浅谈尿沉渣检查

贾凌筱

伴随着检验医学的迅速发展，检验技术的日异更新，各种各样的尿液分析仪越来越受到各医院的普遍应用。现综述如下。

1 尿液检查方法

随着尿液检查方法的规范化、标准化，尿有形成分定量法测定已被推广，目前最常用的方法主要有两种，一种是以显微镜为基础的形态学检验法，另一种是以流式细胞术为原理的流式细胞计数法。DiaSys尿沉渣分析仪按照经典的显微镜镜检方法的流程来设计，工作时通过低倍镜以多于人工镜检检查量进行采样，然后以低倍镜抓取目标定位后转高倍镜进行计数，计算机对其结果进行处理和换算。

2 尿沉渣手工制片镜检

2.1 直接镜检法 将尿液充分混匀，取其中1滴尿直接涂于载玻片上，依据各种有形成分的形态特点，用显微镜观察作出报告。

2.2 玻片画框法 用标定好的滴管加混匀尿2滴涂满蜡笔画好的25.2 mm×25.2 mm框内，静止3 min后累计20个高倍视野细胞数，结果以每微升细胞数报告。细胞数/μl=T×1/20×A/B×1/V。式中T=细胞累计数，20=所观察的视野数，A=标本分布面积，B=高倍视野面积=(高倍视野直径/2)2.π，V=标本用量(μl)，高倍视野直径=目镜中光栏直径/目镜放大倍数，光栏直径可用千分尺测出。

2.3 自然沉降法 将尿液在室温下放置一定时间(15～30 min)后，移去上层的尿液，保留底层大约0.2 ml左右，然后混匀，取其中1滴沉淀于载玻片上，镜检同直接镜检法。

2.4 离心沉淀法 尿液10 ml离心5 min，相对离心力(RCF)为400，弃上清留沉渣尿量0.2 ml混匀，吸取20 μl，滴在玻片上用18 mm×18 mm盖片覆盖，先用10×10低倍镜观察全片，再用10×40高倍镜仔细观察，检查细胞至少10个视野，检查管型至少20个低倍视野，报告以高倍视野所见最低至最高数字表示。建议国内逐步以每微升细胞数报告。

2.5 染色法 包括湿润染色法及特定成分染色法。

2.6 特殊显微镜检查

2.6.1 相差显微镜法 相差显微镜又称相衬显微镜，是以光的衍射和干涉现象照射标本，产生明暗不同的反差识别，有助于增强透明与半透明的有形成分的轮廓，尤其是透明管型、不典型红细胞、血小板的辨别。

2.6.2 干涉显微镜法 在不同位相时，当两种相同颜色的光波相遇时，其亮度发生增强或减弱的变化，从而提高物体的清晰度，可观察到细胞或管型的三维空间结构。

2.6.3 偏振光显微镜法 利用光的偏振特性对光有双折射性的物体进行鉴别，可观察活细胞的内含物、神经纤维、植物纤维的结构细节和动物肌肉纤维等。可分析变性过程，观察到细胞的死活:正常细胞对光偏振呈左旋，肿瘤细胞多数呈右旋，可显示盐类结晶在自然光下见不到的精细结构。

2.6.4 透射电镜法 利用电子束作为“照明波源”可明显提高分辨率，将尿沉渣标本切成超薄片在电子显微镜下观察，可准确分辨出细菌管型、白色念珠菌管型、血小板管型、粗颗粒管型和细颗粒管型等。

3 尿沉渣定量计数板法

取一定量(10 ml)尿液置特制的离心管内，在规定离心时间和转速的条件下离心沉淀，移去上清尿液，保留一定量的尿沉淀物，取1滴滴入计数板内，在显微镜下计数，然后换算成一定体积(1/μl)内尿有形成分的含量。

3.1 Li-Ucc型尿沉渣计数板 计算室为正方形边长9 mm，池深0.125 mm，混匀尿滴入池内计数规定区结果除以5，细胞少时计数全室结果除以10，即为每微升细胞数。

3.2 牛鲍计数板法 将混匀尿充池，计数9大格细胞数×10÷9，即为每微升细胞数。

3.3 FR定量板法 混匀尿10 ml于Biostd离心管内，经1 500 r/min离心5 min，倾去上清余0.25 ml沉渣即留在管底缩小区内，将沉渣混匀滴入FR板内，计数10大格即得每微升细胞数。每板10人份一次性使用，保湿，细胞形态及分布稳定。

4 干化学法

将试剂包含在纤维素中作为反应部分黏附在塑料支持片上干燥而成试纸带，以镜检为标准半定量检测尿中成分。1996年的推荐方法中确定，干化学检验只有符合下列四项要求才可以不作镜检:尿白细胞结果为阴性;红细胞结果阴性;尿蛋白为阴性;亚硝酸盐为阴性。来源于肾科标本不适合干化学筛选，应一律显微镜检查。

5 尿沉渣自动化分析

尿沉渣分析自动化的研究由来己久，但难度较大。直到1986年才由美国国际遥控摄像系统有限公司研制生产了世界上第一台高速摄像机式的尿沉渣自动分析仪。目前，尿沉渣分析仪主要有两大类:基于尿沉渣镜检影像分析原理;基于尿沉渣流式细胞术和电阻抗检测原理。影像式尿沉渣(或称“工作站”)其检测原理与人工显微镜检查原理基本相似，都是直观地观察有形成分的形态，但须经过严格的定时、定速离心，而后留取定量的尿沉渣，由配套动力装置将其转移至显微镜载物台上刻有标尺的流动样品池内，通过频闪光源灯、相聚光镜、彩色摄像机等，在电脑显示屏上得到清晰的尿沉渣画面，再由操作者在屏幕上统计出各种有形成分的数目，由计算机自动换算成每微升单位的数据。同普通光学显微镜方法相比，其分析标准定量、视野清晰、速度快捷、准确度高。在全自动尿沉渣分析检测分析中，应用流式细胞和电阻抗分析的原理:尿液中细胞等经荧光色素染色后，在鞘流液的作用下，形成单个、纵列细胞流，通过氩激光检测区，仪器检测荧光、散射光和电阻抗的变化;当仪器在捕获了荧光强度Fl、前向荧光脉冲宽度Flw、前向散射光强度Fsc、前向散射光脉冲宽度Fscw、电阻抗信号后，综合识别和计算得到了相应细胞的大小、长度、体积和染色质长度等资料，并做出红细胞、白细胞、细菌、管型等的散射图及定量报告。

［1］丛玉隆．血液学体液学检验与临床释疑．北京:人民军医出版社，2004，58:66-68．

［2］温洁新，顾可梁，陈巧林，等．尿液有形成分三种检测方法的对比分析．江西医学检验，2005，23(2):125-126．