鸭病毒性肝炎卵黄抗体的作用及应用

2010-08-16 05:59赵风立宋玉财吴卫东
山东畜牧兽医 2010年10期
关键词:蛋黄效价存活

赵风立 宋玉财 吴卫东

(①山东青岛科亚华动物药业 266111 ②山东烟台市动物卫生监督所 ③菏泽市畜牧站)

鸭病毒性肝炎(Duck virus hepatitis,DVH)病原为鸭肝炎病毒 (Duck epatitis virus,DHV)目前归属于小RNA病毒科的未确定种。鸭肝炎病毒对氯仿、乙醚、胰蛋白酶和PH3.0都有抵抗力,在56℃加热60min仍可存活,在37℃中能抵抗2%来苏儿作用1h和0.1%福尔马林8h,在15~20℃中的1%福尔马林或2%NaOH中能存活2h,在2%的漂白粉溶液中能存活3h,3%酚、碘制剂可使病毒灭活。在自然环境中,病毒可在污染的孵化器肓雏室中存活10周,在阴湿处粪便中存活37d以上,在4℃存活2年以上,在-20℃则可长达9年。鸭病毒性肝炎病毒有三种类型,其中Ⅰ型属于RNA病毒科,病毒抵抗力强,在自然环境中可较长时间存活。II型属于星状病毒,III型属于小RNA病毒。鸭病毒性肝炎病毒3种血清型之间无交叉保护作用。鸭病毒性肝炎病毒与鸭乙型肝炎病毒(属嗜肝DNA病毒科)无任何相关性。

1 鸭卵黄抗体的产生

我国于1958年首次在上海地区某些鸭场发现鸭肝炎,迄今已流行半个多世纪,1984年郭玉璞等证实我国鸭肝炎流行株为I型。DHV-I型又称古典株 ,此病毒流行甚广,呈世界性分布,主要侵害3周龄以内的雏鸭,发病急、传播快、死亡率可达死亡率为50%~90%。近年来,美国、印度、法国等国家已发现Ⅰ型DHV的变异株,美国已对其分离物进行了比较,证明其确为I型DHV的一个变异株,命名为Barn-hardt株,与DHV-I型在中和试验中呈部分交叉反应。1992年Sandhu也发现一类毒株,与I型仅有部分血清学相关性,称之为I型的变异株,命名为Ⅰa型。2007年,中国、韩国和台湾地区的学者也先后报道和证实了DHV-I型的变异。

简易的鸭舍、落后的设备、粗放的管理、传统的技术很难生产出高质量标准的鸭肉产品,农村规模化饲养户由于缺乏系统而全面的技术培训,生产过程中普遍存在着缺乏隔离、消毒、预防、治疗等综合防疫措施的全面落实,给鸭病毒性肝炎等传染病的爆发提供了温床。尤其是现在市场分离毒不断出现变异毒株,给本病的防治带来很大的困难。

鸡、鸭、鹅等禽类的蛋在营养成分上大致相同,主要由蛋黄、蛋清(即蛋白)和蛋壳构成。鸭蛋每个约重60~75g,其中蛋黄占32%,蛋清占57%,其余11%为蛋壳。其中蛋黄又由如下图所示的成分所构成:

抗体(免疫球蛋白,Ig)是机体受到外来抗原物质刺激后,机体免疫系统细胞产生的可以特异性地识别和结合外来抗原并使之失活的一类球蛋白。家禽经特定抗原免疫后,可产生相应的特异性抗体进入血液循环,当血液流经卵巢时,特异性抗体在卵细胞中逐渐蓄积,并储存于卵黄中,这种抗体称为卵黄抗体(Immunoglobulin of yolk,IgY),它是卵黄中唯一的免疫球蛋白,具有特异性和针对性,无毒副作用。

随着养鸭业的发展,某些病原体的变异也越来越快,虽然疾病控制手段越来越多,也越来越先进,但疾病感染压力却越来越大,疾病互传的可能性也越来越大,畜禽疾病仍旧是影响养殖效益和人民健康的重要因素之一。无论政府部门还是养殖业户、组织都迫切需要有相应的快速有效的对策来控制疾病的发展,降低死亡,减小损失。毋庸置疑,外源性的特异性抗体是治疗

某些特定传染病的最直接最快速最有效的方法。卵黄抗体作为一种价廉易得的外源性特异性抗体,其使用效果已经在临床兽医学上得到了验证和认同。从图中可以看出,在治疗鸭病毒性肝炎,使用卵黄抗体时,起到关键作用的是卵黄中的免疫球蛋白(IgY),IgY的作用非常广泛。

2 鸭卵黄抗体主要的作用

(1)特定的卵黄抗体能黏附于特定病毒的衣壳上,直接抑制病毒的生长繁殖;(2)可以黏附于细菌的菌毛上,使之不能黏附于黏膜上皮细胞,失去感染能力;(3)能够促进单核巨噬细胞的吞噬作用(调理作用);(4)中和细菌、霉菌等毒素的毒性(中和毒素);(5)与病毒抗原结合使病毒失去感染宿主细胞的能力(中和病毒)。

