试验结果表明，日粮中添加了EGB的各组肉鸡的对中枢免疫器官的相对质量均在不同程度上高于对照组，表明EGB对肉鸡免疫器官有一定的增重作用，有利于增强肉鸡的免疫性能。免疫器官的发育状态直接影响机体免疫应答水平和抵抗外来微生物的感染和入侵的能力，免疫器官相对重量的增加，说明机体的细胞免疫和体液免疫水平增加。

3.2 日粮中添加EGB对肉鸡血清IgG、IgA的影响

IgG是机体抗感染免疫的主力，同时也是血清学诊断和疫苗免疫后监测的主要抗体。IgA是机体粘膜免疫的“屏障”。试验结果表明，肉鸡日粮中添加不同水平的EGB，各试验组IgG、IgA较对照组均有所提高，21、28、42日龄时添加EGB组IgG较对照组差异显著，42日龄时添加EGB组IgA较对照组差异显著，21、28日龄时添加EGB组较对照组差异不显著。结果表明EGB可以提高血清IgG、IgA，其中血清IgG、IgA以添加0.2%的EGB组42日龄提高最多。

3.3 日粮中添加EGB对肉鸡外周血、脾脏淋巴细胞转化率的影响

淋巴细胞转化率的高低可以反映机体的细胞免疫水平。因此可作为测定机体免疫功能的指标之一。本试验21日龄、28日龄、42日龄，添加EGB组的外周血、脾脏淋巴细胞转化率均明显高于对照组。结果表明添加EGB组均能显著提高淋巴细胞转化率，尤以添加0.2%的EGB组42日龄提高最多。

3.4 银杏叶提取物（EGB）开发成动物免疫增强剂的效果有待进一步研究。 □

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