刘 政,侯玉芬,刘 明
深静脉血栓形成(deep venous thrombosis,DVT)是一种临床常见疾病,多发生于下肢,急性期血栓易脱落导致肺栓塞,危及生命,后期表现为下肢肿胀、顽固性小腿溃疡等后遗症,影响患者生活质量。目前,DVT已成为当今影响人类健康的重要疾病,其发病机制复杂,确切机制尚不清楚。动物实验发现,P-选择素与深静脉血栓形成密切相关[1],但相关临床研究较少。我院于2006年2月—2008年11月,通过观察DVT患者血浆P-选择素的变化,从分子生物学方面探讨其在DVT中的临床意义。
1.1 研究对象 32例DVT病人,从发病到入院时间12 h~15 d,平均5.5 d。男14例,女18例。年龄31~72岁,平均(50.1±13.23)岁。均符合DVT诊断标准,排除严重心肺疾患、恶性肿瘤、糖尿病、结缔组织病及嗜烟患者。对照组为健康成年人20例,男8例,女12例。年龄33~74岁,平均(49.05±12.20)岁。
1.2 标本采集 从肘前静脉抽血1.8 mL,置于含有0.2 mL的2%EDTA·Na2抗凝液的塑料试管中,3 000 r离心10 min,收集上层液(血浆,黄色),置于-20℃保存待测。以ELISA方法测血浆P-选择素水平,药盒由上海太阳生物技术有限公司提供。同时采血,以全自动血球计数仪检测血小板计数(BPC)。
1.3 统计学方法 采用SPSS 11.0统计学软件进行分析,计量资料以均值±标准差(±s)表示,用t检验,计数资料用χ2检验,P<0.05为有显著性差异。
研究结果显示,DVT组和健康对照组性别、年龄之间比较无显著性差异(P>0.05),详见表1。DVT组血浆P-选择素水平为(48.39±10.26)ng/mL,明显高于健康对照组,两者比较有显著性差异(P<0.05);血小板计数测定,DVT组略高于健康对照组,但两者比较无显著性差异(P>0.05),详见表2。
表1 DVT组与健康对照组性别、年龄比较(±s)
表1 DVT组与健康对照组性别、年龄比较(±s)
注:组间性别构成比,经χ2检验,P>0.05;组间年龄比较,P>0.05
n组别DVT组对照组32 20男性14 8女性18 12平均年龄(岁)50.10±13.23 49.05±12.20
表2 DVT组与健康对照组血浆P-选择素水平和血小板计数比较(±s)
表2 DVT组与健康对照组血浆P-选择素水平和血小板计数比较(±s)
注:与对照组比较,*P<0.05
n组别DVT组对照组32 20 P-选择素(ng/mL)48.39±10.26*17.76±6.06血小板(×109/L)203.51±65.55 185.85±45.54
下肢深静脉血栓形成的发病机制甚为复杂。目前,大多数学者仍公认1856年Virchow提出的的三大发病因素,即血液高凝状态、血流滞缓、血管壁损伤是导致血栓形成的的原因。近年来,随着科学研究的深入,发现炎症与血栓形成之间存在着密切的联系[2]。传统上认为,炎症和血栓形成是两个相互独立的病理过程。现研究认为,体内炎症-凝血之间存在网络关系,一方面炎症促进血液高凝状态,易导致血栓形成;另一方面血栓形成中的物质也可引起炎症[3]。有学者认为,炎症的促凝作用以及凝血-炎症网络的相互作用所致的恶性循环,已成为血栓形成的重要发病机制[4]。
当前,关于细胞黏附分子介导的炎症反应在深静脉血栓形成发病机制中的研究较少,这制约了对DVT防治的深入开展。P-选择素属细胞黏附分子家族[5],存在于内皮细胞的Weibel-Palade小体及血小板的α颗粒和致密颗粒中。内皮细胞处于静息状态时,P-选择素几乎不表达,一旦受到炎性介质如凝血酶、组胺、肿瘤坏死因子、氧自由基等刺激后,P-选择素迅速表达于细胞表面[6],介导内皮细胞和炎性细胞的黏附以及激活的血小板与单核细胞和中性粒细胞的黏附[6-7],在炎症和血栓形成中起着中心环节的作用[8]。动物实验研究显示[1],在深静脉血栓形成的早期,P-选择素在血管内皮细胞的表达明显增多。本临床研究表明,DVT患者血浆P-选择素明显高于对照组,但两组间血小板数量无显著性差别,提示P-选择素介导的炎症反应与下肢深静脉血栓形成密切相关,即P-选择素水平的升高,直接反映了静脉壁的炎症反应和血栓形成的恶性循环。因此,P-选择素可以作为早期诊断DVT的标志物,也为DVT患者疗效评估以及抗栓药物的研究提供了实验依据,对DVT发病机制的研究有重要意义。但从文献上看,血浆P-选择素水平在严重心肺疾患及恶性肿瘤、糖尿病、结缔组织病中也可升高,分析DVT患者病情时应予注意。
[1]刘政,侯玉芬,张勇,等.消栓通脉颗粒剂对深静脉血栓形成血管内皮细胞表达P-选择素的影响[J].中国中西医结合外科杂志,2006,12(6):572.
[2]Esmon CT.Inflammation and thrombosis[J].J Thromb Haemost,2003,1(7):1343.
[3]张卉,贺蓉,贺石林.炎症与血栓形成[J].中华医学杂志,2004,84(9):784.
[4]刘泽霖.炎症与血栓形成[J].血栓与止血学,2004,10(3):142.
[5]Mc Ever RP.Properties of Gmp-140,an inducible granule mem⁃brane protein of platelets and endothelium[J].Blood Cells,1990,16(1):73.
[6]Iwamura T,Caffrey TC,Kitamura N,et al.P-selectin expression in a metastatic pancreatic tumor cell line(SUIT-2)[J].Cancer Research,1997,57:1206.
[7]Mayadas TN,Johnson RC,Raybum H,et al.Leukocyte rolling and ex⁃travasation are severely compromised in P selectin-deficient mice[J].Cell,1993,74:541.
[8]阮长耿.炎症与血栓形成[J].中国实验血液学杂志,2004,12(1):1.