3 鸭卵黄抗体的应用

鸭病毒性肝炎卵黄抗体的作用即是蛋黄中免疫球蛋白的作用,蛋黄中所含有的大量脂蛋白及脂肪等物质没有任何治疗作用且体积大,粘稠度高,注射困难且难以吸收,注射后对机体的应激大,易造成过敏反应,是外源性致热原,加上注射后易造成注射部位局部组织出血、肿胀、坏死,坏死的组织也会导致机体发热,而发热会造成机体神经调节、体液调节等功能的紊乱,从而导致鸭群采食量减少,抵抗力下降,继发传染性浆膜炎、大肠杆菌等疾病。大量的调查还发现,目前市面上可见的粗制抗体几乎都是地下作坊生产的“三无”产品,生产环境及产品质量令人堪忧。这些粗制抗体不仅抗体效价难以保证,而且通常会污染禽呼肠孤病毒、禽淋巴白血病病毒、网状内皮增生因子、大肠杆菌、沙门氏菌、支原体等外源性致病原。在注射抗体预防或者治疗鸭病毒性肝炎时,极有可能造成垂直传播病原或其他一些细菌、病毒的扩散甚至疾病的暴发,带来严重的经济损失。此外,由于非法造假者往往试图通过添加大剂量的甲醛、青、链霉素等措施来延长其产品的保质期,增加所谓的使用安全性,但结果往往造成更大的应激和严重的药物残留。这就是鸭病毒性肝炎粗制抗体的购买者和使用者对粗制抗体的使用效果产生疑问的重要原因之一。

目前“有的鸭场从未发生过肝炎,种鸭根本没有接触过肝炎病毒,种鸭未曾注射过鸭肝炎疫苗”的情况已经罕见,加上许多鸭场刚接雏就有肝炎死鸭,如按有的资料介绍的1~3日龄给雏鸭注射鸭肝炎疫苗已不可能,只能1日龄即注射鸭肝炎蛋黄抗体或血清。由于当前鸭肝炎血清型已多样化,需选用多血清型的鸭肝炎蛋黄抗体或血清。还应在蛋黄抗体中加入核酸,或黄芪多糖注射液,或α-干扰素,在鸭的饮水中加入双黄连口服液、葡萄糖水、维生素C等。市场上的鸭肝炎与其他病毒的二联、三联、四联甚至五联的蛋黄抗体对肝炎的疗效较差。

临床资料显示:鸭肝炎蛋黄抗体在强毒污染的鸭场仅有7~9d的保护期,所以应密切注视小鸭的动态,力争在又一只肝炎死鸭出现后,立即加大剂量再注射蛋黄抗体和口服药物,不要贻误治疗的最佳时机。在笔者的临床实践中,有许多肉鸭注射过3次高免蛋黄抗体才得以出栏。

精制就是将蛋黄中的免疫球蛋白进行分离纯化的过程。已知蛋黄是由水溶相(Water soluble fraction, WSF)和水不溶相(Water insoluble fraction, WIF)构成的乳浊液。WIF主要为脂蛋白构成,而蛋黄抗体存在于蛋黄的WSF中。WSF中的脂蛋白类含量甚微,其物理性状为近乎透明的透明液体。因此蛋黄抗体精制过程即是WSF的分离过程。信得科技集团的精制蛋黄抗体采用了物理、化学、生物等多重灭活技术,并结合使用酸化法、高速离心、超滤等现代生物技术HOF生产工艺,将蛋黄中的免疫球蛋白进行有效的分离纯化。大量临床使用案例表明,信得精制蛋黄抗体具有效价稳定、效果确实、保存时间长和便于应用的优点。同时精制蛋黄抗体不会在注射部位残留,对胴体品质无任何影响。

精致抗体的优点:(1)保护谱广、治愈率高:本产品在制备过程中除采用了标准毒株外,还采用了国内各养鸭密集区的超强毒株及变异株,对鸭病毒性肝炎变异地区亦有非常好的防治效果,对发病鸭群的治愈率达95%以上;(2)提纯浓缩、抗体效价高:梯密度浓缩技术,精制提纯到免疫球蛋白,效价是一般市售产品的4~5倍,达到1:1024~1280;(3)见效快,保护时间长:5~6h控制病情,降低死亡,恢复精神状态,注射一次有效抗体效价能够维持10d以上;(4)注射剂量小,应激小,无毒副作用:将蛋黄中脂肪、脂蛋白分离去除,其性状为近乎透明的无色液体,不含任何有害物质和外源污染,安全性高,对机体无任何刺激及毒副作用,对胴体品质无影响;(5)抗体粘稠度低,流动性好,使用时无需解冻,注射方便快捷,只需使用小号针头,更有利于注射部位皮肤愈合;(6)抗逆性强,疫苗耐热保护技术及疫苗专用包装,效价稳定,保存时间长:2~8℃条件保存18个月,常温条件下保存6个月对抗体效价无任何影响。

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